本文選題：ICCs樣細胞　切入點：KIT蛋白　出處：《石河子大學》2009年碩士論文

【摘要】：目的:本課題以正常成年豚鼠為研究對象,通過對膀胱組織內(nèi)Cajal樣間質細胞(interstitial cells of Cajal, ICCs)的分布情況以及其與周圍一氧化氮陽性神經(jīng)元細胞的分布規(guī)律進行觀察;對體外培養(yǎng)的ICCs樣細胞進行分泌功能特性研究,探討其作為膀胱的起博細胞的分布、功能及意義,為臨床上治療某些疾病(如detrusor instability,DI)提供新的切入點。 方法:本實驗通過豚鼠膀胱冰凍切片運用c-kit免疫熒光觀察ICCs樣細胞的在正常成年豚鼠膀胱組織的分布情況;結合c-kit、NOS2免疫熒光雙標技術觀察ICCs樣細胞與一氧化氮陽性神經(jīng)元的分布關系;采用酶消化法,得到體外培養(yǎng)狀態(tài)下的ICCs樣細胞,并運用c-kit、NOS2免疫熒光雙染技術,探討ICCs樣細胞的分泌功能。 結果:通過免疫熒光觀察到ICCs樣細胞在豚鼠膀胱內(nèi)的分布情況:組織學分布組中肌層多于粘膜下層,粘膜下層多于粘膜層;解剖學分布組中膀胱頂多于膀胱體,膀胱體多于膀胱頸;通過熒光雙標法可以觀察到,ICCs樣細胞分布于一氧化氮陽性神經(jīng)元周圍;通過免疫熒光雙染體外的ICCs樣細胞,可以發(fā)現(xiàn)c-kit、NOS2在ICCs樣細胞內(nèi)共表達的現(xiàn)象。 結論:ICCs樣細胞在膀胱內(nèi)不同部位的分布情況不同,在膀胱頂和膀胱肌層內(nèi)分布較多,與其生理功能相符合,為其作為膀胱起搏細胞打下了組織分布的基礎;ICCs樣細胞分布于一氧化氮陽性神經(jīng)周圍,兩種都分布于膀胱平滑肌組織間,兩者聯(lián)系密切,為研究“神經(jīng)- ICCs樣細胞-平滑肌”作用單元提供了有力的證據(jù);ICCs樣細胞熒光雙染發(fā)現(xiàn)其具備分泌NO的結構基礎,為研究ICCs樣細胞的分泌功能進而推斷其對膀胱逼尿肌的作用方式提供了基礎,同時為臨床上治療某些疾病開辟了新的切入點。
[Abstract]:Objective: to study the distribution of interstitial cells of Cajal cells of Cajal (ICCs) in normal adult guinea pigs, and to observe the distribution of ICCs with the surrounding nitric oxide (no) positive neurons. The secretory function of ICCs like cells cultured in vitro was studied, and the distribution, function and significance of PBCs in bladder were discussed, which provided a new entry point for the clinical treatment of some diseases such as detrusor instability. Methods: the distribution of ICCs like cells in normal adult guinea pig bladder was observed by c-kit immunofluorescence using frozen section of guinea pig bladder. The relationship between the distribution of ICCs like cells and nitric oxide positive neurons was observed by using the double immunofluorescence staining technique of c-kiti NOS2, the ICCs like cells in vitro were obtained by enzyme digestion, and the double immunofluorescence staining technique was used to detect the distribution of ICCs like cells and nitric oxide positive neurons. To investigate the secretory function of ICCs-like cells. Results: the distribution of ICCs like cells in the bladder of guinea pigs was observed by immunofluorescence: the muscular layer was more than the submucosal layer and the submucosal layer was more than the mucosal layer in the histological distribution group, and the bladder in the anatomical distribution group was more than the bladder body. The presence of ICCS-like cells around the nitric oxide positive neurons was observed by fluorescence double labeling method, and the co-expression of c-kitS2-like cells in ICCs like cells could be found by immunofluorescence double staining in vitro. Conclusion the distribution of ICCs like cells in different parts of bladder is different, and the distribution of ICCs like cells in the top of bladder and the muscular layer of bladder is more, which is consistent with its physiological function. The ICCs like cells were distributed around the nitric oxide positive nerve, and both of them were distributed in the smooth muscle tissue of the bladder, which were closely related to each other. For the study of neuro-ICC-like cell-smooth muscle unit, it provides strong evidence that ICC-like cells have the structural basis of no secretion by fluorescence double staining. It provides a basis for studying the secretory function of ICCs-like cells and inferring its mode of action on bladder detrusor. It also provides a new entry point for the clinical treatment of some diseases.
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R329

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