本文選題：缺血后處理 + 線粒體ATP敏感性鉀通道��； 參考：《河北醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： 目的:觀察大鼠腎缺血后處理腎小管上皮細(xì)胞線粒體ATP敏感性鉀通道的變化及其對(duì)線粒體通透性轉(zhuǎn)運(yùn)孔的影響,探討細(xì)胞凋亡線粒體調(diào)節(jié)途徑在大鼠腎缺血后處理腎保護(hù)中的作用。 方法:35只雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組(n=7):假手術(shù)組(S組),缺血再灌注組(I/R組),缺血后處理組(IPo組),缺血再灌注加5-HD組(I/R+5-HD組),缺血后處理加5-HD組(IPo+5-HD組)。 10%水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉,采用夾閉雙側(cè)腎蒂45min、再灌注6h制備腎臟缺血再灌注損傷模型。用無(wú)損傷動(dòng)脈夾夾閉雙側(cè)腎蒂,腎臟顏色變?yōu)榘导t色即可確認(rèn)腎臟血流阻斷,造成雙側(cè)腎缺血45min,松開(kāi)動(dòng)脈夾,腎臟由暗紅色恢復(fù)鮮紅色即可確認(rèn)血流恢復(fù),夾閉和放開(kāi)腎蒂時(shí)腹腔內(nèi)各注射林格液20ml/kg。S組僅行開(kāi)腹,游離出雙側(cè)腎臟,分離雙側(cè)腎蒂不夾閉,傷口用生理鹽水紗布覆蓋,暴露45min不作腎缺血處理,與IPo+5-HD組相同時(shí)刻腹腔注入等體積的生理鹽水;I/R組夾閉雙側(cè)腎蒂,缺血45min后放開(kāi)動(dòng)脈夾;IPo組夾閉雙側(cè)腎蒂缺血45min后,再灌注10 s,缺血10 s,反復(fù)3次,再恢復(fù)血液灌注6h;I/R+5-HD組缺血前30min腹腔注入5-HD(10mg/kg),余操作同I/R組;IPo+5-HD組缺血前30min腹腔注入5-HD(10mg/kg),余操作同IPo組。再灌注6h時(shí)處死大鼠。 酶法測(cè)定血清肌酐(Cr)含量,苦味酸不除蛋白法測(cè)定血清尿素氮(BUN)含量;用激光共聚焦顯微鏡與相應(yīng)試劑分別檢測(cè)線粒體熒光強(qiáng)度、線粒體膜電位、細(xì)胞中活性氧活性物質(zhì)(ROS)水平、細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度,拍照并用ImageJ軟件處理圖像;原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記(TUNEL)法檢測(cè)腎小管上皮凋亡細(xì)胞,計(jì)算細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)。 結(jié)果:Cr和BUN:與S組比較,I/R組、IPo組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組含量均升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與I/R組比較,IPo組含量降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與IPo組比較,I/R+5-HD組和IPo+5-HD組含量升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);I/R組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組含量差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.05)。 細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光強(qiáng)度、ROS熒光強(qiáng)度及AI:與S組比較,I/R組、IPo組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組均增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與I/R組比較,IPo組降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與IPo組比較,I/R+5-HD組和IPo+5-HD組增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);I/R組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.05)。 線粒體熒光強(qiáng)度和線粒體膜電位熒光強(qiáng)度:與S組比較,I/R組、IPo組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組均降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與I/R組比較,IPo組升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與IPo組比較,I/R+5-HD組和IPo+5-HD組均降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);I/R組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組熒光強(qiáng)度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.05)。 結(jié)論:缺血后處理可激活線粒體ATP敏感性鉀通道使其開(kāi)放,維持線粒體膜電位、緩解細(xì)胞鈣超載、減少細(xì)胞內(nèi)氧活性物質(zhì)產(chǎn)生,抑制線粒體通透性轉(zhuǎn)運(yùn)孔開(kāi)放程度,降低了腎小管上皮細(xì)胞凋亡,改善了腎臟功能,細(xì)胞凋亡線粒體調(diào)節(jié)途徑腎缺血后處理在減輕大鼠腎缺血再灌注損傷中起到至關(guān)重要的作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R363

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 陶凌,李源,高峰,王躍民,龔衛(wèi)琴;缺血后處理對(duì)急性心肌缺血再灌注兔心臟的保護(hù)作用[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年06期

2 劉晶晶;趙硯麗;程會(huì)平;劉曉明;張東;;缺血后處理對(duì)腎缺血再灌注損傷大鼠腎組織細(xì)胞凋亡及bcl-2和bax基因表達(dá)的影響[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年21期

3 田首元;劉保江;;線粒體介導(dǎo)細(xì)胞凋亡和心肌保護(hù)新途徑[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè);2005年06期

4 李旭光;康少平;田立強(qiáng);董嘉良;張敏;張艷君;康英姿;于公元;;缺血后處理與大鼠心肌能量代謝的關(guān)系[J];臨床心血管病雜志;2008年12期

5 黃行許,翟大勇,李玉梅,黃有國(guó);利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)線粒體PTP開(kāi)放[J];生物物理學(xué)報(bào);2000年02期

6 史明,張文嵐,薄立華;腎缺血再灌注細(xì)胞內(nèi)鈣水平與氧化應(yīng)激損傷研究[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2003年05期

7 高峰,YanWL,GengYJ,朱妙章,臧益民,馬新亮,蔡振杰;“缺氧后處理”對(duì)大鼠缺氧-復(fù)氧心室肌細(xì)胞的保護(hù)作用[J];心功能雜志;1999年04期

8 沈潔;孫震;劉海軍;陳衛(wèi)民;;異氟醚預(yù)處理對(duì)沙士鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J];中華麻醉學(xué)雜志;2006年03期

，

本文編號(hào)：1766990