降鈣素對大鼠顱骨成骨細胞調(diào)控作用的體外觀察
本文關(guān)鍵詞: 骨折 降鈣素 成骨細胞分化 蛋白激酶類 轉(zhuǎn)錄因子 細胞外信號調(diào)節(jié)激酶 核心結(jié)合因子 促分裂原活化蛋白激酶 信號通路 抑制劑 出處:《中國組織工程研究與臨床康復》2009年02期 論文類型:期刊論文
【摘要】:背景:降鈣素是強有力的破骨細胞抑制劑,可直接、快速而廣泛地抑制骨吸收,近年來有學者報道其有促進骨折愈合的功能,推測降鈣素對成骨細胞也有直接的作用。目的:體外觀察降鈣素對大鼠成骨細胞的藥理作用,分析其是否通過細胞外信號調(diào)節(jié)激酶信號通路產(chǎn)生。設(shè)計、時間及地點:分組對照觀察,于2007-06/2008-05在南京醫(yī)科大學藥理學實驗室完成。材料:選用新生SD大鼠,分離培養(yǎng)顱骨成骨細胞。方法:取第2代成骨細胞進行分組實驗:0.01μg/L降鈣素組、0.1μg/L降鈣素組、1μg/L降鈣素組分別加入不同劑量降鈣素進行干預,U0126+1μg/L降鈣素組提前30min加入100μmol/L的細胞外信號調(diào)節(jié)激酶抑制劑U0126,并設(shè)空白對照組。主要觀察指標:通過四甲基偶氮唑鹽比色法、對硝基苯磷酸鹽法和鈣結(jié)節(jié)茜素紅染色法分別檢測降鈣素對成骨細胞的增殖、分化、礦化能力的影響;應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)檢測促骨形成關(guān)鍵基因核心結(jié)合因子a1mRNA的表達情況;應(yīng)用WesternBlotting技術(shù)檢測磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2蛋白表達情況。結(jié)果:加入0.01,0.1,1μg/L的降鈣素干預后,成骨細胞的增殖、分化、礦化能力以及核心結(jié)合因子a1mRNA的表達均隨降鈣素劑量增加而增強,且0.1,1μg/L組與空白對照組比較差異具有顯著意義(P0.05~0.01);此外降鈣素促進了磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2蛋白的表達(P0.05)。U0126可阻斷以上所有效應(yīng)(P0.05~0.01)。結(jié)論:降鈣素可能通過細胞外信號調(diào)節(jié)激酶信號通路調(diào)控促骨形成關(guān)鍵基因核心結(jié)合因子a1mRNA的表達,進而促進成骨細胞的增殖、分化、礦化能力。
[Abstract]:Background: calcitonin is a powerful osteoclast inhibitor that can inhibit bone resorption directly, quickly and extensively. In recent years, it has been reported that calcitonin can promote fracture healing. Objective: to observe the pharmacological effect of calcitonin on rat osteoblasts in vitro and analyze whether calcitonin regulates the production of kinase signal pathway by extracellular signal. Time and place: group controlled observation, completed in the Laboratory of Pharmacology, Nanjing Medical University, 2007-06 / 2008-05. Materials: newborn SD rats, Methods: the osteoblasts of the second passage of calcitonin group were divided into 0. 1 渭 g / L calcitonin group and 1 渭 g / L calcitonin group. U0126, an extracellular signal-regulated kinase inhibitor, and set up a blank control group. Main outcome measures: tetramethylazolium colorimetry, The effects of calcitonin on the proliferation, differentiation and mineralization of osteoblasts were detected by p-nitrophenyl phosphate method and alizarin red staining. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect the expression of core binding factor A1 mRNA. WesternBlotting technique was used to detect the expression of extracellular signal-regulated kinase 1/2. Results: osteoblasts proliferated and differentiated after the intervention of 0.01 渭 g / L calcitonin. The mineralization ability and the expression of core binding factor A1 mRNA increased with the increase of calcitonin dose. In addition, calcitonin promoted the expression of extracellular signal-regulated kinase 1/2 protein (P0.05N. U0126). Conclusion: calcitonin may pass through the extracellular pathway. Signal regulated kinase signaling pathway regulates the expression of core binding factor A1 mRNA, which is a key gene for bone formation. And then promote the proliferation, differentiation and mineralization of osteoblasts.
【作者單位】: 南京醫(yī)科大學附屬南京兒童醫(yī)院;
【分類號】:R96
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【共引文獻】
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本文編號:1527884
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