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MyD88在OK-432誘導(dǎo)樹(shù)突狀細(xì)胞成熟中的作用

發(fā)布時(shí)間:2018-04-09 18:58

  本文選題:樹(shù)突狀細(xì)胞 切入點(diǎn):RNA 出處:《福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2010年01期


【摘要】:目的探討小鼠骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞(DCs)髓性分化蛋白88(MyD88)在OK-432誘導(dǎo)DCs成熟中的作用機(jī)制。方法分離小鼠骨髓單核細(xì)胞(BMMCs),在含10%胎牛血清、重組小鼠粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重組小鼠白細(xì)胞介素-4(rmIL-4)的培養(yǎng)體系中誘導(dǎo)培養(yǎng),所得的細(xì)胞即為DCs。于培養(yǎng)的第5天,將細(xì)胞分為3組:對(duì)照組不加OK-432和MyD88 si RNA;OK-432組加入終濃度為5μg/mL的OK-432;RNA干擾組加入MyD88 si RNA12 h后,再加入5μg/mL OK-432刺激。半定量RT-PCR法檢測(cè)DCs中MyD88的表達(dá);ELISA法檢測(cè)各組DCs分泌腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和IL-12的能力;MTT法檢測(cè)DCs體外刺激同種混合淋巴細(xì)胞增殖的免疫活性。結(jié)果OK-432組DCs的MyD88高表達(dá)、TNF-α和IL-12釋放明顯增加并能誘導(dǎo)較強(qiáng)混合淋巴細(xì)胞反應(yīng),而用MyD88 si RNA干擾后以上效應(yīng)均降低(P0.05)。結(jié)論靶向MyD88 si RNA可明顯抑制小鼠DCs中MyD88的表達(dá)和OK-432誘導(dǎo)的DCs成熟,表明MyD88介導(dǎo)OK-432誘導(dǎo)的DCs成熟。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of myeloid differentiation protein (MyD88) from mouse bone marrow dendritic cells (DCS) in DCs maturation induced by OK-432.Methods Mouse bone marrow monocytes were isolated and cultured in the culture system containing 10% fetal bovine serum, recombinant mouse granulocyte-macrophage colony stimulating factor (rmGM-CSFN) and recombinant mouse interleukin-4 (rmIL-4).The expression of MyD88 in DCs was detected by semi-quantitative RT-PCR method. The ability of DCs to secrete TNF- 偽 TNF- 偽 and IL-12 was detected by Elisa.Results the high expression of TNF- 偽 and IL-12 in DCs in OK-432 group was significantly increased and could induce a strong mixed lymphocyte reaction, but the above effects were decreased after MyD88 si RNA interference.Conclusion targeted MyD88 si RNA can significantly inhibit the expression of MyD88 in mouse DCs and DCs maturation induced by OK-432, suggesting that MyD88 mediates OK-432 induced DCs maturation.
【作者單位】: 福建醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)與病理生理學(xué)系;河北省趙縣人民醫(yī)院;福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院血液科;福建省中醫(yī)藥研究院;
【基金】:福建省自然科學(xué)基金(C0410020)
【分類號(hào)】:R392

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1727722

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