抗MATSA單克隆抗體的制備與鑒定
本文選題:馬立克氏病腫瘤相關(guān)表面抗原 + 單克隆抗體。 參考:《西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版)》2009年06期
【摘要】:【目的】制備抗雞馬立克氏病腫瘤相關(guān)表面抗原(Marek's disease tumor-associated surface antigen,MATSA)的單克隆抗體(Monoclonal antibodies,McAb),為馬立克氏病的相關(guān)研究及研制以MATSA單克隆抗體為載體的抗腫瘤藥物提供材料!痉椒ā坑眉兓腗ATSA免疫Balb/c小鼠,取其脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞融合,采用間接ELISA法篩選陽性雜交瘤細胞株,并對其染色體進行分析。將陽性雜交瘤細胞株接種Balb/c小鼠,制備McAb腹水,采用硫酸銨鹽析法粗提McAb,并鑒定其所屬亞類。【結(jié)果】獲得了3株能穩(wěn)定分泌MATSA McAb的雜交瘤細胞株B3、H6和D6,其培養(yǎng)上清液抗體效價為26~27,Balb/c小鼠接種細胞制得的腹水效價為210~211。染色體分析結(jié)果顯示,3株雜交瘤細胞染色體數(shù)目均為52±2對。3株雜交瘤細胞株所分泌的McAb均為IgG 2b亞類,可與MSB1細胞反應!窘Y(jié)論】獲得了MATSA的McAb。
[Abstract]:[objective] to prepare Monoclonal antibodies-McAbs, a monoclonal antibody against Marekhos disease tumor-associated surface antigenmata, in order to provide materials for the study of Marek's disease and the development of anti-tumor drugs with MATSA monoclonal antibody as carrier. Methods] Balb/c mice were immunized with purified MATSA. The spleen cells were fused with SP2/0 myeloma cells and the positive hybridoma cell lines were screened by indirect ELISA method and their chromosomes were analyzed. Balb/c mice were inoculated with positive hybridoma cell lines to prepare McAb ascites. McAbs were extracted by ammonium sulfate salting-out method and their subclasses were identified. [results] three hybridoma cell lines B _ 3H _ 6 and D _ 6 with stable secretion of MATSA McAb were obtained. The titer of antibody in the supernatant was 210211. the titer of antibody in the supernatant was 210211by inoculating cells into Balb / c mice. The results of chromosome analysis showed that the McAb secreted by the three hybridoma cell lines were all IgG 2b subclasses and could react with MSB1 cells. [conclusion] McAbs of MATSA were obtained.
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學動物醫(yī)學院;
【基金】:國家自然科學基金項目(30371067) 西北農(nóng)林科技大學青年學術(shù)骨干支持計劃項目(11241)
【分類號】:S858.31
【參考文獻】
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【共引文獻】
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5 李t,
本文編號:1892100
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