發(fā)布時間：2018-03-19 06:52

  本文選題：抗體純化　切入點：PVDF膜　出處：《氨基酸和生物資源》2015年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：通過結合有抗原的PVDF膜進行親和純化是小規(guī)�？焖佾@取特異性抗體的一種重要手段。該方法的關鍵步驟之一是將抗原蛋白有效地吸附到PVDF膜上。盡管人們廣泛使用PVDF膜親和純化抗體,但對影響PVDF膜吸附抗原蛋白的因素至今仍缺乏系統(tǒng)研究。以BSA為模型蛋白,檢測在不同蛋白濃度、不同孵育時間、不同溶質溶液和不同pH值的情況下,PVDF膜吸附蛋白的效率。當?shù)鞍兹芤簽镻BS時,1cm2 PVDF膜與2mg·mL-1 BSA溶液孵育1h可達到其最大吸附率。常見的蛋白質緩沖液組分對PVDF膜的蛋白吸附率影響不一。其中,咪唑、Tris-HCl、NaCl、KCl在廣泛的濃度范圍內(nèi)對PVDF膜吸附蛋白沒有明顯影響,而較高濃度的SDS、Triton-X 100、Tween-20、乙二醇、甘油、鹽酸胍、尿素等可顯著降低PVDF膜對蛋白的吸附效率,在pH為6.5~9.5的Tris-HCl中,隨著pH的增高而吸附效率降低。
[Abstract]:Affinity purification with antigen-bound PVDF membrane is an important means to obtain specific antibody on a small scale. One of the key steps of this method is to effectively adsorb antigen protein onto PVDF membrane. The antibody was purified by PVDF membrane affinity. However, the factors affecting the adsorption of antigenic proteins on PVDF membranes have not been systematically studied. BSA was used as a model protein to detect different protein concentrations and incubation time. Under different solute solution and different pH value, the adsorption efficiency of membrane protein was obtained. When the protein solution was PBS, the maximum adsorption rate could be achieved when the membrane was incubated with 2 mg 路mL-1 BSA solution for 1 h. The common protein buffer components could reach the maximum adsorption rate on the eggs of PVDF membrane. The effect of white adsorption rate is different. Imidazolium Tris-HCln NaCl-KCl had no significant effect on PVDF membrane adsorption protein in a wide range of concentrations, while higher concentrations of SDSN Triton-X 100 Tween-20, ethylene glycol, glycerol, guanidine hydrochloride, urea and so on could significantly reduce the adsorption efficiency of PVDF membrane on the protein, and the adsorption efficiency of the membrane protein was significantly decreased when the pH was 6.59.5 Tris-HCl. The adsorption efficiency decreased with the increase of pH.
【作者單位】： 華中農(nóng)業(yè)大學農(nóng)業(yè)微生物學國家重點實驗室;
【基金】：中央高�；究蒲袠I(yè)務費專項資金(2014PY003)
【分類號】：R392

【參考文獻】

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【共引文獻】

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