本文選題：白細胞介素　切入點：原核表達　出處：《微生物學免疫學進展》2015年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的為了在大腸埃希菌中表達具有生物學活性的小鼠IL-33成熟蛋白。方法利用PCR技術從pc DNA3.1-IL-33質粒中擴增小鼠IL-33成熟蛋白的基因,將其插入原核表達載體p ET21a(+),構建成p ET21a-m IL-33質粒,轉化至大腸埃希菌BL21,篩選出可表達m IL-33的大腸埃希菌工程菌株。經(jīng)IPTG誘導表達,用鎳柱親和層析法純化。結果經(jīng)SDS-PAGE分析獲得純度高達95%的m IL-33蛋白,相對分子質量18 000。ELISA試驗顯示m IL-33可以有效的促進腸系膜淋巴細胞產生Th2型細胞因子(IL-5),與未處理組的差異具有顯著的統(tǒng)計學意義。結論利用大腸埃希菌表達系統(tǒng)表達了具有生物活性的m IL-33蛋白,為繼續(xù)開展IL-33在炎癥性腸病的免疫治療研究奠定了基礎。
[Abstract]:Objective to express mouse IL-33 mature protein with biological activity in Escherichia coli. Methods the gene of mouse IL-33 mature protein was amplified from PC DNA3.1-IL-33 plasmid by PCR technique and inserted into prokaryotic expression vector pET21a (pET21a) to construct p ET21a-m IL-33 plasmid. Transformed to Escherichia coli BL21, an engineering strain of Escherichia coli expressing m IL-33 was screened. The recombinant strain was induced by IPTG and purified by nickel column affinity chromatography. The purity of m IL-33 protein was as high as 95% by SDS-PAGE analysis. Relative molecular weight 18 000.ELISA test showed that m IL-33 could effectively promote the production of Th2 type cytokine IL-5 in mesenteric lymphocytes, and there was significant difference between the untreated group and the untreated group. Conclusion the expression system of Escherichia coli can be used. Reached the bioactive m IL-33 protein, It lays a foundation for the further study of immunotherapy of IL-33 in inflammatory bowel disease.
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院免疫學教研室;遼寧大學生命科學學院;
【基金】：遼寧省科學計劃項目(2011415052-1)
【分類號】：R392

【參考文獻】

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本文編號：1633186