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結(jié)核桿菌CFP10和ESAT6真核表達(dá)載體雙轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞的觀察

發(fā)布時間:2018-02-28 04:42

  本文關(guān)鍵詞: 結(jié)核桿菌 真核細(xì)胞 CFP- ESAT- 出處:《石河子大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)》2015年01期  論文類型:期刊論文


【摘要】:為了構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌兩個毒力因子CFP-10基因和ESAT-6基因共同表達(dá)的真核細(xì)胞模型,本實驗采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法,將重組表達(dá)載體CFP-10-PDs Red1-N1和ESAT-6-PEGFP-N1同時轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞293FT,通過倒置熒光顯微鏡和激光共聚焦觀察,并經(jīng)western blot檢測分析。結(jié)果顯示,經(jīng)雙轉(zhuǎn)染的293FT細(xì)胞能夠分別發(fā)出紅色和綠色熒光,既能表達(dá)CFP-10,又能表達(dá)ESAT-6,且表達(dá)的蛋白分布于細(xì)胞質(zhì)中,表明模型構(gòu)建成功。由此可知,構(gòu)建的這個細(xì)胞模型為進(jìn)一步研究這兩種毒力因子在宿主細(xì)胞中的作用機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to construct eukaryotic cell model of co-expression of CFP-10 gene and ESAT-6 gene of two virulence factors of Mycobacterium tuberculosis, liposome transfection method was used in this study. The recombinant expression vectors CFP-10-PDs Red1-N1 and ESAT-6-PEGFP-N1 were transfected into eukaryotic cells 293FT at the same time. The cells were observed by inverted fluorescence microscope and confocal laser, and detected by western blot. The results showed that 293FT cells with double transfection could emit red and green fluorescence, respectively. Both CFP-10 and ESAT-6 can be expressed, and the expressed protein is distributed in the cytoplasm, which indicates that the model has been successfully constructed. Therefore, this cell model lays a foundation for further study of the mechanism of these two virulence factors in host cells.
【作者單位】: 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室/新疆地方與民族高發(fā)病教育部重點實驗室;石河子大學(xué)動物科技學(xué)院;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院骨科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(31060333) 石河子大學(xué)高層次人才科研啟動資金專項(RCZX201027)
【分類號】:R378.911

【參考文獻(xiàn)】

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3 張h,

本文編號:1545805


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