本文選題：藥物性肝損傷(DILI) + 高CYPs酶活性大鼠原代肝細胞模型�。� 參考：《藥物評價研究》2015年04期

【摘要】：目的建立一種靈敏、快速的高細胞色素P450(CYPs)酶活性的大鼠原代肝細胞模型,用于評價經CYPs酶代謝后產生肝毒性的藥物。方法分別采用苯巴比妥和β-萘黃酮兩種CYPs酶廣譜誘導劑構建大鼠原代肝細胞模型;應用"cocktail"探針底物法考察兩種誘導劑對CYPs酶的影響;以基于CYPs酶代謝導致肝毒性的藥物他克林(TAC)、雙氯芬酸鈉(DIC)和對乙酰氨基酚(PAR)為模型藥物,評價所構建的高CYPs酶活性大鼠原代肝細胞模型與普通大鼠原代肝細胞間靈敏性的差異;應用所構建的高CYPs酶活性大鼠原代肝細胞模型評價維拉帕米(VER)的肝毒性。結果與普通大鼠原代肝細胞相比,3種模型藥物在高CYPs酶活性大鼠原代肝細胞中,在較低劑量時可使細胞上清液中乳酸脫氫酶(LDH)、細胞中活性氧(ROS)水平升高,線粒體膜電位(MMP)水平下降,或相同劑量下得到更嚴重的損傷結果,CYPs酶抑制劑1-aminobenzotriazole(ABT)和metyrapone(MET)能抑制這3種損傷的發(fā)生;100μmol/L維拉帕米在普通大鼠原代肝細胞中并未引起LDH、ROS和MMP的改變,但在高CYPs活性大鼠原代肝細胞模型中,會引起細胞損傷,ABT和MET能抑制這種損傷。結論經誘導建立的兩種高CYPs酶活性大鼠原代肝細胞模型能更靈敏的評價基于CYPs酶代謝致毒藥物的肝毒性;兩種誘導劑誘導得到的高CYPs酶活性大鼠原代肝細胞模型對經不同CYPs酶亞型代謝的藥物評價結果有各自優(yōu)勢。應用高CYPs酶活性大鼠原代肝細胞模型證實維拉帕米的致毒機制是經CYPs酶代謝產生肝毒性。
[Abstract]:Objective to establish a sensitive and rapid rat hepatocyte model with high cytochrome P450 CYPsase activity and to evaluate the hepatotoxicity induced by CYPs enzyme metabolism. Methods the rat primary hepatocyte model was established with phenobarbital and 尾 -naphthalene flavonoids as extended-spectrum inducers, and the effects of two inducers on CYPs enzyme were investigated by "cocktail" probe substrate method. The CYPs enzyme metabolization-induced hepatotoxic drugs, tacrine, diclofenac sodium and paracetamol, were used as model drugs to evaluate the sensitivity of the primary hepatocyte model with high CYPs enzyme activity between the primary rat and the normal rat. The hepatotoxicity of verapamil was evaluated by using the rat primary hepatocyte model with high CYPs activity. Results compared with normal rat primary hepatocytes, three model drugs could increase the level of lactate dehydrogenase (LDH) and reactive oxygen species (Ros) in the supernatant at lower doses in the primary rat hepatocytes with high CYPs enzyme activity. The level of mitochondrial membrane potential (MMP) was decreased, or the damage was more serious at the same dose. The results showed that CYPs inhibitor 1-aminobenzotriazoledol (ABT) and metyrapone (MET) could inhibit the occurrence of these three kinds of damage, and verapamil did not cause the changes of LDHRos and MMP in the primary cultured rat hepatocytes. However, in the primary hepatocyte model of rats with high CYPs activity, cell damage could be inhibited by MET and ABT. Conclusion the two rat hepatocyte models with high CYPs enzyme activity can be more sensitive to evaluate the hepatotoxicity based on the metabolizing drugs of CYPs enzyme. The rat primary hepatocyte models with high CYPs enzyme activity induced by two inducers had their own advantages in the evaluation of drug metabolism by different CYPs isoforms. The primary rat hepatocyte model with high CYPs activity confirmed that the toxic mechanism of verapamil was induced by the metabolism of CYPs enzyme.
【作者單位】： 天津中醫(yī)藥大學中藥學院;省部共建國家重點實驗室培育基地天津市現(xiàn)代中藥重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金(No.81373890) 教育部高等學校博士學科點專項科研基金(No.20121210110011) 教育部長江學者與創(chuàng)新團隊發(fā)展計劃(No.IRT-14R41)
【分類號】：R329.2

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 盛云華;周綺;姚廣濤;金若敏;;酶生物標志物在肝毒性評價中的應用[J];醫(yī)學綜述;2011年08期

2 鄢良春;張婷婷;吳懿;趙軍寧;宋軍;華樺;李莉;;蒼耳子及蒼術苷對大鼠原代肝細胞的毒性作用研究[J];中藥藥理與臨床;2012年03期

3 顧立強;馬冰潔;孟夏;畢開順;陳曉輝;;中藥肝毒性及肝臟保護作用的研究方法進展[J];中國藥物警戒;2013年07期

4 顏晶晶;俸珊;何麗娜;何新;;延胡索乙素對映體對人肝微粒體細胞色素P450酶抑制作用機制研究[J];中草藥;2015年04期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 喬靖怡;周璐;金若敏;姚廣濤;;四氯化碳致大鼠肝損傷早期血清總膽汁酸、α-谷胱甘肽S轉移酶、嘌呤核苷磷酸化酶和鳥氨酸氨基甲酰轉移酶的變化[J];中國藥理學與毒理學雜志;2013年04期

2 韓燕全;洪燕;夏倫祝;高家榮;汪永忠;孫艷華;易進海;;UPLC指紋圖譜技術結合毒性成分含量優(yōu)選蒼耳子的炮制工藝[J];中國中藥雜志;2014年07期

3 楊婷婷;江振洲;張陸勇;;經由線粒體損傷誘發(fā)的藥源性肝損傷研究進展[J];藥學進展;2014年11期

4 游達禮;胡善友;;質子泵抑制劑聯(lián)合氯吡格雷治療心血管疾病的安全性研究進展[J];醫(yī)學綜述;2015年14期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 鄧旭東;Caco-2細胞中空纖維反應器的構建及其對口服藥物吸收的預測[D];浙江大學;2012年

2 劉嬌;黃藥子配伍甘草對氧化應激及大鼠肝臟CYP1A2、CYP2E1蛋白表達影響的研究[D];福建中醫(yī)藥大學;2014年

3 張日;氨氯地平/阿托伐他汀對血脂正常的高血壓患者清晨血壓及血管功能的影響[D];大連醫(yī)科大學;2014年

4 李波;吳茱萸ADME/Tox特征及肝靶活性—毒性機制研究[D];瀘州醫(yī)學院;2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 闞衛(wèi)軍;賀盟;;蒼耳子中毒死亡1例[J];法醫(yī)學雜志;2012年01期

2 陳靖;朱月永;;血清膽堿酯酶和總膽汁酸與慢性乙型肝炎患者肝臟病理損害的關系探討[J];實用肝臟病雜志;2008年02期

3 周炳能;袁水斌;;血清總膽汁酸測定在肝膽疾病中的臨床價值[J];實驗與檢驗醫(yī)學;2009年02期

4 張淑艷;熊惠順;;肝病患者血清前白蛋白和白蛋白的檢測及臨床意義[J];臨床軍醫(yī)雜志;2010年02期

5 周林華;鄧德耀;劉春林;馮倩;支國華;李增安;;肝病患者血清前白蛋白和總膽汁酸聯(lián)合檢測的臨床價值[J];昆明醫(yī)學院學報;2009年09期

6 陸衛(wèi)英,孫蓮娜;血清前白蛋白在肝病中的臨床意義[J];臨床肝膽病雜志;2005年01期

7 劉曉華;;總膽汁酸檢測在病毒性肝炎中的意義[J];齊齊哈爾醫(yī)學院學報;2008年07期

8 曹蓓;阿基業(yè);王廣基;鄭天;劉林生;李夢婕;石建;王新文;趙春艷;;代謝組學在臨床研究中的應用及進展[J];生命科學;2010年08期

9 陳億長,林漫燕;血清總膽汁酸測定在肝病的臨床應用[J];實用醫(yī)技雜志;2005年10期

10 趙華清;閆明先;;慢性肝病患者血清前白蛋白和總膽汁酸檢測的臨床價值[J];泰山醫(yī)學院學報;2009年03期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 譚洪玲;楊明會;王宇光;馬增春;高月;;大鼠原代肝細胞培養(yǎng)方法的建立[J];中國應用生理學雜志;2006年04期

2 徐麗娜;鞠雷;顧憲銳;張恒;馬玉忠;;大鼠原代肝細胞的分離與培養(yǎng)[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2007年12期

3 張丁丁;辛永寧;羅兵;姜曼;劉昊剛;宣世英;;一種簡化的分離與培養(yǎng)小鼠原代肝細胞的方法[J];青島大學醫(yī)學院學報;2014年01期

4 吳寧;吳承龍;許慶忠;雷霆雯;馬小平;;一種改良的大鼠原代肝細胞培養(yǎng)方法[J];貴陽醫(yī)學院學報;2007年02期

5 楊天燕;賴靜;韋錦斌;;小鼠原代肝細胞的分離與培養(yǎng)[J];內科;2011年05期

6 王鳳飚,李濤,杜智,杜斌,張金卷;大量幼豬原代肝細胞的分離與培養(yǎng)[J];生物醫(yī)學工程與臨床;2004年02期

7 倪慧;王玲玲;韓濤;劉學忠;;大鼠原代肝細胞培養(yǎng)方法的建立[J];現(xiàn)代農業(yè)科技;2013年12期

8 裔傳卉;汪紀倉;劉宗平;;大鼠原代肝細胞分離培養(yǎng)方法的改良[J];江蘇農業(yè)科學;2009年05期

9 楊文蘭;韓春春;王繼文;劉丹丹;萬火福;劉賀賀;潘志雄;;胰島素對鵝原代肝細胞增殖及蛋白合成的影響[J];生物學雜志;2014年02期

10 藍嵐;王朝旭;史銳;王克波;劉寶圣;姜珊;;全反式視黃酸對大鼠原代肝細胞鐵代謝的影響[J];衛(wèi)生研究;2009年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張丁丁;辛永寧;羅兵;姜曼;劉昊剛;宣世英;;一種易于推廣的分離與培養(yǎng)小鼠原代肝細胞的方法[A];中華醫(yī)學會第十六次全國病毒性肝炎及肝病學術會議論文匯編[C];2013年

2 王鳳飚;李濤;杜智;杜斌;張金卷;;大量幼豬原代肝細胞的分離與培養(yǎng)[A];天津市生物醫(yī)學工程學會2004年年會論文集[C];2005年

3 張麗芳;胡曉;;蛇床子素在大鼠原代肝細胞中代謝的研究[A];中國藥學會應用藥理專業(yè)委員會第三屆學術會議、中國藥理學會制藥工業(yè)專業(yè)委員會第十三屆學術會議暨2008生物醫(yī)藥學術論壇論文匯編[C];2008年

4 洪勝輝;張軍;張蕊;王來娣;邵丹;張宜輝;董飚;段修軍;龔道清;;鵝原代肝細胞的簡易、高純分離及培養(yǎng)[A];安全優(yōu)質的家禽生產——第十五次全國家禽學術討論會論文集[C];2011年

5 莊鵬;江元森;馬會慧;李志剛;麥麗;楊林;姚集魯;;長期培養(yǎng)的大鼠原代肝細胞功能和形態(tài)學觀察[A];中華醫(yī)學會第十二次全國病毒性肝炎及肝病學術會議論文匯編[C];2005年

6 張煒;陳文芳;齊浩;劉淼;屈穎;任兆玉;;紫外輻射對小鼠原代肝細胞細胞內鈣離子濃度的影響[A];第六屆全國光生物學學術研討會論文集[C];2004年

7 王和平;管媛媛;佟雷;王建明;;肝復康滴丸對四氯化碳損傷大鼠原代肝細胞的保護作用[A];2008年中國藥學會學術年會暨第八屆中國藥師周論文集[C];2008年

8 蘇榮勝;顏成;朱華軍;李海琴;唐兆新;;銅對肉雞原代肝細胞活性及糖原含量的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜內科學分會第七屆代表大會暨學術研討會論文集（下冊）[C];2011年

9 張先杰;王瑩;宋茂民;孫家邦;段鐘平;陳煜;張晶;鄭素軍;;三明治構型大鼠原代肝細胞長期培養(yǎng)及生物學特性的研究[A];第三屆全國重型肝病及人工肝血液凈化學術年會論文集（上冊）[C];2007年

10 楊樺;金福東;毛艷斌;張曉棠;林松;王穎;宋艾芝;劉桂芬;魯潤銘;;乳豬原代肝細胞的分離培養(yǎng)[A];第一屆全國人工肝及血液凈化學術年會暨全國人工肝及血液凈化攻關協(xié)作組成立大會論文集[C];2004年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 周龍;丙泊酚對小鼠原代肝細胞胰島素抵抗的影響[D];南方醫(yī)科大學;2014年

2 許斌;鴨原代肝細胞對鴨乙型肝炎病毒易感性相關蛋白的研究[D];復旦大學;2006年

3 黃屹;乙型肝炎病毒在原代肝細胞共培養(yǎng)模型上的增強感染研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

4 劉振威;健康成人原代肝細胞體外實驗測定異煙肼和利福平的肝代謝和肝毒性的研究[D];復旦大學;2004年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蔣麗娜;HCVcore蛋白誘發(fā)肝脂肪變機制的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學;2011年

2 柏靈靈;炎癥因子上調SREBP-1致小鼠原代肝細胞脂質異常聚集及損傷[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

3 張麗芳;蛇床子素在大鼠原代肝細胞中代謝的研究[D];南昌大學;2008年

4 薛梅;丙型肝炎病毒對樹，

本文編號：1976263