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慢性間歇性低壓低氧對(duì)大鼠免疫功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-05-04 19:39

  本文選題:間歇性低壓低氧 + 適應(yīng); 參考:《河北醫(yī)科大學(xué)》2008年碩士論文


【摘要】: 目的:低氧對(duì)機(jī)體組織具有損傷作用。已有研究表明,低氧通過(guò)增強(qiáng)中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的黏附,激活炎癥細(xì)胞產(chǎn)生促炎因子,導(dǎo)致包括肺在內(nèi)的多器官炎癥。高原低氧可作為環(huán)境應(yīng)激原,通過(guò)自主神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的活動(dòng)改變而影響機(jī)體免疫系統(tǒng)功能。慢性間歇性低壓低氧(Chronic intermittent hypobaric hypoxia, CIHH)可提高機(jī)體對(duì)缺血/再灌注或缺氧/復(fù)氧損傷的耐受性,對(duì)心臟、神經(jīng)、肝臟等器官具有明顯的保護(hù)作用,但CIHH對(duì)機(jī)體免疫功能的影響尚無(wú)定論。本研究應(yīng)用流式細(xì)胞、免疫組化和電鏡等技術(shù)探討CIHH對(duì)細(xì)胞免疫和體液免疫的影響。 方法:雄性成年Sprague-Dawley大鼠48只(初始體重200-260g,最后體重290-330g)隨機(jī)分為4組:CIHH14天組(CIHH14)、CIHH28天組(CIHH28)、CIHH42天組(CIHH42)、對(duì)照組(CON)。CIHH組動(dòng)物置于低壓氧艙內(nèi),分別接受14,28,42天的相當(dāng)于3000米海拔的低壓氧處理,每天5個(gè)小時(shí)。對(duì)照組動(dòng)物,除不接受慢性間歇性低氧處理外,其它條件與低氧動(dòng)物相同。每周定時(shí)觀察動(dòng)物的一般活動(dòng),測(cè)定體重。實(shí)驗(yàn)中,各組動(dòng)物分別給以常氧(正?諝)和急性低氧(10%O2+90%N2,1小時(shí))處理。動(dòng)物麻醉,頸部正中切口,頸總動(dòng)脈插管采集動(dòng)脈血液。將1ml血液加入EDTA-K2抗凝真空管中,與抗凝劑充分混勻,抗凝劑與血液比值為1:9。再取3ml全血離心5分鐘(3000g/min),得到血清。利用流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測(cè)動(dòng)物血液CD3、CD4、CD8淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞數(shù)量,采用ELISA方法檢測(cè)血清中IgG、糖皮質(zhì)激素(COR)、腎上腺素(EPI)和C-反應(yīng)蛋白(CRP)含量。按照試劑盒標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作終止反應(yīng)后15分鐘,在酶標(biāo)儀上450nm處讀取光密度值,根據(jù)雙對(duì)數(shù)曲線得出濃度值。在動(dòng)物采血后,取胸腺、脾臟組織,測(cè)量胸腺、脾臟重量,計(jì)算胸腺、脾臟指數(shù)并觀察其超微結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果:1.CIHH大鼠于間歇性低壓低氧暴露第一周內(nèi)表現(xiàn)為活動(dòng)減少,體重增長(zhǎng)小于對(duì)照組大鼠,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。從第二周開(kāi)始,動(dòng)物活動(dòng)增多,體重增長(zhǎng)與對(duì)照組動(dòng)物相平行。三周后CIHH大鼠的一般狀況與對(duì)照組動(dòng)物無(wú)差別(圖1)。2.與大鼠比較,CIHH14大鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)明顯增加(P0.05);CIHH28和CIHH42大鼠胸腺指數(shù)明顯增加(P0.05);CIHH28和CIHH42大鼠脾臟重量和指數(shù)無(wú)明顯差異(P0.05)。3.與對(duì)照動(dòng)物相比較,電鏡結(jié)果顯示,CIHH14大鼠胸腺和脾臟淋巴細(xì)胞線粒體輕度腫脹,線粒體嵴少部分缺損,而CIHH28大鼠胸腺和脾臟淋巴細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)無(wú)明顯變化。急性低氧導(dǎo)致對(duì)照大鼠胸腺和脾臟淋巴細(xì)胞嚴(yán)重受損,包括線粒體腫脹,大部分嵴與嵴融合或消失。CIHH14大鼠胸腺和脾臟淋巴細(xì)胞較急性低氧前明顯受損,甚至較對(duì)照大鼠稍重,而CIHH28大鼠胸腺和脾臟淋巴細(xì)胞與急性低氧比較無(wú)明顯異常,線粒體變化明顯較對(duì)照和CIHH14大鼠輕。4.與CON、CIHH28和CIHH42比較,CIHH14大鼠CD8淋巴細(xì)胞明顯降低,CD4/CD8比值明顯升高,NK細(xì)胞明顯下降(P0.05);急性低氧導(dǎo)致CON大鼠CD4淋巴細(xì)胞升高,CD8淋巴細(xì)胞降低,CD4/CD8比值明顯升高(P0.05),NK細(xì)胞增加,而對(duì)CIHH28和CIHH42大鼠CD4、CD8淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞無(wú)明顯影響(P0.05)。5.慢性間歇性低壓低氧與急性低氧對(duì)大鼠血液IgG無(wú)明顯影響(P0.05)。6. CIHH14大鼠COR較CON、CIHH28和CIHH42大鼠明顯增高(P0.05);急性低氧使CON大鼠EPI、COR、CRP明顯增高(P0.05),而CIHH各組大鼠急性低氧前后EPI、COR、CRP無(wú)明顯變化(P0.05)。 結(jié)論:慢性間歇性減壓低氧對(duì)機(jī)體免疫功能具有保護(hù)作用,其作用與神經(jīng)-內(nèi)分泌調(diào)節(jié)有關(guān)。
[Abstract]:Objective : To study the effects of hypoxia on cellular immunity and humoral immunity by enhancing the adhesion of neutrophils , macrophages and vascular endothelial cells , activating inflammatory cells to produce pro - inflammatory factors , which may affect the immune system function of the organism . Chronic intermittent hypobaric hypoxia ( CIHH ) can improve the tolerance of the organism to ischemia / reperfusion or hypoxia / reperfusion injury , but the effect of CIHH on the immune function of the organism is not fixed .


Methods : Forty - eight male adult Sprague - Dawley rats ( 200 - 260 g , 290 - 330 g ) were randomly divided into 4 groups : CIH 14 , CIH 28 , CIH 42 and CON . All the animals were treated with normal oxygen ( normal air ) and acute hypoxia ( 10 % O2 + 90 % N2 , 1 hour ) . The animals were anesthetized with normal oxygen ( normal air ) and acute hypoxia ( 10 % O2 + 90 % N2 , 1 hour ) .


Results : Compared with control group , the percentage of thymus and spleen lymphocytes increased significantly ( P0.05 ) . Compared with control group , there was no significant difference between the thymus and spleen lymphocyte of CIH 14 rats ( P0.05 ) . The levels of EPI , COR and CRP in the rats with acute hypoxia increased significantly ( P0.05 ) , but there was no significant change in EPI , COR and CRP before and after acute hypoxia in the CIHH group ( P0.05 ) .


Conclusion : Chronic intermittent decompression hypoxia has protective effect on the immune function of organism , and its function is related to neuroendocrine regulation .

【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2008
【分類號(hào)】:R392

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1844390

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