腫瘤抑制因子p53蛋白在畢赤酵母中的克隆表達(dá)
本文選題:畢赤酵母 切入點(diǎn):TP抑癌基因 出處:《汕頭大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2015年04期 論文類型:期刊論文
【摘要】:TP53基因在調(diào)控細(xì)胞信號(hào)通路和抑制腫瘤細(xì)胞中發(fā)揮著重要作用.本研究利用畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)以獲得大量重組p53蛋白,為此,本文將人TP53基因克隆至表達(dá)載體p PIC3.5K,電轉(zhuǎn)化進(jìn)入畢赤酵母GS115,通過(guò)組氨酸篩選和G418篩選,獲得高拷貝穩(wěn)定轉(zhuǎn)化子.SDS-PAGE和Western Blot檢測(cè)結(jié)果表明p53蛋白可以在畢赤酵母中表達(dá).本研究所獲酵母菌株為今后大規(guī)模生產(chǎn)重組p53蛋白奠定了基礎(chǔ).
[Abstract]:TP53 gene plays an important role in regulating cell signaling pathway and inhibiting tumor cells. In this study, we used Pichia pastoris expression system to obtain a large number of recombinant p53 protein. In this paper, the human TP53 gene was cloned into the expression vector pPIC3.5K and electrotransformed into Pichia pastoris GS115. histidine screening and G418 screening were carried out. The results of high copy stable transformant. SDS-PAGE and Western Blot analysis showed that p53 protein could be expressed in Pichia pastoris. The yeast strain obtained in this study laid a foundation for large-scale production of recombinant p53 protein in the future.
【作者單位】: 汕頭大學(xué)理學(xué)院生物醫(yī)藥與先進(jìn)材料研究中心;汕頭大學(xué)生物系;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81172894;81370925) 廣東省教育廳科技創(chuàng)新重點(diǎn)項(xiàng)目(cxzd1123)
【分類號(hào)】:R3416
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本文編號(hào):1651232
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