發(fā)布時間：2018-06-01 21:54

  本文選題：肺炎克雷伯菌 + 氨基糖苷類修飾酶　； 參考：《中南大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： 目的調(diào)查中南大學(xué)湘雅醫(yī)院臨床分離的肺炎克雷伯菌藥物敏感性,檢測氨基糖苷類修飾酶和16S rRNA甲基化酶基因,探討肺炎克雷伯菌對氨基糖苷類抗菌藥物的耐藥機制,為臨床抗菌藥物選用提供實驗室依據(jù)。 方法 1.收集中南大學(xué)湘雅醫(yī)院2009年1月至2009年7月間非重復(fù)肺炎克雷伯菌96株,所有菌株采用法國梅里埃公司的全自動微生物鑒定系統(tǒng)VITEK-2的革蘭陰性菌GN卡鑒定和AST GN-13卡進行藥敏分析。采用瓊脂稀釋法對慶大霉素,阿米卡星,妥布霉素進行MIC檢測。 2.采用PCR法對氨基糖苷類修飾酶基因aac(3)-Ⅰ、aac(6')-Ⅰb、ant(3")-Ⅰ、aph(3')-Ⅵa和16s rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、npmA進行檢測； 3.將擴增的DNA產(chǎn)物純化后進行測序分析,將測序結(jié)果通過BLAST與基因庫已知序列進行對比分析,確定其基因型。 4.將96株肺炎克雷伯菌耐藥基因型與耐藥表型進行比較分析,探討耐藥基因與耐藥表型的關(guān)系。 結(jié)果 1.96株肺炎克雷伯菌對慶大霉素的耐藥率達(dá)到63.5%,對妥布霉素的耐藥率是41.7%,對阿米卡星耐藥率最低,僅為21.9%,對阿米卡星耐藥的菌株均對慶大霉素和妥布霉素耐藥。三種氨基糖苷類藥物的MIC50和MIC90分別≥256μg/ml和512μg/ml。 2.經(jīng)過氨基糖苷類修飾酶基因PCR擴增及測序分析,96株肺炎克雷伯菌中有18.8%的菌株攜帶aac(3)-Ⅰ基因(18／96)、57.3%的菌株攜帶aac(6')-Ⅰb基因(55／96)、3.1%的菌株攜帶ant(3")-Ⅰ基因(3／96)。 3.aac(6')-Ⅰb是氨基糖苷類修飾酶基因中最常見的基因型,在環(huán)丙沙星敏感菌和耐藥菌中aac(6')-Ⅰb攜帶率分別為50%(36／72)和79.1%(19／24),經(jīng)x2檢驗差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=6.26,P0.05)。 4.經(jīng)16s rRNA甲基化酶基因PCR擴增和測序分析,有22株攜帶armA基因,占22.9%(22／96),其中77.3%(17／22)產(chǎn)armA型甲基化酶基因的菌株對慶大霉素、妥布霉素和阿米卡星同時耐藥且都為高度耐藥(MICs≥512μg/ml),未檢測出aph(3')-Ⅵa及rmtA、rmtB rmtC、rmtD、npmA型甲基化酶基因。 結(jié)論 1.首次在湖南地區(qū)發(fā)現(xiàn)aac(3)-Ⅰ、aac(6')-Ⅰb、ant(3")-Ⅰ型氨基糖苷類修飾酶基因及armA型16s rRNA甲基化酶耐藥基因,氨基糖苷類修飾酶基因以aac(6')-Ⅰb為主,armA型16s rRNA甲基化酶耐藥基因攜帶率高。 2.肺炎克雷伯菌對氨基糖苷類抗生素的耐藥非常嚴(yán)重,阿米卡星耐藥率最低,對阿米卡星耐藥的肺炎克雷伯菌均對慶大霉素和妥布霉素耐藥,阿米卡星可作為氨基糖苷類耐藥基因篩查的抗菌藥物。 3.產(chǎn)aac(6')-Ib基因的肺炎克雷伯菌對環(huán)丙沙星耐藥率明顯高于不產(chǎn)aac(6')-Ib基因的肺炎克雷伯菌對環(huán)丙沙星耐藥率；產(chǎn)armA型16s rRNA甲基化酶基因的肺炎克雷伯菌大多對氨基糖苷類抗生素呈高度耐藥。
[Abstract]:Objective to investigate the drug sensitivity of Klebsiella pneumoniae isolated from Xiangya Hospital of Central South University, detect the aminoglycoside modifying enzyme and 16s rRNA methylase gene, and explore the mechanism of resistance of Klebsiella pneumoniae to aminoglycoside antibiotics. To provide laboratory basis for clinical antimicrobial drug selection. Method 1. From January 2009 to July 2009, 96 strains of Klebsiella pneumoniae were collected from Xiangya Hospital of Central South University. All strains were identified by Gram-negative bacilli GN card and AST GN-13 card by the automatic microbiological identification system VITEK-2 of Merriere, France. Agar dilution method was used to detect gentamicin, amikacin and tobramycin by MIC. 2. The aminoglycoside modified enzyme gene aacan3- 鈪，

本文編號：1965804