小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的體外誘導(dǎo)分化
本文關(guān)鍵詞: 小鼠 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng) 成軟骨誘導(dǎo) 成脂誘導(dǎo) 成骨誘導(dǎo) 出處:《中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)報(bào)》2015年06期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的分離擴(kuò)增小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(mouse umbilical cord mesenchymal stem cells,m UCMSCs)探討其是否可誘導(dǎo)成軟骨、脂肪和成骨細(xì)胞。方法通過貼壁培養(yǎng)法將m UCMSCs體外分離、擴(kuò)增、純化,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)特征,運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測分析細(xì)胞的抗原標(biāo)志表達(dá)進(jìn)行鑒定。運(yùn)用誘導(dǎo)培養(yǎng)液對分離的m UCMSCs分別定向誘導(dǎo)培養(yǎng)為軟骨、脂肪和成骨細(xì)胞。結(jié)果運(yùn)用組織貼塊培養(yǎng)法可從新鮮臍帶中分離到貼壁生長的成纖維樣細(xì)胞,這些細(xì)胞高表達(dá)CD29、CD90和CD105,低表達(dá)CD34。成軟骨誘導(dǎo)后阿新蘭染色呈藍(lán)色;成脂誘導(dǎo)后油紅O染色,出現(xiàn)紅色脂滴;茜紅素染色成骨誘導(dǎo)的m UCMSC,可見紅色結(jié)節(jié)。結(jié)論貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)所獲得的m UCMSCs在體外可誘導(dǎo)分化為軟骨、脂肪和成骨細(xì)胞。
[Abstract]:Objective to isolate and amplify murine umbilical cord mesenchymal stem cells (umbilical cord mesenchymal stem cells) to investigate whether they can be induced into cartilage, fat and osteoblasts. Methods m UCMSCs was isolated, amplified and purified by adherent culture in vitro. The morphological characteristics of the cells were observed under inverted microscope, and the expression of antigen markers was identified by flow cytometry. The isolated m UCMSCs was induced into cartilage by induction culture medium. Results Fibroblast-like cells were isolated from fresh umbilical cord by tissue patch culture. These cells expressed CD29 CD90 and CD105highly, and CD34. the staining of acinylum was blue after chondrogenic induction. After lipogenic induction, red lipid droplets appeared in oil red O staining, and reddish nodules were observed in osteoblast-induced mUCMSCs by hematoxylin staining. Conclusion the m UCMSCs obtained by adherent culture can induce differentiation into cartilage, fat and osteoblasts in vitro.
【作者單位】: 成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院云南省干細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)室;昆明醫(yī)科大學(xué)昆明總醫(yī)院臨床學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心;
【基金】:云南省基金項(xiàng)目(2011HB050,2013DA004) 十二五重大項(xiàng)目(2011ZXJ09201-031) 國家自然科學(xué)基金(31272385) 北京市自然科學(xué)基金(5152023)
【分類號】:R329.2
【二級參考文獻(xiàn)】
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,本文編號:1526931
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