本文選題：辛伐他汀　切入點(diǎn)：骨形成　出處：《華北煤炭醫(yī)學(xué)院》2009年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:本實(shí)驗給予SD大鼠頸部皮下注射辛伐他汀(5mg/kg/d),觀察辛伐他汀對幼鼠脛骨上端骨形成相關(guān)因子BMP-2、MMP-13、VEGF的表達(dá)及骨髓基質(zhì)干細(xì)胞成骨分化過程中BMP-2、RUNX2、Osterix、MSX2、DLX3、DLX5等因子mRNA表達(dá)水平的影響。方法:60只1周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為6組:實(shí)驗組,給藥1周(S1)、給藥2周(S2)、給藥3周(S3),對照組,對照1周(D1)、對照2周(D2)、對照3周(D3),每組10只。實(shí)驗組給予辛伐他汀懸液(simvastatin、DMSO、PBS)(5mg/kg/d),對照組給予空白對照液(PBS、DMSO混合液),皮下注射持續(xù)1、2、3周。所有實(shí)驗動物于最后一次注射藥物或空白對照液的第2天脫頸處死,立即取脛骨,固定、脫鈣、包埋,沿正中矢狀面作4μm連續(xù)切片,行BMP-2、MMP-13、VEGF免疫組化染色用圖像分析儀測量平均光密度值;取雙側(cè)股骨BMSCs向成骨方向誘導(dǎo)培養(yǎng),在細(xì)胞培養(yǎng)14天分別進(jìn)行ALP染色,21天采用Real-time PCR法檢測BMP-2、RUNX2、Osterix、MSX2、DLX3、DLX5等成骨過程中相關(guān)因子mRNA的表達(dá),28天進(jìn)行von Kossa染色。 結(jié)果:(1)脛骨免疫組化檢測結(jié)果:BMP-2、MMP-13、VEGF等因子的表達(dá)各周實(shí)驗組與對照組無差異(P0.05)。(2)ALP:各組ALP染色陽性細(xì)胞(胞漿藍(lán)黑色)比例均在30%左右(D1:0.29±0.13,S1:0.32±0.10,D1:0.28±0.15,S1:0.30±0.13,D1:0.31±0.13,S1:0.29±0.14)無顯著差別(P0.05)。(3)BMP-2、RUNX2、Osterix、MSX2、DLX3、DLX5因子mRNA表達(dá)水平組間無顯著差異(P0.05)。(4)von Kossa染色可見大小不等染為棕黑色的鈣化點(diǎn),其大小和密度組間無顯著差別(P0.05)。 結(jié)論:(1)皮下注射辛伐他汀(5mg/kg/d)不能影響脛骨上端骨形成相關(guān)因子BMP-2、MMP-13、VEGF等的表達(dá)。(2)皮下注射辛伐他汀(5mg/kg)不能影響B(tài)MSCs向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程以及成骨分化相關(guān)因子BMP-2、RUNX2、Osterix、MSX2、DLX3、DLX5 mRNA表達(dá)水平的變化。
[Abstract]:Objective: to observe the expression of simvastatin 5 mg / kg 路kg / d after subcutaneous injection of simvastatin to SD rats and the expression of BMP-2MMP 13 mRNA during osteogenic differentiation of bone marrow stromal stem cells (BMSCs) and the expression level of factors such as BMP-2RUNX2OUNX2OsterixMX2DLX3DLX5 in young rats. Methods Sixty one-week-old male Sprague-Dawley rats were randomly divided into 6 groups: experimental group, The control group was treated with S1 for 1 week, S2 for 2 weeks and S3 for 3 weeks. 10 rats in each group were given simvastatin suspension of simvastatin (DMSON) PBS5 mg / kg / d, while the control group received a mixture of PBSn and DMSO for 12 ~ 3 weeks. All the experimental animals were injected with simvastatin suspension (DMSON) 5 mg / kg / kg / d. All the experimental animals were injected with simvastatin suspension at the last time for 12 ~ 3 weeks, while the control group was given a mixture of PBSn and DMSO, which lasted for 12 ~ 3 weeks. The control group was given simvastatin suspension (DMSON) 5 mg / kg / d ~ (-1). On the second day after the removal of the neck, the subjects or the blank control solution were killed. Tibia was taken immediately, fixed, decalcified, embedded, and 4 渭 m serial sections were made along the median sagittal plane. The mean optical density was measured by using image analyzer with BMP-2MMP 13 BMSCs immunohistochemical staining, and the bilateral femur BMSCs was induced to be cultured in the direction of osteogenesis. After 14 days of culture, the expression of mRNA in osteogenesis was detected by Real-time PCR method. The expression of mRNA in osteogenic process such as MSX2DLX3DLX3DLX5 was detected by von Kossa staining for 28 days. Results Immunohistochemical examination of tibia showed that there was no difference in the expression of VEGF and other factors in the tibia between the experimental group and the control group. There was no significant difference between the experimental group and the control group in the proportion of ALP staining positive cells (cytosol blue black) in the 30% or so groups. The ratio of ALP staining positive cells (cytosol blue black) was about 30%. The ratio of mRNA expression was 0.29 鹵0.10D1: 0.28 鹵0.15S1: 0.30 鹵0.13D1cell 0.31 鹵0.13S1cell 0.29 鹵0.14). There was no significant difference in the expression of mRNA of RUNX2OsterixMX2DX3DX5. There was no significant difference between the two groups. The calcification spots of brown and black color could be seen in the staining of P0.05P0. 0. 0. 4 von Kossa, and there was no significant difference between the two groups. There was no significant difference in size and density between the two groups (P 0.05). Conclusion injection of simvastatin 5 mg / kg / d subcutaneously does not affect the expression of BMP-2MMP 13, VEGF et al.) injection of simvastatin 5 mg / kg subcutaneously does not affect the differentiation of BMSCs into osteoblasts and the osteogenic differentiation related factor BMP-2RUNX2OsterixMSX2DLX3 DLX5. Changes of mRNA expression level.
【學(xué)位授予單位】：華北煤炭醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R329.2

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本文編號：1630906