本文選題：禽流感病毒 + 反向遺傳學(xué)�。� 參考：《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床》2015年04期

【摘要】：目的利用反向遺傳學(xué)技術(shù)構(gòu)建具有感染性的H9N2亞型禽流感病毒,并揭示其在不同細(xì)胞中的復(fù)制特性。方法以A/Quail/Hong Kong/G1/97(H9N2)禽流感病毒基因組RNA為模板,用RT-PCR技術(shù)獲得該病毒的8條完整基因片段,并分別將它們插入到p HW2000載體上,最終在293T細(xì)胞中包裝產(chǎn)生重組H9N2病毒。并將重組的H9N2病毒感染不同細(xì)胞,觀察病毒在不同細(xì)胞上的增殖狀況來揭示該病毒在不同細(xì)胞上的復(fù)制特性。結(jié)果應(yīng)用流感病毒8質(zhì)粒反向遺傳學(xué)技術(shù),成功獲得重組病毒,并揭示了該毒株在不同細(xì)胞(A549,MDCK,Vero)中的復(fù)制特性,發(fā)現(xiàn)A549人肺腺癌細(xì)胞更適宜H9N2病毒的正常復(fù)制。此外還分析總結(jié)了該毒株的與病毒毒力相關(guān)的重要位點(diǎn)特征。結(jié)論成功建立了H9N2禽流感病毒的反向遺傳系統(tǒng),該系統(tǒng)的建立為在分子水平研究H9N2病毒以及制備H9N2禽流感疫苗提供了依據(jù)。
[Abstract]:Objective to construct an infectious H9N2 subtype avian influenza virus by reverse genetics and to reveal its replication characteristics in different cells. Methods the genomic RNA of A/Quail/Hong KongG1 / 97 H9N2) avian influenza virus was used as a template. Eight complete gene fragments of the virus were obtained by RT-PCR technique and inserted into p HW2000 vector respectively. The recombinant H9N2 virus was finally packaged in 293T cells. The recombinant H9N2 virus was infected with different cells and the proliferation of the virus on different cells was observed to reveal the replication characteristics of the virus on different cells. Results Influenza virus 8 plasmid reverse genetics technique was used to obtain the recombinant virus successfully, and the replication characteristics of the virus strain in different cell lines A549MDCKG Verov were revealed. It was found that A549 human lung adenocarcinoma cells were more suitable for normal replication of H9N2 virus. In addition, the characteristics of virulence related to the virulence of the strain were analyzed and summarized. Conclusion the reverse genetic system of H9N2 avian influenza virus has been successfully established, which provides a basis for the molecular study of H9N2 virus and the preparation of H9N2 avian influenza vaccine.
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)研究所;
【基金】：病毒性疾病感染組學(xué)關(guān)鍵技術(shù)平臺十二五重大專項(xiàng)(2013ZX10004601-002)
【分類號】：R373.13

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本文編號：1983750