發(fā)布時間：2018-06-10 18:51

  本文選題：干細胞 + 細胞分離��； 參考：《吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2008年06期

【摘要】：目的:進行人脂肪干細胞的分離、體外培養(yǎng)及鑒定,為組織工程的進一步研究提供實驗依據(jù)。方法:將剪碎的人脂肪組織加入Ⅰ型膠原酶消化,離心。將細胞懸液置于6孔培養(yǎng)板中,37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),細胞達80%融合時進行傳代。選取第3代細胞,進行免疫組織化學(xué)染色,檢測細胞表面抗原標(biāo)記物;選取第3代細胞,分為成骨誘導(dǎo)組和成脂誘導(dǎo)組,每組又分為誘導(dǎo)組(加入相應(yīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基)及對照組(未經(jīng)誘導(dǎo)的細胞)。成骨誘導(dǎo)72h后進行堿性磷酸酶(AKP)含量檢測,8d后進行茜素紅染色,檢驗細胞內(nèi)是否出現(xiàn)鈣沉積;成脂誘導(dǎo)2周后進行油紅O染色,檢測細胞內(nèi)是否形成脂滴。結(jié)果:培養(yǎng)細胞均有CD44、CD49d抗原陽性表達,不表達CD45、CD106抗原;成骨誘導(dǎo)72h后,誘導(dǎo)組細胞內(nèi)AKP含量(0.4883U·g-1prot)較對照組(0.0632U·g-1prot)明顯增高(P0.05);8d后誘導(dǎo)組茜素紅染色陽性,對照組陰性;成脂誘導(dǎo)2周后油紅O脂肪顆粒染色為陽性,對照組為陰性。結(jié)論:利用原代細胞培養(yǎng)技術(shù)可成功地從人脂肪組織中分離出脂肪干細胞。
[Abstract]:Aim: to isolate, culture and identify human adipose stem cells in vitro. Methods: the shredded human adipose tissue was digested by type I collagenase and centrifuged. The cell suspension was cultured in a 6-well culture plate at 37 鈩，

本文編號：2004242