本文選題：沙眼衣原體　切入點：分泌性蛋白　出處：《中國免疫學(xué)雜志》2015年05期

【摘要】：目的:原核表達沙眼衣原體(Ct)質(zhì)粒分泌性蛋白pgp3,制備其單克隆抗體(mAbs)并鑒定其基本生物學(xué)特征。方法:構(gòu)建pGEX-6p2-pgp3原核表達載體,在大腸桿菌中表達GST-pgp3融合蛋白作為抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞SP2/0融合,ELISA法篩選分泌抗pgp3蛋白mAbs的細胞株,對mAbs特異性、型別、類及亞類和效價進行鑒定。結(jié)果:GST-pgp3融合蛋白表達成功,且成功篩選出5株穩(wěn)定分泌mAbs的雜交瘤細胞株,其中4株為分泌抗pgp3mAbs的雜交瘤細胞株(P1B3、P2A1、P2B6、P2C2),mAbs類型為IgG1/κ型,剩余1株為分泌抗GST蛋白的雜交瘤細胞株(P3B4),mAbs類型為IgG2b/κ型。交瘤細胞株P(guān)1B3、P2A1、P2B6、P2C2、P3B4培養(yǎng)上清中的mAbs效價分別為1∶6400、1∶3200、1∶12800、1∶6400和1∶6400。結(jié)論:成功制備出抗pgp3mAbs,為進一步研究Ct質(zhì)粒蛋白pgp3功能及為Ct檢測方法的建立奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective: to express the secreted protein pgp3 of Chlamydia trachomatis (CT) plasmid, prepare its monoclonal antibody (mAbs) and identify its basic biological characteristics. Methods: the prokaryotic expression vector of pGEX-6p2-pgp3 was constructed. BALB/c mice were immunized with GST-pgp3 fusion protein expressed in Escherichia coli as antigen. The spleen cells and myeloma cell SP2/0 fusion Elisa were used to screen the cell lines secreting anti-#en3# protein mAbs, which were specific to mAbs and specific to the type of mAbs. Results the fusion protein was successfully expressed and five hybridoma cell lines secreting mAbs stably were successfully screened. Among them, 4 were hybridoma cell lines secreting anti-#en1#. The type of P2C2Abs was IgG1/ 魏 type. The remaining hybridoma cell line, P3B4, secreted anti-#en0# protein, was of IgG2b/ 魏 type. The mAbs titers in the supernatant of the supernatant of p1B3OP2B6, P2B6, P2C2P3B4 were 1: 4001: 32001128001w 6400 and 1: 64000.Conclusion: Anti-pgp3mAbs were successfully prepared for further study of the pgp3 function of Ct plasmid protein. And it lays a foundation for the establishment of Ct detection method.
【作者單位】： 河北北方學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)院;邢臺市人民醫(yī)院檢驗科;
【基金】：校級青年基金資助項目(No.Q2013024)
【分類號】：R392

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號：1670390