蘇丹紅I與檸檬黃單鏈融合抗體的制備及快速免疫學(xué)檢測方法研究
發(fā)布時(shí)間:2018-05-07 22:24
本文選題:蘇丹紅Ⅰ + 檸檬黃; 參考:《吉林大學(xué)》2008年博士論文
【摘要】: 蘇丹紅Ⅰ(SudanⅠ)常用于工業(yè)染料,現(xiàn)被一些食品企業(yè)作為食品添加劑使用。由于蘇丹紅Ⅰ食用后在相應(yīng)酶的作用下,在體內(nèi)產(chǎn)生致癌物質(zhì),對人體具有十分嚴(yán)重的危害,因此,我國及歐盟嚴(yán)禁在食品中添加蘇丹紅Ⅰ。檸檬黃色素(Tartrazine)是目前我國批準(zhǔn)使用的六種食用合成色素之一。人工合成色素是指用人工化學(xué)合成方法所制備的有機(jī)色素,主要以煤焦油中分離出來的苯胺染料為原料制成,所以食用合成色素具有一定毒性,我國對在食品中添加合成色素有嚴(yán)格限制。凡是肉類及其加工品,魚類及其加工品等都不能使用人工合成色素,即使在適用的品種和范圍內(nèi),使用劑量也有嚴(yán)格規(guī)定,決不允許過量使用。 在不法利益的驅(qū)動下,我國一些食品企業(yè)在食品中添加蘇丹紅Ⅰ和超量添加檸檬黃的現(xiàn)象較為普遍,自2005年以來,已經(jīng)發(fā)生了多起在食品中添加蘇丹紅Ⅰ、檸檬黃事件,其危害和影響都非常嚴(yán)重,日益引起人們的關(guān)注。蘇丹紅等的危害主要是致癌性,危害效應(yīng)時(shí)間較長,短時(shí)間內(nèi)看不到。目前,對蘇丹紅Ⅰ常用的檢測方法是高效液相色譜法,檸檬黃常用的檢測的方法是薄層分析及分光光度計(jì)法,但這些方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力,檢測主要依靠儀器,很難普及。ELISA方法簡便易行,可以彌補(bǔ)其不足,同時(shí),以其單克隆抗體為檢測試劑,為蘇丹紅Ⅰ和檸檬黃的檢測提供了便利條件。國內(nèi)外關(guān)于蘇丹紅Ⅰ、檸檬黃單克隆抗體的相關(guān)報(bào)道較少。我們依據(jù)蘇丹紅Ⅰ的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),合成蘇丹紅Ⅰ結(jié)構(gòu)類似物,與載體蛋白偶聯(lián),利用雜交瘤技術(shù)獲得了蘇丹紅Ⅰ單克隆抗體,依據(jù)檸檬黃分子結(jié)構(gòu)特點(diǎn),利用雜交瘤技術(shù)獲得了檸檬黃單克隆抗體。利用免疫技術(shù)分別組裝了兩種色素的ELISA快速檢測試劑盒。利用膠體金技術(shù),制備了蘇丹紅Ⅰ的快速檢測試紙條。利用生物技術(shù)分別獲得了兩種單克隆抗體的單鏈抗體,利用基因Linker技術(shù),將兩種單鏈抗體基因連接制備融合基因并表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物能夠同時(shí)識別蘇丹紅Ⅰ、檸檬黃色素,為下一步蘇丹紅Ⅰ、檸檬黃快速廣譜檢測研究打下了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Sudan 鈪,
本文編號:1858732
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