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3T3-L1細胞與人骨髓間充質(zhì)干細胞體外成脂及脂肪細胞功能的比較研究

發(fā)布時間:2018-02-16 12:10

  本文關鍵詞: T-L細胞 人骨髓間充質(zhì)干細胞 成脂分化 出處:《中國實驗血液學雜志》2015年06期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的:探討3T3-L1細胞與人骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)體外成脂及脂肪細胞功能的差異。方法:用密度梯度離心和貼壁培養(yǎng)的方法分離純化人骨髓MSC,在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),體外向脂肪方向誘導分化,并通過油紅O染色和吸光度值(OD值)檢測其分化程度;qRT-PCR檢測過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)、脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)、CCAAT增強子結(jié)合蛋白(C/EBPα)mRNA表達水平;通過誘導的脂肪細胞與THP-1細胞共培養(yǎng),加入1μg/ml的阿糖胞苷,在48 h測定其對腫瘤細胞的化療抵抗作用。結(jié)果:通過油紅O染色和測定吸光度值發(fā)現(xiàn),3T3-L1細胞組脂質(zhì)聚集量多于MSC組,且OD值大于MSC組(P0.05);qRTPCR結(jié)果顯示,3T3-L1來源的脂肪細胞的成脂基因PPARγ、FABP4和C/EBPαmRNA的相對表達量高于人骨髓MSC的脂肪細胞(P0.05);共培養(yǎng)實驗結(jié)果表明,含脂肪細胞組THP-1細胞存活數(shù)較對照組多(P0.05),且3T3-L1細胞組與MSC組之間具有統(tǒng)計學差異(P0.05)。結(jié)論:3T3-L1細胞的體外成脂能力比人骨髓MSC強;脂肪細胞具有促使THP-1細胞耐受化療的作用,且在3T3-L1細胞組的作用大于人骨髓MSC組。
[Abstract]:Objective: to investigate the difference between 3T3-L1 cells and human bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) in adipogenesis and adipocytes in vitro. Methods: human bone marrow MSCs were isolated and purified by density gradient centrifugation and adherent culture, and the morphology of MSCs was observed under inverted microscope. Differentiation was induced to fat in vitro. The differentiation degree was detected by oil red O staining and OD value. The expression of peroxisome proliferator activated receptor (PPAR 緯) and fatty acid binding protein (FABP4) CCAAT enhancer protein (C / EBP 偽) were detected by qRT-PCR. After co-culture of adipocytes and THP-1 cells, 1 渭 g / ml cytarabine was added. Results: oil red O staining and absorbance measurement showed that the accumulation of lipid in the T3-L1 cell group was higher than that in the MSC group. The OD value was higher than that in MSC group. The results of RT-PCR showed that the relative expression levels of PPAR 緯 -FABP4 and C / EBP 偽 mRNA in adipocytes derived from 3T3-L1 were higher than those in human bone marrow MSC, and the results of co-culture showed that the relative expression of FABP4 and C / EBP 偽 mRNA in adipocytes derived from human bone marrow MSC was higher than that in human bone marrow MSC. The survival number of THP-1 cells in adipocyte group was more than that in control group, and there was statistical difference between 3T3-L1 cell group and MSC group. Conclusion the fat-forming ability of THP-1 cells in vitro is stronger than that of human bone marrow MSC, and adipocytes can promote the tolerance of THP-1 cells to chemotherapy. The effect of 3 T 3 L 1 cell group was greater than that of human bone marrow MSC group.
【作者單位】: 蘇州大學醫(yī)學部;上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院血液科;
【基金】:國家自然科學基金面上項目(81170507) 科技部重大儀器專項子課題(2013YQ03065109) 上海市科委項目(14142200702);上海市科委項目子課題(13DZ2293702)
【分類號】:R329.28

【參考文獻】

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