發(fā)布時間：2018-04-15 19:16

  本文選題：人FcγRI + 線性表位��； 參考：《河南農(nóng)業(yè)大學》2010年碩士論文

【摘要】： Fc受體(FcR)是特異親和免疫球蛋白(Ig) Fc片段的細胞表面分子,在免疫輔助細胞和效應(yīng)細胞均有表達,具有許多重要的生理功能,是細胞免疫與體液免疫的聯(lián)系紐帶,在機體免疫調(diào)節(jié)中起主要作用�？贵w介導的炎性反應(yīng)可通過抑制型和激活型FcR進行調(diào)節(jié),因此FcR是治療自身免疫性疾病和過敏理想的藥物靶標。本研究利用化學合成多肽初步鑒定了人IgGFc受體(FcyR)的線性配體結(jié)合表位,是首次開展FcR線性配體結(jié)合表位的探索研究,對深入了解FcyR-IgG相互作用的分子基礎(chǔ)有重要意義,為FcR靶標藥物的分子設(shè)計提供新了的思路。 人FcyRI (CD64)為高親和力受體,能高親和力結(jié)合人IgG單體,胞外區(qū)含有3個Ig樣結(jié)構(gòu)域。本研究中將huFcyRI編碼區(qū)cDNA亞克隆到表達載體pcDNA3中,受體分子在COS-7細胞表面表達,然后通過玫瑰花環(huán)試驗測定huFcγRI的配體特異性,IgG-RBC在huFcγRI轉(zhuǎn)染細胞上形成了明顯的玫瑰花環(huán)。將huFcγRI胞外區(qū)cDNA亞克隆到原核表達載體pGEX-6P-1,在大腸桿菌BL21中表達了huFcγRI胞外區(qū),但未能成功從包涵體中復性huFcγRI重組蛋白。為了鑒定huFcγRI的線性配體結(jié)合表位,在EC2結(jié)構(gòu)域設(shè)計合成huFcγRI多肽,Dot-blot結(jié)果顯示huFcγRI的122-133位多肽CLYYRNGKAFKFF和144-153位多肽CTNISHNGTYH特異結(jié)合人IgG,位于受體EC2結(jié)構(gòu)域C-C'環(huán)和E-F環(huán)。
[Abstract]:FC receptor FcR is the cell surface molecule of specific affinity immunoglobulin (IgG) FC fragment. It is expressed in immune helper cells and effector cells, and has many important physiological functions. It is the link between cellular immunity and humoral immunity.Play a major role in the immune regulation of the body.Antibody mediated inflammatory response can be regulated by inhibitory and activated FcR, so FcR is an ideal drug target for the treatment of autoimmune diseases and allergies.In this study, the linear ligand binding epitopes of human IgGFc receptor FcyR were preliminarily identified by using synthetic polypeptides. It is the first time to explore the ligand binding epitopes of FcR, which is of great significance for further understanding the molecular basis of FcyR-IgG interaction.It provides a new idea for the molecular design of FcR target drugs.Human FcyRI cd64) is a high affinity receptor, which can bind to human IgG monomer. The extracellular domain contains three Ig-like domains.In this study, the huFcyRI coding region cDNA was subcloned into the expression vector pcDNA3, and the receptor molecules were expressed on the surface of COS-7 cells. The ligand specific IgG-RBC of huFc 緯 RI was determined by rosette assay to form an obvious rosette on huFc 緯 RI transfected cells.The extracellular region of huFc 緯 RI was subcloned into prokaryotic expression vector pGEX-6P-1. The extracellular domain of huFc 緯 RI was expressed in Escherichia coli BL21, but the recombinant huFc 緯 RI protein was not successfully refolded from the inclusion body.In order to identify the linear ligand binding epitopes of huFc 緯 RI, huFc 緯 RI polypeptides CLYYRNGKAFKFF at position 122-133 and CTNISHNGTYH at position 144-153 on huFc 緯 RI were designed and synthesized in EC2 domain. They were located in C-C 'ring and E-F ring of receptor EC2 domain.
【學位授予單位】：河南農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R392.1;Q78

【共引文獻】

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本文編號：1755426