本文選題：白細(xì)胞介素　切入點(diǎn)：原核表達(dá)　出處：《微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展》2015年05期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：目的為了在大腸埃希菌中表達(dá)具有生物學(xué)活性的小鼠IL-33成熟蛋白。方法利用PCR技術(shù)從pc DNA3.1-IL-33質(zhì)粒中擴(kuò)增小鼠IL-33成熟蛋白的基因,將其插入原核表達(dá)載體p ET21a(+),構(gòu)建成p ET21a-m IL-33質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌BL21,篩選出可表達(dá)m IL-33的大腸埃希菌工程菌株。經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),用鎳柱親和層析法純化。結(jié)果經(jīng)SDS-PAGE分析獲得純度高達(dá)95%的m IL-33蛋白,相對(duì)分子質(zhì)量18 000。ELISA試驗(yàn)顯示m IL-33可以有效的促進(jìn)腸系膜淋巴細(xì)胞產(chǎn)生Th2型細(xì)胞因子(IL-5),與未處理組的差異具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論利用大腸埃希菌表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)了具有生物活性的m IL-33蛋白,為繼續(xù)開(kāi)展IL-33在炎癥性腸病的免疫治療研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to express mouse IL-33 mature protein with biological activity in Escherichia coli. Methods the gene of mouse IL-33 mature protein was amplified from PC DNA3.1-IL-33 plasmid by PCR technique and inserted into prokaryotic expression vector pET21a (pET21a) to construct p ET21a-m IL-33 plasmid. Transformed to Escherichia coli BL21, an engineering strain of Escherichia coli expressing m IL-33 was screened. The recombinant strain was induced by IPTG and purified by nickel column affinity chromatography. The purity of m IL-33 protein was as high as 95% by SDS-PAGE analysis. Relative molecular weight 18 000.ELISA test showed that m IL-33 could effectively promote the production of Th2 type cytokine IL-5 in mesenteric lymphocytes, and there was significant difference between the untreated group and the untreated group. Conclusion the expression system of Escherichia coli can be used. Reached the bioactive m IL-33 protein, It lays a foundation for the further study of immunotherapy of IL-33 in inflammatory bowel disease.
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;遼寧大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：遼寧省科學(xué)計(jì)劃項(xiàng)目(2011415052-1)
【分類(lèi)號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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4 邱艷;趙凌杰;;白介素33在類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的研究進(jìn)展[J];安徽醫(yī)藥;2014年07期

5 宋允娜;鄭萍;;IL-33在炎癥性腸病中的研究進(jìn)展[J];國(guó)際消化病雜志;2014年03期

6 Hong-Mei Xu;;Th1 cytokine-based immunotherapy for cancer[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2014年05期

7 韓雙燕;白勇濤;王書(shū)臣;;白介素-33在支氣管哮喘發(fā)病中作用的研究進(jìn)展[J];感染、炎癥、修復(fù);2013年03期

8 王霞;張秀明;;可溶性ST2在心力衰竭中的臨床應(yīng)用前景[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2015年03期

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9 鄧益鋒;鄭燕玲;楊俊花;周振雷;夏繼飛;侯加法;;蛋雞TRPV6基因的原核表達(dá)、純化及抗體制備[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)——第三屆中國(guó)獸醫(yī)臨床大會(huì)論文集[C];2012年

10 胡阿勇;張春杰;李銀聚;程相朝;吳庭才;張旭;廖成水;王曉利;;雞白介素5基因的克隆分析及原核表達(dá)[A];第四屆第十次全國(guó)學(xué)術(shù)研討會(huì)暨動(dòng)物微生態(tài)企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略論壇論文集（下冊(cè)）[C];2010年

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5 王永才;豬Sirtuin3基因的克隆及原核表達(dá)[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

6 張舒婕;鴨MHCⅡα、β鏈的克隆和原核表達(dá)及其抗體制備[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

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8 賈如;細(xì)粒棘球蚴Eg95基因的克隆、原核表達(dá)及抗體制備[D];合肥工業(yè)大學(xué);2009年

9 楊永勝;豬α1干擾素基因克隆與原核表達(dá)[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

10 劉潤(rùn)先;維生素A結(jié)合蛋白基因的克隆及原核表達(dá)[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

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本文編號(hào)：1633186