GLP-1對(duì)骨骼肌細(xì)胞糖原合成酶表達(dá)的影響及其與MAPK信號(hào)途徑的研究
發(fā)布時(shí)間:2018-05-05 01:13
本文選題:胰高血糖素樣肽-1 + 糖原合成酶。 參考:《天津醫(yī)科大學(xué)》2009年碩士論文
【摘要】: 目的: 1.以體外培養(yǎng)L6骨骼肌細(xì)胞為對(duì)象,給予一定濃度胰高血糖素樣肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)干預(yù),檢測(cè)GLP-1對(duì)糖原合成酶表達(dá)的影響。 2.利用UO126(MAPK抑制劑)阻斷MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,檢測(cè)GLP-1對(duì)L6骨骼肌細(xì)胞糖原合成酶表達(dá)的影響,從而探討GLP-1在骨骼肌細(xì)胞中介導(dǎo)糖原合成的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。 3.為GLP-1的擬胰島素作用及其機(jī)制提供理論依據(jù)。 方法: 1.復(fù)蘇L6骨骼肌細(xì)胞,通過(guò)倒置顯微鏡觀察其生長(zhǎng)及增值狀況。 2.L6骨骼肌細(xì)胞均等分為6組:A:對(duì)照組;B:GLP-1(10~(-9)mol/L)組;C:GLP-1(10~(-9)mol/L)+UO126(10μmol/L)組;D:胰島素(10~(-9)mol/L)組;E:胰島素(10~(-9)mol/L)+UO126(10μmol/L)組;F:GLP-1(10~(-9)mol/L)+胰島素(10~(-9)mol/L)組。A、B、C、D、E和F 6組分別培養(yǎng)3分鐘、30分鐘,A、B、D和F組再培養(yǎng)24小時(shí)。 3.用Western Blot和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)骨骼肌細(xì)胞中的糖原合成酶的表達(dá)。 結(jié)果: 1.GLP-1(10~(-9)mol/L)組在3分鐘、30分鐘及24小時(shí)干預(yù)的糖原合成酶的表達(dá)均顯著高于對(duì)照組(分別為1997.33±115.47vs 1444.00±94.64,P0.05;1465.33±86.00 vs1267.33±66.46,P0.05;1426.67±24.54 vs1326.33±18.84,P0.05,n=3)。 2.GLP-1(10~(-9)mol/L)+胰島素(10~(-9)mol/L)組在3分鐘、30分鐘及24小時(shí)干預(yù)的糖原合成酶的表達(dá)均顯著高于對(duì)照組(分別為2209.33±186.18vs 1444±94.64,P0.05;1565.00±15.39 vs1267.33±66.46,P0.05;1428.00±36.51 vs1326.33±18.84,P0.05,n=3)。 3.3分鐘和30分鐘時(shí),GLP-1(10~(-9)mol/L)+UO126(10μmol/L)組的糖原合成酶表達(dá)均顯著低于GLP-1(10~(-9)mol/L)組(分別為1752.67±198.65 vs1997.33±115.47,P0.05;1395.33±78.21 vs1465.33±86.00,P0.05,n=3),而在30分鐘時(shí)的糖原合成酶表達(dá)顯著高于對(duì)照組(1395.33±78.21 vs1267.33±66.46,P0.05,n=3)。 結(jié)論: 本研究通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)GLP-1可直接作用于骨骼肌細(xì)胞,上調(diào)糖原合成酶的表達(dá),并且這種作用可以維持較長(zhǎng)一段時(shí)間。MAPK抑制劑能夠阻斷GLP-1在骨骼肌細(xì)胞中介導(dǎo)的糖原合成酶的上調(diào)表達(dá),表明MAPK通路可能對(duì)GLP-1在骨骼肌細(xì)胞中介導(dǎo)的糖原合成酶的上調(diào)表達(dá)發(fā)揮著重要作用。
[Abstract]:Objective: 1. L6 skeletal muscle cells were cultured in vitro and treated with glucagon-like peptide-1 GLP-1 (glucagon-like peptide-1). The effect of GLP-1 on the expression of glycogen synthase was detected. 2. The effect of GLP-1 on the expression of glycogen synthase in L6 skeletal muscle cells was detected by blocking MAPK signal transduction pathway by UO126(MAPK inhibitor, and the signal transduction pathway mediated by GLP-1 in skeletal muscle cells was explored. 3. To provide theoretical basis for the insulin-like action of GLP-1 and its mechanism. Methods: 1. After resuscitation of L 6 skeletal muscle cells, the growth and proliferation of L 6 skeletal muscle cells were observed by inverted microscope. 2.L6楠ㄩ鑲岀粏鑳?yōu)鍧嚱{夊垎涓,
本文編號(hào):1845517
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