本文選題：白念珠菌　切入點(diǎn)：釀酒酵母　出處：《天津大學(xué)》2009年博士論文

【摘要】： 本研究克隆了釀酒酵母ScYMR034c的白色念珠菌同源基因CaFSP1,發(fā)現(xiàn)它編碼一個(gè)411個(gè)氨基酸,與ScYMR034c編碼的氨基酸序列一致性為57%,相似性為73%。根據(jù)DNA同源重組的原理,構(gòu)建了CaFSP1的缺失菌株,其基因型得到PCR和Southern雜交的證實(shí)。表型研究發(fā)現(xiàn)CaFSP1基因的缺失導(dǎo)致細(xì)胞膜完整性受到破壞,造成白色念珠菌細(xì)胞對(duì)SDS、NaCl、CaCl2和KCl敏感,對(duì)LiCl、H2O2和ZnCl2產(chǎn)生耐受性,對(duì)抗真菌藥物酮康唑和特比耐芬產(chǎn)生抗藥性。此外,CaFSP1基因的缺失促進(jìn)白色念珠菌在Spider培養(yǎng)基中菌絲的形成,但是局限了菌落向外周浸入生長(zhǎng)的能力。引入克隆的CaFSP1基因能夠恢復(fù)fsp1缺失株所有的表型。我們推測(cè)CaFSP1基因與白色念珠菌細(xì)胞的固醇和鞘脂的代謝有關(guān),這兩個(gè)成分對(duì)維持細(xì)胞膜正常功能和白色念珠菌的形態(tài)轉(zhuǎn)化非常重要。我們還對(duì)CaFSP1在酵母中的同源基因ScYMR034c的功能進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)酵母ymr34c△菌株也對(duì)NaCl和KCl敏感,但是CaFSP1不能互補(bǔ)ymr34c△酵母菌株的表型缺陷。我們還構(gòu)建了釀酒酵母ymr34c△acr3△雙基因缺失株,發(fā)現(xiàn)ymr34c△acr3△雙基因缺失株和ymr34c△單倍體缺失株對(duì)酮康唑的敏感性和野生型對(duì)照沒有差異,而酵母二倍體缺失株acr3△對(duì)酮康唑敏感。用同樣的策略,我們還敲除了編碼白色念珠菌線粒體中非常重要的電子傳遞載體NADH脫氫酶基因CaMCI4,為進(jìn)一步研究CaMCI4基因的功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:It was found that the deletion of CaFSP1 gene was sensitive to SDS , NaCl , CaCl2 and KCl . It was found that the deletion of CaFSP1 gene was sensitive to NaCl and KCl .

【學(xué)位授予單位】：天津大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R379

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1693065