人惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞培養(yǎng)方法的研究及胸膜外動物模型的建立
發(fā)布時間:2018-03-05 10:19
本文選題:惡性胸膜間皮瘤 切入點(diǎn):細(xì)胞培養(yǎng) 出處:《昆明醫(yī)學(xué)院》2009年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】: 目的: 采用三種細(xì)胞培養(yǎng)方法,原代培養(yǎng)人惡性間皮瘤(Malignant PleuralMasothelioma,MPM)細(xì)胞,探討其生物學(xué)特性,比較三種培養(yǎng)方法之間的差異;建立惡性間皮瘤的小鼠移植瘤模型,分析其病理學(xué)特征,為人惡性胸膜間皮瘤的臨床研究和藥理學(xué)分析奠定基礎(chǔ)。 方法: 標(biāo)本源自昆明醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院胸外科、病理確診為惡性胸膜間皮瘤的患者。穿刺取得胸水標(biāo)本和胸膜標(biāo)本。胸水離心分離腫瘤細(xì)胞,進(jìn)行原代培養(yǎng)。實(shí)驗分別使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液、含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液和含10%胎牛血清的DMEM/F.12(1:1)培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)。 通過光鏡、倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài);繪制細(xì)胞生長曲線;計算倍增時間、分裂指數(shù):建立小鼠皮下移植瘤模型,電鏡下觀察移植瘤細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu),常規(guī)病理切片HE染色觀察其病理學(xué)特點(diǎn)。 結(jié)果: 1.胸水中成功分離出人惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞,在DMEM/F-12(1:1)完全培養(yǎng)液和DMEM完全培養(yǎng)液中生長良好,傳代穩(wěn)定。胸膜標(biāo)本中未分離出腫瘤細(xì)胞。 2.胸水來源實(shí)驗瘤細(xì)胞具有人惡性胸膜間皮瘤的細(xì)胞學(xué)特征及病理學(xué)特征:細(xì)胞呈短梭形、類多邊形和不規(guī)則形,細(xì)胞核質(zhì)比比較大;細(xì)胞貼壁能力差,重疊性生長較為明顯。 3.小鼠皮下移植瘤的病理形態(tài)與人惡性胸膜間皮瘤相同的病理學(xué)特征:瘤細(xì)胞大,不規(guī)則形,胞質(zhì)多,嗜酸性,核圓大且不規(guī)則,核分裂象多。 結(jié)論: 1.本實(shí)驗成功進(jìn)行人惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞的原代培養(yǎng)。 2.DMEM/F-12(1:1)完全培養(yǎng)液是胸水來源的人惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞的良好培養(yǎng)基。 3.成功建立人惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞的小鼠皮下移植瘤模型。 4.人惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞小鼠皮下移植瘤模型具有與人惡性胸膜間皮瘤相同的病理學(xué)特征。
[Abstract]:Objective:
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本文編號:1569827
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