本文選題：MUC1 + 腫瘤疫苗　； 參考：《吉林大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： MUC1是粘蛋白家族成員,廣泛分布于腫瘤細(xì)胞表面,是腫瘤疫苗研究的有效靶點(diǎn)。目前,國(guó)外學(xué)者相繼研制出許多以MUC1為靶點(diǎn)的腫瘤疫苗。本研究室在國(guó)內(nèi)首次研制重組MUC1-MBP融合蛋白腫瘤疫苗,我們已經(jīng)構(gòu)建重組MUC1-MBP融合蛋白表達(dá)質(zhì)粒,對(duì)表達(dá)的蛋白進(jìn)行了初步純化,并在MUC1-MBP疫苗的藥效學(xué)研究方面取得了可喜的進(jìn)展。但是目前的純化方法得到的重組MUC1-MBP融合蛋白的純度還較低,其毒理學(xué)和穩(wěn)定性的研究也沒(méi)有充分進(jìn)行。本研究從這三個(gè)方面著手,對(duì)該蛋白疫苗進(jìn)行進(jìn)一步研究。 研究通過(guò)IPTG誘導(dǎo)MUC1-MBP融合蛋白在大腸桿菌中表達(dá);制備MBP特異性抗體免疫親和層析柱,進(jìn)一步純化MUC1-MBP融合蛋白;通過(guò)豚鼠全身過(guò)敏試驗(yàn)和急性毒性試驗(yàn)檢測(cè)MUC1-MBP融合蛋白疫苗的安全性;通過(guò)恒溫穩(wěn)定加速試驗(yàn)確定MUC1-MBP融合蛋白的穩(wěn)定性;并通過(guò)添加單一穩(wěn)定劑尋求優(yōu)化的MUC1-MBP融合蛋白的保存條件。 通過(guò)改進(jìn)純化工藝,重組MUC1-MBP融合蛋白的純度明顯提高;經(jīng)安全性和穩(wěn)定性的初步研究,結(jié)果表明重組MUC1-MBP融合蛋白安全、穩(wěn)定,該結(jié)論為進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)MUC1-MBP疫苗奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:MUC1 is a member of mucin family, widely distributed on the surface of tumor cells, and is an effective target of tumor vaccine research. At present, many tumor vaccines targeting MUC1 have been developed by foreign scholars. The recombinant MUC1-MBP fusion protein tumor vaccine was developed in our laboratory for the first time in China. We have constructed the recombinant MUC1-MBP fusion protein expression plasmid, purified the expressed protein, and made gratifying progress in the pharmacodynamics of MUC1-MBP vaccine. However, the purity of recombinant MUC1-MBP fusion protein obtained by the present purification method is still low, and the toxicology and stability of the recombinant MUC1-MBP fusion protein have not been fully studied. In this study, the protein vaccine was further studied from these three aspects. The expression of MUC1-MBP fusion protein in Escherichia coli was induced by IPTG, and the MUC1-MBP fusion protein was further purified by preparing MBP specific antibody immunoaffinity chromatography column. The safety of MUC1-MBP fusion protein vaccine was detected by whole body allergy test and acute toxicity test, and the stability of MUC1-MBP fusion protein was determined by constant temperature stability accelerated test. The optimal preservation conditions of MUC1-MBP fusion protein were obtained by adding a single stabilizer. The purity of the recombinant MUC1-MBP fusion protein was improved by improving the purification process, and the safety and stability of the recombinant MUC1-MBP fusion protein were studied. The results showed that the recombinant MUC1-MBP fusion protein was safe and stable. This conclusion laid a foundation for further research and development of MUC1-MBP vaccine.
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：1970698