本文選題：自然殺傷細胞　切入點：Ⅲ型鼠肝炎病毒　出處：《華中科技大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的在HBV引起的人類暴發(fā)型肝衰竭(fulminant hepatic failure, FHF)及慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure, ACLF)中,NK細胞可以通過趨化因子/趨化因子受體的途徑向肝臟炎性中心募集,募集至肝臟的NK細胞發(fā)生活化并通過多種途徑導(dǎo)致肝細胞損傷。通過建立Ⅲ型鼠肝炎病毒(MHV-3)誘導(dǎo)的小鼠暴發(fā)性肝衰竭模型,對趨化因子受體CXCR3及其配體CXCL10在該募集活化過程中所起的作用進行研究,以期為人類病毒性暴發(fā)型肝衰竭及慢加急性肝衰竭中NK細胞的作用機制提供新的研究線索。 方法1.通過向Balb/cJ小鼠腹腔注射Ⅲ型鼠肝炎病毒(MHV-3)建立暴發(fā)型肝衰竭模型;2.利用Tranwell趨化試驗和流式細胞術(shù)分別檢測:①MHV-3感染36小時后肝細胞對各組織來源NK細胞的趨化能力;②經(jīng)CXCL10中和抗體阻斷后的MHV-3感染肝細胞對NK細胞的趨化能力;③正常肝細胞對個組織來源NK細胞的趨化能力;④人工重組鼠CXCL10蛋白對各組織來源NK細胞的趨化能力;3.利用流式細胞術(shù)檢測經(jīng)CXCL10刺激后NK細胞的表面活化標記分子CD69的表達水平;4.利用胞內(nèi)因子染色法,經(jīng)流式細胞術(shù)檢測CXCL10刺激后NK細胞IFNγ和TNFα的分泌水平。 結(jié)果1.在MHV-3誘導(dǎo)小鼠暴發(fā)性肝衰竭模型中,與陰性對照組相比,MHV-3感染36小時小鼠的肝細胞與人工重組鼠CXCL10蛋白在體外對脾臟、骨髓及外周血來源的小鼠NK細胞均具有顯著的趨化效果(P0.05),其中CXCL10蛋白的趨化能力遜于MHV-3感染36小時的小鼠肝細胞(P0.05);趨化因子CXCL10的單克隆中和抗體可在一定程度上阻斷MHV-3感染36小時小鼠肝細胞對NK細胞的趨化效果(P0.05);2.經(jīng)CXCL10蛋白體外刺激12小時后,小鼠NK細胞的表面活化標記CD69的表達水平及細胞因子IFNγ和TNFα的分泌水平同刺激前相比無顯著差異(P0. 05)。 結(jié)論1.趨化因子受體CXCR3及其配體CXCL10在小鼠暴發(fā)型肝衰竭模型中,對NK細胞向肝臟募集的過程中可能起到了部分但卻重要的作用;2.趨化因子CXCL10在體外對小鼠NK細胞的活化狀態(tài)和細胞因子的分泌能力沒有直接的調(diào)節(jié)作用。
[Abstract]:Objective in fulminant hepatic failure (FHFF) and acute acute liver failure (ACLF) induced by HBV, NK cells can be collected from the inflammatory center of the liver through chemokine / chemokine receptor pathway. NK cells that were recruited to the liver were activated and induced hepatocyte damage by various ways. The mouse model of fulminant liver failure induced by MHV-3 was established. The role of chemokine receptor CXCR3 and its ligand CXCL10 in the process of recruitment and activation was studied in order to provide new clues for the mechanism of NK cells in human fulminant liver failure and chronic and acute liver failure. Methods 1. The model of fulminant liver failure was established by intraperitoneal injection of murine hepatitis virus type 鈪，

本文編號：1581840