發(fā)布時(shí)間：2018-03-23 15:47

  本文選題：嗜麥芽窄食單胞菌　切入點(diǎn)：生物被膜　出處：《天津醫(yī)科大學(xué)》2008年碩士論文

【摘要】： 目的:了解天津地區(qū)嗜麥芽窄食單胞菌(Stenotrophomonas maltophilia,SMA)感染與耐藥現(xiàn)狀,探討銀染法對(duì)鑒定SMA生物被膜形成的應(yīng)用價(jià)值;觀察并了解治療嗜麥芽窄食單胞菌感染的8種常用抗菌藥物對(duì)其生物被膜單獨(dú)和聯(lián)合作用后的效果,為臨床上更合理的治療SMA感染提供理論依據(jù)。 方法:通過改良平板法在硅膠膜片——水解酪蛋白肉湯(Mueller-Hintonbroth,MHB)系統(tǒng)中構(gòu)建SMA生物被膜的體外模型,并以銀染法和掃描電鏡進(jìn)行鑒定。分析臨床分離的51株SMA對(duì)12種常用抗菌藥物的耐藥情況,通過微量接種針裝置建立SMA生物被膜的體外模型,測(cè)定左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢他啶、哌拉西林、紅霉素、磺胺甲嗯唑、慶大霉素對(duì)產(chǎn)生物被膜SMA的細(xì)菌生物被膜抑制濃度(Biofilm Inhibitory Concentration,BIC),并與相應(yīng)抗生素的最低抑菌濃度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)進(jìn)行比較。應(yīng)用聯(lián)合藥敏實(shí)驗(yàn)測(cè)定紅霉素與左氧氟沙星、頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林對(duì)5株SMA成熟生物被膜的聯(lián)合作用,同時(shí)行掃描電鏡觀察抗菌藥物作用后細(xì)菌生物被膜的形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果:銀染法和掃描電鏡下觀察到嗜麥芽窄食單胞菌能在硅膠膜片上形成成熟的生物被膜;51株SMA對(duì)12種常用抗菌藥物的耐藥率分別是:左氧氟沙星12.70%、氧氟沙星25.70%、環(huán)丙沙星37.50%、頭孢哌酮/舒巴坦43.90%、哌拉西林44.60%、頭孢吡肟45.10%、頭孢哌酮49.00%、頭孢他啶60.30%、慶大霉素81.80%、頭孢曲松87.90%、阿米卡星90.60%、頭孢噻肟95%;其中,對(duì)兩種抗菌藥物耐藥的有4株,對(duì)兩種以上抗菌藥物耐藥的臨床菌共47株,占總數(shù)的92.16%(47/51)。42株SMA利用微量接種針成功建立成熟生物被膜的體外模型,形成BBF后8種抗菌藥物的BIC_(50)分別為:左氧氟沙星4μg/ml、環(huán)丙沙星8μg/ml、頭孢他啶128μg/ml、頭孢哌酮/舒巴坦128μg/ml、哌拉西林256μg/ml、紅霉素128μg/ml、磺胺甲嗯唑304μg/ml、慶大霉素256μg/ml。聯(lián)合藥敏實(shí)驗(yàn)和掃描電鏡下顯示,左氧氟沙星單獨(dú)或聯(lián)合紅霉素均能破壞成熟生物被膜的結(jié)構(gòu)。 結(jié)論:本地區(qū)分離的SMA具有耐藥譜廣、耐藥率高特點(diǎn):左氧氟沙星、磺胺甲VA唑和頭孢哌酮/舒巴坦對(duì)SMA有較強(qiáng)的抗菌活性。銀染法操作簡單,可用于SMA生物被膜的初步鑒定。與浮游態(tài)細(xì)菌相比,形成生物被膜后SMA對(duì)抗生素的耐藥程度增加;聯(lián)合左氧氟沙星、紅霉素可破壞SMA-BBF完整結(jié)構(gòu),細(xì)菌數(shù)量減少,有助于增強(qiáng)殺菌效果。
[Abstract]:Objective: to understand the Tianjin region of Stenotrophomonas maltophilia (Stenotrophomonas maltophilia, SMA) infection and drug resistance status, investigate the application value of silver staining method for the identification of SMA biofilm formation; to observe and understand the treatment of Stenotrophomonas maltophilia infection in 8 kinds of antibacterial drugs on the biofilm alone and in combination with after effect, provide a theoretical basis for clinical rational treatment of SMA infection.
Methods: by modified plating method on silica gel membrane - casein hydrolysate Allbumen broth (Mueller-Hintonbroth, MHB) in vitro model of SMA biofilm system, and the silver staining method and scanning electron microscopy were identified. Analysis of 51 clinical isolates of SMA to 12 kinds of antimicrobial drug resistance drug, an in vitro model SMA the biofilm by micro inoculation needle device for determination of levofloxacin, ciprofloxacin, Cefoperazone / sulbactam, ceftazidime, piperacillin, erythromycin, sulfamethoxazole, gentamicin on biological production by bacteria biofilm SMA film (Biofilm Inhibitory Concentration, inhibitory concentration BIC), and the minimum inhibitory concentration and the corresponding antibiotics (Minimum Inhibitory Concentration, MIC) were compared. The determination of erythromycin and levofloxacin combined drug sensitivity test, Cefoperazone / Shubatan, piperacillin against 5 strains of SMA biofilms At the same time, the morphological changes of the bacterial biofilm were observed by scanning electron microscopy.
Results: silver staining and scanning electron microscope to observe the Stenotrophomonas maltophilia can mature biofilm formation in silica gel membrane; 51 strains of SMA are 12 kinds of commonly used antimicrobial drugs resistance rate: 12.70% with levofloxacin, 25.70% ofloxacin, ciprofloxacin 37.50%, ceftazidime Cefoperazone / sulbactam 43.90%. Piperacillin 44.60%, cefepime cefoperazone 45.10%, 49%, 60.30% and 81.80% of ceftazidime, gentamicin, ceftriaxone 87.90%, Amikacin 90.60%, cefotaxime 95%; among them, two kinds of antimicrobial resistance of 4 strains of more than two kinds of anti bacteria drug resistance of clinical bacteria were 47 strains, accounting for the total number of 92.16% (47/51).42 strain SMA using micro inoculation needle successfully established in vitro model of mature biofilm formation after BBF, 8 kinds of antibiotics were BIC_ (50): 4 g/ml of levofloxacin, ciprofloxacin and ceftazidime in 8 g/ml, 128 g/ml, Cefoperazone / sulbactam 128 G/ml, piperacillin 256 mu g/ml, erythromycin 128 mu g/ml, sulfamethoxazole 304 g/ml, gentamicin 256 mu g/ml. combined with drug sensitivity test and scanning electron microscope showed that levofloxacin alone or combined with erythromycin could destroy the structure of mature biofilm.
Conclusion: local separation of SMA has a broad resistance spectrum, high resistance rate: levofloxacin, trimethoprim VA triazole and Cefoperazone / sulbactam had strong antibacterial activity to SMA. Silver staining method has the advantages of simple operation, can be used for the identification of SMA biofilm. Compared with planktonic bacteria, forming biofilm after the film degree of resistance to antibiotics increased SMA; combined with levofloxacin, erythromycin can destroy the SMA-BBF structure, the number of bacteria decreased, helps to enhance the sterilization effect.

【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R378

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本文編號(hào)：1654115