發(fā)布時(shí)間：2018-05-13 23:23

  本文選題：樹突狀細(xì)胞 + 多發(fā)性硬化��； 參考：《廣西醫(yī)科大學(xué)》2009年碩士論文

【摘要】： 目的研究多發(fā)性硬化(MS)患者外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞(DC)的體外培養(yǎng)擴(kuò)增和鑒定;從分子水平分析DC在MS病理免疫中的作用;探討IFN-β1a對(duì)患者DC共刺激分子、成熟狀態(tài)的影響。 方法設(shè)立MS組(10例)和健康對(duì)照組(8人),抽取外周血20ml,采用梯度密度離心法提取單核細(xì)胞。在體外經(jīng)rhGM-CSF 100ng/mL和rhlL-4 50ng/mL聯(lián)合培養(yǎng)誘導(dǎo)成為DC,用LPS刺激成熟,經(jīng)IFN-β1a (rebif)處理,于培養(yǎng)的第九天用倒置相差顯微鏡和電鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定;流式細(xì)胞儀檢測HLA-DR、CD80、CD86、CD83表達(dá)水平。 結(jié)果第5天體外培養(yǎng)的DC由貼壁狀態(tài)變?yōu)閼腋∶虪罴?xì)胞,第9天為形態(tài)不規(guī)則的毛刺狀,呈現(xiàn)典型DC形態(tài);流式細(xì)胞儀檢測健康人成熟DC的各項(xiàng)表型CD80、CD86、CD83、HLA-DR表達(dá)百分率分別為(73.2±11)%、(90.4±5.2) %、(81.4±10.3) %和(91.3±5.9) %。MS組DC表達(dá)CD83、CD86明顯低于健康對(duì)照組(p0.05)。兩組間CD80、HLA-DR的表達(dá)無顯著差異性(p0.05)。經(jīng)IFN-β1a處理后MS組DC表達(dá)CD83、CD86均顯著上調(diào)(p 0.05),而DC表型HLA-DR和CD80表達(dá)顯著下調(diào)(p 0.05)。 結(jié)論1、利用rhGM-CSF聯(lián)合rhIL-4誘導(dǎo)人外周血細(xì)胞單核細(xì)胞,能得到大量純度較高的DC,是一種比較簡便經(jīng)濟(jì)的DC培養(yǎng)方法,有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值;2、MS患者單核細(xì)胞來源的DC表面CD86表達(dá)降低,成熟度受損,在MS的發(fā)病中具有重要作用;3、IFN-β1a通過下調(diào)DC的共刺激分子CD80表達(dá),上調(diào)CD86表達(dá),調(diào)整細(xì)胞處理和提呈抗原能力等方面發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用,是其治療MS的重要機(jī)制之一。
[Abstract]:Objective to study the proliferation and identification of dendritic cells (DC) induced by peripheral blood monocytes in patients with multiple sclerosis (MS) in vitro, to analyze the role of DC in MS pathological immunity at the molecular level, and to explore the costimulatory molecules of DC induced by IFN- 尾 1a. The effect of maturity. Methods MS group (n = 10) and healthy control group (n = 8) were used to extract 20 ml peripheral blood and to extract monocytes by gradient density centrifugation. After co-cultured with rhGM-CSF 100ng/mL and rhlL-4 50ng/mL, DCS was induced to mature with LPS, then treated with IFN- 尾 1a rebif, morphological identification was performed by inverted phase contrast microscope and electron microscope on the 9th day of culture, and CD86 CD83 expression level of HLA-DRN CD80 was detected by flow cytometry. Results DC cultured in vitro on the 5th day changed from adherent state to suspending hairy cells, and on the 9th day it was irregular burr shape, which showed typical DC morphology. The percentage of HLA-DR expression in all phenotypes of mature DC was 73.2 鹵110.4 鹵5.2) and 91.4 鹵10.3% and 91.3 鹵5.9%, respectively. The expression of CD83p86 in DC in MS group was significantly lower than that in healthy control group (p0.05). There was no significant difference in the expression of HLA-DR between the two groups (p 0.05). After treatment with IFN- 尾 _ 1a, the expression of CD83-, CD86 in DC of MS group was significantly up-regulated, while the expression of HLA-DR and CD80 in DC was significantly down-regulated. Conclusion 1. RhGM-CSF combined with rhIL-4 can induce monocytes of human peripheral blood cells to obtain a large number of DCs with high purity, which is a simple and economical method for DC culture. The expression of CD86 on DC surface is decreased and the maturity is impaired. It plays an important role in the pathogenesis of MS. IFN- 尾 1a up-regulates the expression of CD86 by down-regulating the expression of CD80, a costimulatory molecule of DC. Regulating the ability of cell processing and presenting antigen plays an important role in the treatment of MS.
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：1885290