發(fā)布時(shí)間：2018-02-24 20:52

  本文關(guān)鍵詞： 長(zhǎng)耳兔 局部免疫 凝膠 血常規(guī) T細(xì)胞亞群 γ-干擾素 病理分析　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2008年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 目的:利用長(zhǎng)耳兔模型觀察已選定的三種單純凝膠介質(zhì)的可溶性、滲透性以及吸收和安全情況,對(duì)其可否在臨床中經(jīng)支氣管鏡局部應(yīng)用做出初步評(píng)估。觀察含M-母牛分枝桿菌疫苗免疫蛋白凝膠的吸收和安全情況并對(duì)注射適宜劑量和不良反應(yīng)進(jìn)行分析,著重對(duì)含M-母牛分枝桿菌疫苗免疫蛋白凝膠在局部及全身產(chǎn)生的免疫應(yīng)答效果進(jìn)行探討,從而為今后開發(fā)可應(yīng)用于臨床的結(jié)核病的局部免疫治療提供依據(jù)。 方法:將45只日本長(zhǎng)耳兔按照隨機(jī)分組法進(jìn)行分組,首先分為兩大組,凝膠實(shí)驗(yàn)組20只,免疫刺激組25只。將凝膠實(shí)驗(yàn)組按照隨機(jī)分組法分為4組,每組5只日本長(zhǎng)耳兔。進(jìn)行下列處置:(1)對(duì)照組,不進(jìn)行任何處理;(2)單純a-凝膠組,經(jīng)支氣管鏡于日本長(zhǎng)耳兔左肺注入單純a-凝膠2.5ml;(3)單純g-凝膠組,經(jīng)支氣管鏡于日本長(zhǎng)耳兔左肺注入單純g-凝膠2.5ml;(4)單純k-凝膠組,經(jīng)支氣管鏡于日本長(zhǎng)耳兔左肺注入單純k-凝膠2.5ml。以上各組每日記錄體溫變化,觀察飲食、活動(dòng)性、對(duì)外界刺激的反應(yīng)、糞便顏色等一般情況,測(cè)量注入凝膠前及處死前體重,檢測(cè)注入凝膠前及處死前血常規(guī)、T細(xì)胞亞群,注入凝膠一周后處死解剖,同時(shí)觀察日本長(zhǎng)耳兔內(nèi)臟特別是肺臟情況,選取凝膠注入部位肺組織進(jìn)行病理檢查。將免疫刺激組按照隨機(jī)分組法分為5組,每組5只日本長(zhǎng)耳兔。進(jìn)行下列處置:(1)第1組,即對(duì)照組,經(jīng)支氣管鏡于日本長(zhǎng)耳兔左肺注入生理鹽水3ml,每周一次,共四周;(2)第2組,經(jīng)支氣管鏡于日本長(zhǎng)耳兔左肺注入k-凝膠(2.5ml)與以少量注射用水(0.5ml)溶解的M-母牛分枝桿菌疫苗免疫蛋白粉劑(5.63μg)的混合液3ml,每周一次,共四周;(3)第3組,經(jīng)支氣管鏡于日本長(zhǎng)耳兔左肺注入k-凝膠(2.5ml)與以少量注射用水(0.5ml)溶解的M-母牛分枝桿菌疫苗免疫蛋白粉劑(11.25μg)的混合液3ml,每周一次,共四周;(4)第4組,經(jīng)支氣管鏡于日本長(zhǎng)耳兔左肺注入k-凝膠(2.5ml)與以少量注射用水(0.5ml)溶解的M-母牛分枝桿菌疫苗免疫蛋白粉劑(22.50μg)的混合液3ml,每周一次,共四周;(5)第5組,經(jīng)支氣管鏡于日本長(zhǎng)耳兔左肺注入k-凝膠(2.5ml)與以少量注射用水(0.5ml)溶解的M-母牛分枝桿菌疫苗免疫蛋白粉劑(28.13μg)的混合液3ml,每周一次,共四周。其中,第2組、第3組、第4組、第5組屬于免疫攻擊組。以上各組每日記錄體溫變化,觀察飲食、活動(dòng)性、對(duì)外界刺激的反應(yīng)、糞便顏色等一般情況,每周測(cè)量體重;在每次注入24小時(shí)后檢測(cè)血常規(guī);檢測(cè)刺激前及刺激后外周血T細(xì)胞亞群、外周血中γ-干擾素含量;四周后處死解剖,觀察日本長(zhǎng)耳兔內(nèi)臟特別是肺臟情況,以生理鹽水灌洗肺泡,收集灌洗液后送免疫實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)γ-干擾素,并將部分肺組織研磨,收集研磨后混漿送免疫實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)γ-干擾素,選取注入部位肺組織進(jìn)行病理檢查。 結(jié)果:1凝膠實(shí)驗(yàn)組:單純a-凝膠組、單純g-凝膠組及單純k-凝膠組與對(duì)照組體溫、體重、血常規(guī),外周血T細(xì)胞亞群相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。單純a-凝膠組、單純g-凝膠組及單純k-凝膠組各組內(nèi)凝膠注入前與處死解剖前CD3、CD4、CD8百分比相比差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。單純a-凝膠組、單純g-凝膠組及單純k-凝膠組與對(duì)照組光鏡病理觀察相比細(xì)支氣管未發(fā)生明顯變化,肺泡結(jié)構(gòu)完整,間隔未見增厚及炎細(xì)胞浸潤(rùn)。 2免疫刺激組:第2、3、4、5組與第1組體溫、體重以及血液中紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白量等血常規(guī)指標(biāo)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);第4、5組與第1組外周血CD3、CD4百分比相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),第4、5組外周血CD3、CD4百分比較第1組增高;第3、4、5組與第1組外周血CD8百分比相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),第3、4、5組外周血CD8百分比較第1組降低。第4、5組刺激后肺組織研磨混漿中的γ-干擾素含量升高。光鏡病理學(xué)檢查第4、5組與第1組相比細(xì)支氣管未發(fā)生明顯變化,肺泡結(jié)構(gòu)基本保持完整,間隔輕度增寬,間隔內(nèi)可見淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。 結(jié)論:1 a-凝膠、g-凝膠和k-凝膠都具有很好的滲透性、流動(dòng)性、粘附性和可溶性并且能夠與M-母牛分枝桿菌疫苗免疫蛋白充分均勻混合。 2 a-凝膠、g-凝膠和k-凝膠是安全可靠的,并且肺組織易于吸收,皆可作為在臨床中經(jīng)支氣管鏡局部應(yīng)用的備選凝膠。 3 k-凝膠可作為溶解介質(zhì)使免疫蛋白制劑在局部被吸收并引起局部的免疫應(yīng)答反應(yīng)而且安全情況良好。 4以健康日本長(zhǎng)耳兔為模型局部免疫刺激可以引起全身免疫應(yīng)答反應(yīng)。
[Abstract]:Objective : To observe the solubility , permeability and absorption and safety of three kinds of gel media selected by using long - ear rabbit model , and to make a preliminary assessment of whether it can be used in clinic . Methods : 45 Japanese long ear rabbits were divided into two groups according to the random grouping method . Group 2 , Group 3 , Group 4 , Group 5 belong to the group of immune attack . The group 2 , Group 3 , Group 4 , Group 5 belong to the group of immune attack . The group 2 , Group 3 , Group 4 , Group 5 belong to the immune attack group . Results : Compared with control group , there was no significant difference between group A - gel group , simple g - gel group and simple k - gel group ( P0.05 ) . Compared with control group , there was no significant difference in the percentage of CD3 , CD4 and CD8 before and after injection of simple a - gel group , simple g - gel group and simple k - gel group . There was no significant difference between groups 2 , 3 , 4 , 5 and group 1 . The percentages of CD3 and CD4 in peripheral blood of group 4 and 5 were significantly higher than those in Group 1 ( P0.05 ) . The percentages of CD3 and CD4 in peripheral blood of group 4 and 5 were higher than those in Group 1 . Conclusion : 1 a - gel , g - gel and k - gel have good permeability , fluidity , adhesion and solubility , and can be mixed well with M - cow mycobacterial vaccine immune protein . 2 a - gel , g - gel , and k - gel are safe and reliable , and lung tissue is readily absorbed as an alternative gel for topical application in clinic . The 3 - k - gel can be used as a dissolution medium to allow the immune protein formulation to be locally absorbed and cause localized immune response , and the safety condition is good . 4 . The local immune stimulation of healthy Japanese long ear rabbits can cause systemic immune response .

【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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1 廖錦良,陳洪光;肺結(jié)核患者T淋巴細(xì)胞亞群和自然殺傷細(xì)胞的觀察[J];廣州醫(yī)藥;1999年06期

2 肖，

本文編號(hào)：1531682