本文選題：pICln + ELISA　； 參考：《吉林大學》2008年碩士論文

【摘要】： pICln是1992年Paulmichl從豬腎臟上皮細胞株中(MDCK:madin-darby canine kidney cell line)發(fā)現并克隆的一種新蛋白分子。細胞體積調節(jié)作用是細胞的重要功能之一,持續(xù)的細胞腫脹或收縮會使細胞功能失調導致細胞死亡,pICln是一種調節(jié)腫脹細胞體積的“候選”蛋白,其具體的結構及確切的功能尚未明了。為探討其功能作用,對此進行了以下實驗: 一.抗pICln肽段抗體的制備及鑒定 以MDCK細胞pICln蛋白碳端19肽氨基酸殘基順序(NH2-EVDTTPTVAGQFEDADVDH-COOH)所合成的肽段為抗原,以PVP為其載體來處理抗原,通過免疫實驗動物制備了抗pICln的肽段抗體,并對其純化和鑒定,為pICln的實驗研究提供了必要的工具。 二.多種組織細胞pICln的檢測 在蛋白水平上,用抗pICln的肽段抗體經Western Blot隨機檢測了多種細胞和組織,結果表明它們均有pICln的表達,且呈約40kDa的蛋白帶。pICln在組織和細胞中的廣泛表達,提示它在動物及人體胞內可能具有重要的功能。 三. LLC-PK1細胞內pICln的定位分布和滲透性研究 進行了LLC-PK1細胞pICln在等滲和低滲條件下分布的檢測,經免疫組織化學染色和Western Blot檢測顯示,pICln在這些細胞內主要定位于細胞可溶性胞質內。在低滲溶液中觀測到在LLC-PK1細胞內的pICln分布發(fā)生了明顯的變化,這表明了pICln對低滲的敏感性。
[Abstract]:pICln is a new protein molecule found and cloned from the porcine kidney epithelial cell line ( MDCK : madin - darby canine kidney cell line ) in 1992 . Cell volume regulation is one of the important functions of the cell , and the persistent cell swelling or contraction can lead to cell death , and pICln is a " candidate " protein that regulates the volume of swelling cells .


Preparation and identification of anti - pICln peptide fragment antibody


The peptide fragment synthesized by the amino acid residue sequence ( NH2 - EVDTTPTVAGQFEDADVDH - COOH ) of MDCK cell pICln ( NH _ 2 - EVDTTPTVAGQFEDADVDH - COOH ) was used as the antigen . The anti - pICln - resistant peptide fragment antibody was prepared by using PVP as its carrier , and purified and identified . The necessary tools were provided for the experimental study of pICln .


II . Detection of multiple tissue cells pICln


At the level of protein , a variety of cells and tissues were randomly detected with anti - pICln - resistant peptide fragment antibody by Western Blot . The results showed that they both had the expression of pICln and a protein band of about 40 kDa . The wide expression of pICln in tissues and cells suggested that it might have important functions in animals and human cells .


III . Localization and permeability of pICln in LLC - PK1 cells


The distribution of pICln in LLC - PK1 cells under isosmotic and hypotonic conditions was carried out . By immunohistochemistry and Western Blot analysis , pICln was mainly localized in the soluble cytoplasm of cells . The distribution of pICln in LLC - PK1 cells was significantly changed in hypotonic solution , indicating that pICln was sensitive to hypotonic .

【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R341

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本文編號：1812842