發(fā)布時間：2018-02-14 01:59

  本文關(guān)鍵詞： SFV RNA復(fù)制子 核酸疫苗 構(gòu)建 抑瘤作用　出處：《長春理工大學(xué)》2008年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 本研究構(gòu)建了兩種含塞姆利基森林病毒(semliki forest virus,SFV) RNA復(fù)制子的核酸疫苗pIRSFV-HN和pIRSFV-Apoptin,限制性酶切鑒定正確。采用RT-PCR、Western blotting和IFA檢測了外源基因在HepG-2腫瘤細(xì)胞內(nèi)的表達,結(jié)果顯示外源基因可以在HepG-2腫瘤細(xì)胞中有效表達。采用AO/EB染色、DAPI染色和MTT染色方法研究其體外抑瘤作用,結(jié)果表明pIRSFV-HN和pIRSFV-Apoptin能夠有效殺傷HepG-2腫瘤細(xì)胞,最大殺傷率分別為55.43%和53.55%。本研究復(fù)制了C57BL/6小鼠荷H22腫瘤模型,瘤內(nèi)注射pIRSFV-HN和pIRSFV-Apoptin,通過檢測特異性CTL活性和T細(xì)胞亞類研究其體內(nèi)抑瘤作用,結(jié)果表明pIRSFV-HN和pIRSFV-Apoptin可以誘導(dǎo)較強的CTL反應(yīng),并促使細(xì)胞免疫趨向Th1優(yōu)勢。
[Abstract]:This research constructs containing two kinds of Semliki Forest virus (Semliki forest, virus, SFV) RNA replicon based nucleic acid vaccine pIRSFV-HN and pIRSFV-Apoptin restriction enzyme digestion. The RT-PCR, Western blotting and IFA to detect the expression of exogenous gene in HepG-2 tumor cells, results showed that the exogenous gene can be effectively expressed in HepG-2 tumor cells. Using AO/EB staining, DAPI staining and MTT staining method to study its antitumor effect in vitro, the results showed that pIRSFV-HN and pIRSFV-Apoptin can effectively kill HepG-2 tumor cells, the maximum killing rate was 55.43% and 53.55%. respectively this study replicated the C57BL/6 mice bearing H22 tumor model, intratumoral injection of pIRSFV-HN and pIRSFV-Apoptin, through the detection of specific CTL activity and T cell subsets of the in vivo antitumor effect, the results showed that pIRSFV-HN and pIRSFV-Apoptin can induce strong CTL responses, and promote Cell immunization tends to Th1 advantage.

【學(xué)位授予單位】：長春理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R392

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 龔偉,薛立娟,孫大輝,王宏偉,葛濤,羅琴芳,李萍,金寧一;pIRVP3/pIRHNVP3核酸表達質(zhì)粒的構(gòu)建及對腫瘤細(xì)胞的影響[J];免疫學(xué)雜志;2002年01期

2 米志強,金寧一,龔偉,薛立娟,連海,解麗華,李萍;pVVP3和pVHN核酸疫苗的構(gòu)建、表達及對腫瘤細(xì)胞的作用[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2003年06期

3 米志強,金寧一,龔偉,薛立娟,孫大輝,葛濤,連海,解麗華;新城疫病毒HN基因構(gòu)建的核酸疫苗抗腫瘤作用研究[J];中國腫瘤生物治療雜志;2003年02期

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本文編號：1509616