本文選題：LOC　切入點(diǎn)：三段重復(fù)表達(dá)抗原序列　出處：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2015年12期

【摘要】：目的制備特異性抗人LOC339524的單克隆抗體(m Ab)并進(jìn)行應(yīng)用。方法將LOC339524蛋白的非糖基化抗原序列的編碼基因進(jìn)行三段重復(fù)表達(dá),合成的基因克隆到質(zhì)粒p ET28a上。采用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)獲得LOC339524重組蛋白,以此作為免疫原免疫BALB/c小鼠,獲得m Ab。ELISA測(cè)定抗體特異性及效價(jià)。Western blot法鑒定LOC339524重組蛋白、免疫組織化學(xué)技術(shù)分別檢測(cè)人心肌組織和H9C2細(xì)胞中LOC339524蛋白的表達(dá),采用制備的抗體檢測(cè)不同心臟病患者血清LOC339524水平。結(jié)果篩選出2株能穩(wěn)定分泌抗人LOC339524蛋白m Ab的雜交瘤細(xì)胞株,5-D3和4-F8。其中5-D3效價(jià)高于4-F8,達(dá)2×106。Western blot法、免疫組織化學(xué)技術(shù)證明5-D3能特異性識(shí)別人和大鼠LOC339524蛋白,應(yīng)用制備的抗體可成功檢測(cè)不同心臟病患者血清LOC339524的水平。結(jié)論成功制備了特異性好、效價(jià)高的抗人LOC339524蛋白m Ab。
[Abstract]:Objective To prepare the monoclonal antibody ( m Ab ) specific to human LOC339524 and its application . The recombinant protein of LOC339524 protein was cloned into plasmid pET28a . The recombinant protein of LOC339524 was obtained by Western blot .

【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院麻醉科;第三軍醫(yī)大學(xué)臨床生物化學(xué)教研室;
【基金】：重慶市自然科學(xué)基金(2013C292)
【分類號(hào)】：Q813.2;R392.11

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