本文選題：缺血后處理 + 線粒體ATP敏感性鉀通道　； 參考：《河北醫(yī)科大學》2010年碩士論文

【摘要】： 目的:觀察大鼠腎缺血后處理腎小管上皮細胞線粒體ATP敏感性鉀通道的變化及其對線粒體通透性轉(zhuǎn)運孔的影響,探討細胞凋亡線粒體調(diào)節(jié)途徑在大鼠腎缺血后處理腎保護中的作用。 方法:35只雄性SD大鼠隨機分為5組(n=7):假手術(shù)組(S組),缺血再灌注組(I/R組),缺血后處理組(IPo組),缺血再灌注加5-HD組(I/R+5-HD組),缺血后處理加5-HD組(IPo+5-HD組)。 10%水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉,采用夾閉雙側(cè)腎蒂45min、再灌注6h制備腎臟缺血再灌注損傷模型。用無損傷動脈夾夾閉雙側(cè)腎蒂,腎臟顏色變?yōu)榘导t色即可確認腎臟血流阻斷,造成雙側(cè)腎缺血45min,松開動脈夾,腎臟由暗紅色恢復鮮紅色即可確認血流恢復,夾閉和放開腎蒂時腹腔內(nèi)各注射林格液20ml/kg。S組僅行開腹,游離出雙側(cè)腎臟,分離雙側(cè)腎蒂不夾閉,傷口用生理鹽水紗布覆蓋,暴露45min不作腎缺血處理,與IPo+5-HD組相同時刻腹腔注入等體積的生理鹽水;I/R組夾閉雙側(cè)腎蒂,缺血45min后放開動脈夾;IPo組夾閉雙側(cè)腎蒂缺血45min后,再灌注10 s,缺血10 s,反復3次,再恢復血液灌注6h;I/R+5-HD組缺血前30min腹腔注入5-HD(10mg/kg),余操作同I/R組;IPo+5-HD組缺血前30min腹腔注入5-HD(10mg/kg),余操作同IPo組。再灌注6h時處死大鼠。 酶法測定血清肌酐(Cr)含量,苦味酸不除蛋白法測定血清尿素氮(BUN)含量;用激光共聚焦顯微鏡與相應試劑分別檢測線粒體熒光強度、線粒體膜電位、細胞中活性氧活性物質(zhì)(ROS)水平、細胞內(nèi)鈣離子濃度,拍照并用ImageJ軟件處理圖像;原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶標記(TUNEL)法檢測腎小管上皮凋亡細胞,計算細胞凋亡指數(shù)(AI)。 結(jié)果:Cr和BUN:與S組比較,I/R組、IPo組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組含量均升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);與I/R組比較,IPo組含量降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);與IPo組比較,I/R+5-HD組和IPo+5-HD組含量升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);I/R組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組含量差異均無統(tǒng)計學意義(P 0.05)。 細胞內(nèi)鈣離子熒光強度、ROS熒光強度及AI:與S組比較,I/R組、IPo組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組均增加,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);與I/R組比較,IPo組降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);與IPo組比較,I/R+5-HD組和IPo+5-HD組增加,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);I/R組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組差異無統(tǒng)計學意義(P 0.05)。 線粒體熒光強度和線粒體膜電位熒光強度:與S組比較,I/R組、IPo組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組均降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);與I/R組比較,IPo組升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);與IPo組比較,I/R+5-HD組和IPo+5-HD組均降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);I/R組、I/R+5-HD組和IPo+5-HD組熒光強度差異無統(tǒng)計學意義(P 0.05)。 結(jié)論:缺血后處理可激活線粒體ATP敏感性鉀通道使其開放,維持線粒體膜電位、緩解細胞鈣超載、減少細胞內(nèi)氧活性物質(zhì)產(chǎn)生,抑制線粒體通透性轉(zhuǎn)運孔開放程度,降低了腎小管上皮細胞凋亡,改善了腎臟功能,細胞凋亡線粒體調(diào)節(jié)途徑腎缺血后處理在減輕大鼠腎缺血再灌注損傷中起到至關(guān)重要的作用。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R363

【參考文獻】

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本文編號：1766990