發(fā)布時間：2018-05-06 06:25

  本文選題：CK-19 + Hoechst　； 參考：《福建醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： DNA電化學(xué)生物傳感器是近幾年國際熱點研究的一類新型生物傳感器,它具有儀器簡單、分析速度快、靈敏度高等優(yōu)點而被認為是目前人們寄于最大期望的一類DNA分析方法。 CK-19是一種低分子量的角蛋白,是上皮細胞骨架的一部分。CK-19作為上皮組織的特異性標記物,主要在上皮組織及上皮來源的腫瘤中表達,并在乳腺癌中有較高表達,而在正常外周血、骨髓組織、淋巴結(jié)中則不表達,因此可以作為乳腺癌的標志物進行乳腺癌的早期檢測。 本文利用自組裝的方法,首次將CK-19基因片段作為特異性探針固定在金電極表面,采用交流阻抗法并結(jié)合電化學(xué)活性指示劑MB對探針固定的條件進行摸索。實驗結(jié)果表明,該基因片段在電極表面的最大固載量為3.0 umol/L,最佳固定溫度、固定時間分別為4℃及20h。 此外,本文還構(gòu)建了以Hoechst 33258作為雜交指示劑的DNA電化學(xué)生物傳感器。實驗結(jié)果表明,Hoechst 33258是一種特異性較強的指示劑,能夠有效地區(qū)分CK-19基因的互補與非互補序列。CK-19探針電極在pH 7.0的磷酸鹽緩沖液(PBS)中,55℃雜交30min,檢測效果良好�；パaDNA在5.0×10-7~ 5.0×10-6 M濃度范圍內(nèi),與檢測信號成線性關(guān)系,檢測限達到0.018M,為實際樣品的檢測研究提供了良好的基礎(chǔ)。
[Abstract]:DNA electrochemical biosensor is a new type of biosensor which has been studied in recent years. It has the advantages of simple instrument, fast analysis speed and high sensitivity, so it is considered to be the most expected type of DNA analysis method. CK-19 is a low molecular weight keratin, which is a part of epithelial cytoskeleton. CK-19 is a specific marker of epithelial tissue. But it is not expressed in normal peripheral blood, bone marrow and lymph nodes, so it can be used as a marker for early detection of breast cancer. In this paper, the CK-19 gene fragment was first immobilized on the surface of the gold electrode by self-assembly method. The condition of the probe fixation was explored by using AC impedance method and the electrochemical activity indicator MB. The results showed that the maximum immobilization of the fragment on the electrode surface was 3.0 umoll / L, and the optimal fixation temperature and time were 4 鈩，

本文編號：1851177