結(jié)核桿菌CFP10和ESAT6真核表達(dá)載體雙轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞的觀察
本文關(guān)鍵詞: 結(jié)核桿菌 真核細(xì)胞 CFP- ESAT- 出處:《石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2015年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:為了構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌兩個(gè)毒力因子CFP-10基因和ESAT-6基因共同表達(dá)的真核細(xì)胞模型,本實(shí)驗(yàn)采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法,將重組表達(dá)載體CFP-10-PDs Red1-N1和ESAT-6-PEGFP-N1同時(shí)轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞293FT,通過(guò)倒置熒光顯微鏡和激光共聚焦觀察,并經(jīng)western blot檢測(cè)分析。結(jié)果顯示,經(jīng)雙轉(zhuǎn)染的293FT細(xì)胞能夠分別發(fā)出紅色和綠色熒光,既能表達(dá)CFP-10,又能表達(dá)ESAT-6,且表達(dá)的蛋白分布于細(xì)胞質(zhì)中,表明模型構(gòu)建成功。由此可知,構(gòu)建的這個(gè)細(xì)胞模型為進(jìn)一步研究這兩種毒力因子在宿主細(xì)胞中的作用機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to construct eukaryotic cell model of co-expression of CFP-10 gene and ESAT-6 gene of two virulence factors of Mycobacterium tuberculosis, liposome transfection method was used in this study. The recombinant expression vectors CFP-10-PDs Red1-N1 and ESAT-6-PEGFP-N1 were transfected into eukaryotic cells 293FT at the same time. The cells were observed by inverted fluorescence microscope and confocal laser, and detected by western blot. The results showed that 293FT cells with double transfection could emit red and green fluorescence, respectively. Both CFP-10 and ESAT-6 can be expressed, and the expressed protein is distributed in the cytoplasm, which indicates that the model has been successfully constructed. Therefore, this cell model lays a foundation for further study of the mechanism of these two virulence factors in host cells.
【作者單位】: 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室/新疆地方與民族高發(fā)病教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院骨科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31060333) 石河子大學(xué)高層次人才科研啟動(dòng)資金專項(xiàng)(RCZX201027)
【分類號(hào)】:R378.911
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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6 侯旭暉;轉(zhuǎn)染siRNA特異性下調(diào)PAI基因表達(dá)抗血栓形成作用機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2008年
相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條
1 趙玉瑜;含羥基的陽(yáng)離子聚合物的合成及其基因傳遞性能的研究[D];南京理工大學(xué);2013年
2 于建寧;脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染小鼠體細(xì)胞的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年
3 張h,
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