本文選題：肺炎克雷伯菌 + 噬菌體��； 參考：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2008年碩士論文

【摘要】： 肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumonia,KPN)為臨床常見(jiàn)革蘭氏陰性桿菌,屬于腸桿菌科( Enterobacteriaceae)克雷伯菌屬( klebsiella)。該菌廣泛分布于自然界,近年來(lái)成為僅次于大腸桿菌的最重要的條件致病菌,嚴(yán)重地危害著人類的健康和生命。噬菌體(Bacteriophage)是細(xì)菌的病毒,它與宿主菌關(guān)系密切。一方面,溶原性噬菌體通過(guò)自身攜帶的外源性遺傳物質(zhì)改變宿主菌的生物學(xué)性狀,同時(shí),在與宿主菌基因組不斷的重組、整合、轉(zhuǎn)座和切離過(guò)程中彼此交換遺傳物質(zhì),影響宿主菌及自身基因的多樣性。另一方面,裂解性噬菌體能特異性裂解宿主菌,如果誘導(dǎo)前噬菌體進(jìn)入裂解性生長(zhǎng)周期也可導(dǎo)致細(xì)菌裂解,噬菌體有望發(fā)展成為抗細(xì)菌感染的生物制劑。不斷分離新的噬菌體和描述其基本的生物學(xué)特性是噬菌體研究人員的首要任務(wù)。 本研究以臨床分離的肺炎克雷伯菌肺炎亞種為宿主菌,從處理前污水中成功分離出肺炎克雷伯菌的噬菌體,并對(duì)其基本的生物學(xué)特性進(jìn)行了描述,最后對(duì)其體外殺菌能力進(jìn)行了評(píng)估。本研究主要的研究?jī)?nèi)容及實(shí)驗(yàn)結(jié)果包括以下幾個(gè)方面: 1.以肺炎克雷伯菌臨床分離株為宿主菌,從醫(yī)院污水處理站處理前污水中成分離出肺炎克雷伯菌噬菌體一株,并命名為KPNP1。噬菌體KPNP1形成的噬斑較大,圓形,直徑約4～7 mm,透明,表現(xiàn)為裂解性噬菌體的噬斑特征,滴度測(cè)定其滴度為6.1×1011 PFU/ml。電鏡下可見(jiàn)噬菌體KPNP1有一個(gè)多面體立體對(duì)稱的頭部,頭部直徑約為180 nm,無(wú)囊膜,有一長(zhǎng)尾,尾長(zhǎng)約210 nm,尾寬約30 nm,屬于長(zhǎng)尾噬菌體科。 2.感染復(fù)數(shù)(multiplicity of infection, MOI)是指噬菌體感染宿主菌時(shí)噬菌體數(shù)量與宿主菌數(shù)量的比值,也稱感染倍數(shù)。最佳感染復(fù)數(shù)是噬菌體與宿主菌作用所能產(chǎn)生最佳效果時(shí)噬菌體數(shù)量與宿主菌數(shù)量的比值,本實(shí)驗(yàn)KPNP1感染其宿主的最佳感染復(fù)數(shù)為4。 3.一步生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)表明:KPNP1在37℃溫育條件下,15min內(nèi)吸附宿主菌的百分率為72%。感染宿主菌的潛伏期約為35 min ,裂解期約為40 min,裂解量為94 PFU/cell。 4.絲裂酶素C誘導(dǎo)法和紫外線誘導(dǎo)法處理可疑溶原性細(xì)菌后均不能形成噬斑,說(shuō)明KPNP1為非溶原性噬菌體,而是裂解性噬菌體。 5. KPNP1的宿主譜比較窄,僅對(duì)少量(1/30)肺炎克雷伯菌肺炎亞種敏感,對(duì)部分大腸埃希菌也敏感。 6.體外殺菌試驗(yàn)表明KPNP1對(duì)KPN懸液的殺菌作用明顯,噬菌體濃度在1.8×1010 PFU/ml時(shí),反應(yīng)達(dá)100分鐘時(shí)的殺滅有效率為81.1%,噬菌體濃度在1.8×109PFU/ml時(shí),反應(yīng)達(dá)100分鐘時(shí)的殺滅有效率為82.3%,而低濃度噬菌體液隨著時(shí)間的延長(zhǎng)也能達(dá)到相同的殺菌效果。 7.以泌尿管外科常用硅橡膠導(dǎo)尿管為材料,成功構(gòu)建出耐藥KPN的生物膜,并對(duì)形成的生物膜用KPNP1處理2小時(shí),結(jié)果表明:KPNP1對(duì)導(dǎo)尿管KPN生物膜的殺菌作用較明顯,殺菌有效率為71.8%,電鏡觀察也顯示KPNP1作用前導(dǎo)尿管上KPN細(xì)菌生長(zhǎng)旺盛,細(xì)菌聚團(tuán)生長(zhǎng)現(xiàn)象明顯;KPNP1作用2小時(shí)后可見(jiàn)細(xì)菌顯著減少,細(xì)菌生長(zhǎng)稀少,少見(jiàn)聚團(tuán)生長(zhǎng)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R378;R446.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1766945