本文選題：白念珠菌　切入點(diǎn)：ALS基因　出處：《青島大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： 目的：通過(guò)對(duì)白念珠菌酵母狀態(tài)和芽管狀態(tài),以及浮游狀態(tài)和生物膜狀態(tài)下ALS4、ALS9基因mRNA表達(dá)水平的比較,探討這兩種基因在白念珠菌表型轉(zhuǎn)換及生物膜形成中可能發(fā)揮的作用,為進(jìn)一步研究白念珠菌的發(fā)病機(jī)制提供理論依據(jù)。 方法：選取3株標(biāo)準(zhǔn)株白念珠菌和10株臨床株白念珠菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。白念珠菌酵母狀態(tài)的培育和芽管狀態(tài)的誘導(dǎo)以及浮游狀態(tài)和生物膜狀態(tài)的制備：GBS培養(yǎng)基,25℃振蕩培養(yǎng)48h,收獲酵母狀態(tài)；pH7.0的RPMI-1640液體培養(yǎng)基,37℃震蕩培養(yǎng)3h,收獲芽管狀態(tài)；體外6孔細(xì)胞培養(yǎng)板涂布小牛血清,RPMI-1640液體培養(yǎng)基,37℃靜置培養(yǎng)48h,收獲生物膜狀態(tài)。液氮反復(fù)凍融加Trizol法提取不同生長(zhǎng)狀態(tài)白念珠菌的總RNA, RNA的純度經(jīng)紫外分光光度計(jì)A260/280比值估計(jì),RT-PCR兩步法擴(kuò)增ALS4、ALS9基因mRNA,及內(nèi)對(duì)照ACT1基因mRNA,擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳,凝膠成像系統(tǒng)拍照。采用QuantityOne電泳分析軟件對(duì)電泳條帶進(jìn)行分析,應(yīng)用SPSS醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件包兩樣本均數(shù)配對(duì)資料的t檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(以P0.05為顯著性標(biāo)準(zhǔn))。 結(jié)果：標(biāo)準(zhǔn)株白念珠菌芽管狀態(tài)的ALS4基因mRNA(P0.05)和ALS9基因mRNA(P0.05)相對(duì)表達(dá)水平均明顯高于酵母狀態(tài),臨床株白念珠菌芽管狀態(tài)的ALS4基因mRNA(P0.05)和ALS9基因mRNA(P0.05)相對(duì)表達(dá)水平均明顯高于酵母狀態(tài)；標(biāo)準(zhǔn)株白念珠菌生物膜狀態(tài)的ALS4基因mRNA(P0.05)和ALS9基因mRNA(P0.05)相對(duì)表達(dá)水平均高于浮游狀態(tài),臨床株白念珠菌生物膜狀態(tài)的ALS4基因mRNA(P0.05)和ALS9基因mRNA(P0.05)相對(duì)表達(dá)水平均高于浮游狀態(tài)。 結(jié)論：ALS4基因和ALS9基因可能在白念珠菌的酵母相向菌絲相轉(zhuǎn)換和體外生物膜形成中起重要作用。
[Abstract]:Objective: to compare the mRNA expression levels of ALS4 and ALS9 genes in Candida albicans yeast and bud tube, and to explore the role of these two genes in phenotypic transformation and biofilm formation of Candida albicans.To provide theoretical basis for further study of the pathogenesis of Candida albicans.Methods: three standard strains of Candida albicans and 10 clinical strains of Candida albicans were selected for experimental study.The cultivation of Candida albicans and the induction of bud tube state as well as the preparation of planktonic state and biofilm state; the culture of RPMI-1640 liquid medium at 25 鈩，

本文編號(hào)：1714818