本文關鍵詞： 早孕滋養(yǎng)細胞 原代培養(yǎng) 胎盤 人外周血淋巴細胞分離液 percoll密度梯度 差速 細胞角蛋白-　出處：《廣東醫(yī)學》2015年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的對4種建立滋養(yǎng)細胞的方法進行比較,以期尋求一種簡便高效的人早孕滋養(yǎng)細胞的體外培養(yǎng)方法,為相關研究提供基礎。方法早孕絨毛通過胰酶聯(lián)合膠原酶消化分離后,分別采用直接接種、差速貼壁聯(lián)合差速消化法、人外周血淋巴細胞分離液分離純化法、完整絨毛消化聯(lián)合簡化的percoll密度梯度分離法4種方法純化培養(yǎng),倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài),應用HE染色、免疫組化和免疫細胞化學法檢測細胞純度。結(jié)果直接接種、差速貼壁聯(lián)合差速消化法、人外周血淋巴細胞分離液分離純化法得到的細胞細胞角蛋白7(CK-7)表達陽性率不足60%;簡化的percoll密度梯度分離法得到的細胞CK-7表達陽性率達90%以上。結(jié)論完整絨毛消化聯(lián)合簡化的percoll密度梯度分離純化可以得到大量較高純度的滋養(yǎng)細胞以供后期實驗。
[Abstract]:Objective to compare four methods for the establishment of trophoblastic cells in order to find a simple and efficient method for the culture of human trophoblastic cells in early pregnancy in vitro, and to provide a basis for related studies. Methods the villi of early pregnancy were digested and separated by trypsin and collagenase. Methods: direct inoculation, differential adhesion combined with differential digestion, isolation and purification of human peripheral blood lymphocytes, complete villus digestion combined with simplified percoll density gradient method were used to purify and culture. The morphology of cells was observed by inverted microscope, and the purity of cells was detected by HE staining, immunohistochemistry and immunocytochemistry. The positive rate of cytokeratin 7 (CK-7) expression in human peripheral blood lymphocytes was less than 60%, and the positive rate of CK-7 expression in cells obtained by simplified percoll density gradient method was more than 90%. Combined with simplified percoll density gradient separation and purification, a large number of high purity trophoblastic cells can be obtained for later experiments.
【作者單位】： 承德醫(yī)學院藥理學教研室;承德醫(yī)學院病理學教研室;承德醫(yī)學院基礎研究所;
【基金】：2012年河北省科學技術研究與發(fā)展計劃(第五批)項目(編號:H2012406010) 河北省高等學校自然科學研究青年基金項目(編號:2010103)
【分類號】：R321

【參考文獻】

相關期刊論文 前5條

1 王云;李力;俞麗麗;顏耀華;王美;;一種簡便人絨毛滋養(yǎng)細胞體外原代培養(yǎng)方法的建立[J];重慶醫(yī)學;2006年08期

2 李幼飛;李力;俞麗麗;;早孕絨毛滋養(yǎng)層細胞體外培養(yǎng)方法的改良[J];重慶醫(yī)學;2007年14期

3 龔洵;喬福元;劉海意;王少帥;;人早孕絨毛滋養(yǎng)層細胞的體外分離與培養(yǎng)[J];華中醫(yī)學雜志;2007年06期

4 王海霞;李金枝;解其貴;楊瑜;董凌云;左緒磊;;滋養(yǎng)層細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];中國臨床醫(yī)學;2010年05期

5 張磊;門可;張景霞;徐德忠;閆永平;王安輝;邵中軍;盧娟;趙艷芳;;亞洲人早孕胎盤絨毛滋養(yǎng)細胞株的建立及其生物學特征研究[J];實用婦產(chǎn)科雜志;2006年04期

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 李永;尹芙蓉;;痰液脫落細胞學檢查在肺癌診斷中的價值[J];安徽衛(wèi)生職業(yè)技術學院學報;2006年01期

2 袁爍;鄧高丕;;化瘀消ve殺胚復方含藥血清對體外培養(yǎng)輸卵管妊娠滋養(yǎng)細胞凋亡的影響[J];中華中醫(yī)藥雜志;2012年04期

3 張小紅;李玉紅;;人早孕絨毛滋養(yǎng)層細胞原代培養(yǎng)的研究進展[J];承德醫(yī)學院學報;2009年04期

4 李幼飛;李力;俞麗麗;鄭英如;;細胞滋養(yǎng)細胞中DPPⅣ的表達及其與侵襲能力的關系[J];重慶醫(yī)學;2009年06期

5 龔嬋英;;手術標本管理的體會[J];當代護士(學術版);2006年02期

6 葛璞;車藝;林玲;黃開順;葉彬;;剛地弓形蟲ME49株對體外培養(yǎng)的小鼠胎盤滋養(yǎng)細胞凋亡的影響[J];第二軍醫(yī)大學學報;2010年05期

7 李珍,黃曉峰,王春梅,徐德忠,門可,王安輝,楊家驥,于華,陳丹,黃小軍,王爽;體外培養(yǎng)的人滋養(yǎng)層細胞的鑒定[J];第四軍醫(yī)大學學報;2005年14期

8 林可君;祁保民;尚迎輝;;施氏鱘胰腺分布的初步研究[J];淡水漁業(yè);2008年01期

9 許金俊;王小波;陶建平;許益民;王寶安;朱坤熹;;育成雞慢性雞白痢感染的病理學變化[J];動物醫(yī)學進展;2006年05期

10 付祥龍;張玉玲;翟小偉;陳曉麗;麻雪剛;靳麗君;劉鳳軍;;胎盤滋養(yǎng)層細胞分離培養(yǎng)研究進展[J];動物醫(yī)學進展;2012年03期

【二級參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 王云;李力;俞麗麗;顏耀華;王美;;一種簡便人絨毛滋養(yǎng)細胞體外原代培養(yǎng)方法的建立[J];重慶醫(yī)學;2006年08期

2 蔣立艷,李真,成婭,陳波潔,王智,林桂蘭,劉萍,楊合榮;早孕絨毛細胞滋養(yǎng)層細胞分離培養(yǎng)的實驗研究[J];第三軍醫(yī)大學學報;2004年14期

3 施瓊;朱旦;王箭;翁亞光;王應雄;蔡燕;蔣洪彥;徐遠久;;原代絨毛滋養(yǎng)層細胞的培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染研究[J];第三軍醫(yī)大學學報;2007年12期

4 王雪萍,徐德忠,李遠貴,閆永平,羅深秋;組織塊法培養(yǎng)人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞[J];第一軍醫(yī)大學學報;2001年01期

5 白菡;何麗霞;馬力;李穎;趙桂珍;;人早孕胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞體外培養(yǎng)模型的建立[J];中國組織化學與細胞化學雜志;2006年03期

6 龔洵;喬福元;劉海意;王少帥;;人早孕絨毛滋養(yǎng)層細胞的體外分離與培養(yǎng)[J];華中醫(yī)學雜志;2007年06期

7 李榮皓,莊臨之;人胎盤的生殖內(nèi)分泌學研究——Ⅰ.人細胞滋養(yǎng)層細胞的無血清培養(yǎng)與生長因子的作用[J];中國科學(B輯 化學 生命科學 地學);1990年09期

8 徐昌芬,盧小東,周亞東,焦中秀,祝輝,朱啟錠;人早孕絨毛滋養(yǎng)層細胞的分離純化及馬鞭草抗早孕機理的初步研究[J];解剖學雜志;1999年02期

9 陳曉端,趙承洛,張義龍,王國萍;超常胎盤部位的病理形態(tài)與免疫組化研究[J];臨床與實驗病理學雜志;1999年05期

10 張磊;門可;張景霞;徐德忠;閆永平;王安輝;邵中軍;盧娟;趙艷芳;;亞洲人早孕胎盤絨毛滋養(yǎng)細胞株的建立及其生物學特征研究[J];實用婦產(chǎn)科雜志;2006年04期

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 徐文漭,羅克樞,汪盛賢,潘傳敬;宮外轉(zhuǎn)移性滋養(yǎng)細胞腫瘤病理分析[J];西南軍醫(yī);2005年01期

2 李丹妮;吳婷;鄒黎明;;Annexin V-FITC/PI法檢測脂多糖誘導滋養(yǎng)細胞的凋亡[J];沈陽醫(yī)學院學報;2008年03期

3 章漢旺;馬文紅;李堅雄;;胰島素生長因子Ⅱ促進人早孕滋養(yǎng)細胞的遷移和侵襲[J];中國婦幼保健;2009年05期

4 張妍;葉元華;彭偉;詹瑛;;氧化低密度脂蛋白及其受體對滋養(yǎng)細胞凋亡的影響[J];現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展;2009年12期

5 林梅清;何曉薇;古艷;黃偉華;;超聲診斷滋養(yǎng)細胞疾患32例[J];臨床合理用藥雜志;2010年16期

6 商恩榮;吳繼寧;唐步堅;許代娣;黃萬珠;;滋養(yǎng)細胞瘤患者及其丈夫的外周血淋巴細胞染色體觀察[J];廣西醫(yī)學院學報;1986年01期

7 章正廣，高秀榮，肖艷君;超聲在滋養(yǎng)細胞疾病診療中的應用[J];中國超聲醫(yī)學雜志;1995年06期

8 鄭頌國，許良中;滋養(yǎng)細胞及其腫瘤的單克隆抗體研究進展[J];腫瘤;1995年02期

9 賈莉婷,張洛英,劉銳娟;滋養(yǎng)細胞腫瘤患者血清可溶性白細胞介素-2受體測定[J];河南醫(yī)科大學學報;1998年03期

10 Hassadia A.;Gillespie A.;Tidy J.;B. Hancock;李奎;;胎盤部位滋養(yǎng)細胞腫瘤的臨床特點及治療[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(婦產(chǎn)科學分冊);2006年03期

相關會議論文 前10條

1 白懷;劉興會;范平;張娟;羅薛峰;;微電場影響滋養(yǎng)細胞遷移行為及機制[A];中華醫(yī)學會第三次全國妊娠期高血壓疾病學術研討會論文匯編[C];2011年

2 張瑞祥;劉勝;韓麗;馬衛(wèi)軍;王峰;齊潔敏;鄭紀寧;洪淑英;劉樹森;;“中間型”滋養(yǎng)細胞的超微結(jié)構與免疫組化[A];第八次全國電子顯微學會議論文摘要集（Ⅰ）[C];1994年

3 王及氓;王莉;姚元慶;;人白細胞抗原-G對滋養(yǎng)細胞遷移的作用研究[A];中華醫(yī)學會第十次全國婦產(chǎn)科學術會議產(chǎn)科會場（產(chǎn)科學組、妊高癥學組）論文匯編[C];2012年

4 郭培奮;賀銀燕;李大金;;人早孕滋養(yǎng)細胞表達胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素及其受體[A];第一屆中華醫(yī)學會生殖醫(yī)學分會、中國動物學會生殖生物學分會聯(lián)合年會論文匯編[C];2007年

5 周曉宇;劉霞;金小英;彭華;李琦偉;鐘少平;鄒麗;;血清剝奪對滋養(yǎng)細胞生物行為的影響及其機制研究[A];2011年浙江省婦產(chǎn)科學學術年會暨“婦產(chǎn)科常見疾病的臨床研究新進展”學習班論文匯編[C];2011年

6 張弘;林其德;;妊娠高血壓綜合征患者滋養(yǎng)細胞浸潤相關基因及其蛋白表達[A];澳門、香港、內(nèi)地生殖健康研討會論文集[C];2004年

7 周純芝;楊通明;唐石初;吳澤惠;劉世平;彭季蘭;程智;;彩色多普勒血流顯像對滋養(yǎng)細胞腫瘤化療前后應用研究[A];中華醫(yī)學會第六次全國超聲醫(yī)學學術年會論文匯編[C];2001年

8 黃煜;李大金;;趨化因子CXCL16對早孕期人滋養(yǎng)細胞生物學功能的自分泌調(diào)控作用[A];首屆滬浙婦產(chǎn)科學術論壇暨2006年浙江省婦產(chǎn)科學學術年會論文匯編[C];2006年

9 董e，

本文編號：1551658