大腸桿菌腸毒素基因多重PCR檢測方法的建立
發(fā)布時間:2018-03-09 14:48
本文選題:產(chǎn)腸毒素大腸桿菌 切入點:耐熱腸毒素 出處:《中國人獸共患病學(xué)報》2015年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的建立一種快速檢測大腸桿菌耐熱腸毒素(heat-stable enterotoxin,STa,STb)和不耐熱腸毒素(heat-labile enterotoxin,LT-Ⅰ,LT-Ⅱ)基因的多重PCR方法。方法參照文獻合成四對可擴增產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)耐熱腸毒素基因(estA、estB)和不耐熱腸毒素基因(elt-Ⅰ、elt-Ⅱ)的特異性引物,通過反應(yīng)條件的優(yōu)化,敏感性、特異性試驗和臨床樣品檢測,建立檢測大腸桿菌腸毒素的多重PCR方法。結(jié)果用所建立的多重PCR方法可特異性擴增出estA(229bp)、estB(480bp)、elt-Ⅰ(605bp)和elt-Ⅱ(300bp)基因片段,最低檢出量分別為2.55×101 CFU/μL、2×101 CFU/μL、2×101 CFU/μL和2.47×103 CFU/μL。從22株大腸桿菌分離株中檢測到estA基因(2/22),elt-Ⅱ基因(3/22),未檢測到estB和elt-Ⅰ基因,檢測結(jié)果與常規(guī)PCR檢測結(jié)果一致。結(jié)論建立了檢測大腸桿菌腸毒素基因(estA、estB、elt-Ⅰ和elt-Ⅱ)的多重PCR方法,該方法具有良好的特異性和敏感性,能夠滿足對細菌培養(yǎng)物的檢測要求。
[Abstract]:Objective to establish a multiplex PCR method for rapid detection of the genes of Escherichia coli Heat-stable enterotoxin STab and heat-labile enterotoxin LT- 鈪,
本文編號:1588991
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