本文關(guān)鍵詞： 骨髓基質(zhì)細(xì)胞 衰老 氧化應(yīng)激　出處：《中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志》2015年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的建立體外骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cells,BMSSCs)衰老模型,分析衰老BMSCs生物學(xué)特性,為進(jìn)一步研究衰老BMCs對(duì)造血細(xì)胞的影響奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法雄性健康SD大鼠BMSCs全骨髓貼壁法體外培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組和衰老模型組。對(duì)照組為常規(guī)培養(yǎng)48h;衰老模型組為常規(guī)培養(yǎng)基內(nèi)加入D-半乳糖。CCK-8法測(cè)定BMSCs增殖能力;流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期;衰老特異性β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色觀察衰老BMSCs百分率;酶學(xué)法檢測(cè)BMSCs內(nèi)過(guò)氧化物丙二醛(MDA)含量和總超氧化物歧化酶(SOD)活性,DCFH-DA流式熒光檢測(cè)BMSCs活性氧簇(ROS)水平;Western Blotting檢測(cè)BMSCs衰老相關(guān)信號(hào)蛋白P16、P21、P53的水平;ELISA檢測(cè)BMSCs培養(yǎng)上清液中IL-1β、GM-CSF、SCF的含量。結(jié)果與對(duì)照組相比,衰老模型組BMSCs增殖能力顯著下降;處于G1期的BMSCs比例增高、S期細(xì)胞比例降低,細(xì)胞阻滯于G1期;BMSCs SA-β-Gal染色陽(yáng)性率顯著上升;胞內(nèi)ROS、MDA含量上升,SOD含量下降;P16、P21、P53水平明顯上調(diào);BMSCs培養(yǎng)上清液中IL-1β、GM-CSF、SCF含量明顯下降。結(jié)論 D-半乳糖誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞衰老可能與氧化損傷激活衰老相關(guān)信號(hào)通路有關(guān),衰老骨髓基質(zhì)細(xì)胞分泌活性造血生長(zhǎng)因子減少。
[Abstract]:Objective to establish bone marrow stromal cells in vitro (bone marrow stromal cells, BMSSCs) aging model, analysis of biological characteristics of aging BMSCs, which laid a foundation for further study of aging effect of BMCs on hematopoietic cells. Methods BMSCs male healthy SD rats by whole bone marrow adherent method in vitro culture, the experiment was divided into control group and aging model control group. Group of cultured 48h; aging model group for the determination of the proliferation ability of conventional BMSCs medium with D- galactose.CCK-8 method; cell cycle analysis by flow cytometry; senescence specific beta galactosidase (SA- beta -Gal) staining was observed in senescent BMSCs percentage; enzymatic method in detection of BMSCs malondialdehyde (MDA) content and total superoxide dismutase (SOD) activity, DCFH-DA, flow cytometry and fluorescence detection of BMSCs reactive oxygen species (ROS) level; Western Blotting detection of BMSCs senescence related signal protein P16, P21, P53; ELISA BMSC S in supernatant of IL-1 beta, GM-CSF, SCF respectively. Results compared with the control group, aging model group BMSCs proliferation decreased significantly; at the time of G1 BMSCs ratio increased, the proportion of cells in S phase decreased, cells in G1 phase increased significantly; the positive rate of BMSCs SA- beta -Gal staining; intracellular ROS, MDA content increased, SOD content decreased; P16, P21, P53 level was significantly increased; BMSCs in supernatant of IL-1 beta, GM-CSF, SCF content decreased significantly. Conclusion D- galactose induced aging and oxidative damage of bone marrow stromal cells may activate the aging related signaling pathways related to aging of bone marrow stromal cells secreting hematopoietic growth factor reduced.

【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)干細(xì)胞與組織工程研究室;重慶醫(yī)科大學(xué)組織胚胎學(xué)教研室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81173398) 重慶市科委基礎(chǔ)與前沿研究項(xiàng)目(cstc2014jcyj A10001)
【分類號(hào)】：R329.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳娜娜,吳曙光,郭丹;骨髓基質(zhì)細(xì)胞K~+通道的膜片鉗研究[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年06期

2 鄭磊,王前;堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)[J];暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2000年01期

3 戴冰冰,盧健,陳詩(shī)書;骨髓基質(zhì)細(xì)胞的特征及其在細(xì)胞和基因治療中的應(yīng)用[J];生命科學(xué);2000年04期

4 楊吉成,盛偉華,李麗娥,董寧征,王紅衛(wèi),郭tC,王曉東,楊宗華;骨髓基質(zhì)細(xì)胞的造血支持作用等生物學(xué)特性的研究[J];中國(guó)血液流變學(xué)雜志;2000年02期

5 姜紅江,孫文學(xué),鞠成朝,譚訓(xùn)香;成人骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)[J];中醫(yī)正骨;2000年05期

6 楊吉成,盛偉華,李麗娥,童寧征,王紅衛(wèi),郭tC,王曉東;骨髓基質(zhì)細(xì)胞的造血支持作用等生物學(xué)特性的研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2001年01期

7 施小鳳;骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)造血的調(diào)控作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè));2003年05期

8 曲蕓,劉惠民;骨髓基質(zhì)細(xì)胞研究進(jìn)展[J];北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2004年01期

9 丁鵬,馮忠堂,王廷華,董堅(jiān),楊智勇,趙楠,王永剛;移植骨髓基質(zhì)細(xì)胞在脊髓內(nèi)存活、遷移及分化[J];解剖學(xué)報(bào);2004年02期

10 何大為,金巖,聶鑫;礦化液對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)特性的影響[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2004年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 仲維廣;張富強(qiáng);胥春;施琥;紀(jì)舒昱;;骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨的電子探針研究[A];第六次全國(guó)口腔修復(fù)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

2 劉麗;張烈焚;;骨髓基質(zhì)細(xì)胞多分化潛能的研究[A];浙江省口腔醫(yī)學(xué)會(huì)第二屆會(huì)員代表大會(huì)暨浙江省第二十三屆口腔醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

3 程明秀;趙宗江;田晨;;骨髓基質(zhì)細(xì)胞的不同培養(yǎng)方法[A];第十一次中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2013年

4 彭琳;劉敏;薛亞楠;黃世文;卓仁禧;;側(cè)鏈含伯氨基的聚酰胺胺用于骨髓基質(zhì)細(xì)胞基因傳遞[A];2009年全國(guó)高分子學(xué)術(shù)論文報(bào)告會(huì)論文摘要集（下冊(cè)）[C];2009年

5 陳鋮;常智杰;張淑平;趙曉初;趙南明;張秀芳;;骨髓基質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)與誘導(dǎo)分化[A];2000年材料科學(xué)與工程新進(jìn)展（上）——2000年中國(guó)材料研討會(huì)論文集[C];2000年

6 王華松;陳莊洪;羅永湘;;骨髓基質(zhì)細(xì)胞定向成脂分化的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病分會(huì)成立十周年論文匯編[C];2011年

7 溫昱;秦書儉;李彬;;兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)[A];解剖學(xué)雜志——中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

8 王華松;陳莊洪;羅永湘;;髓內(nèi)脂肪細(xì)胞對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨能力影響的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病分會(huì)成立十周年論文匯編[C];2011年

9 關(guān)呈超;張富強(qiáng);;高糖環(huán)境抑制骨髓基質(zhì)細(xì)胞的分化和成骨[A];第六次全國(guó)口腔修復(fù)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

10 沈健;俞康;;血寶和再障患者血清對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的影響[A];2007年浙江省血液病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 匡遠(yuǎn)深;治腦損傷可用骨髓細(xì)胞[N];健康報(bào);2003年

2 王雪飛 張秀花;修復(fù)軟骨 骨髓基質(zhì)細(xì)胞是最佳種子[N];健康報(bào);2004年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 許貞書;人血液血管細(xì)胞生成素對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2005年

2 鄒立津;家豬骨髓基質(zhì)細(xì)胞的多向分化與透明質(zhì)酸成骨作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2006年

3 唐滔;骨髓基質(zhì)細(xì)胞心肌移植的初步研究[D];中南大學(xué);2003年

4 鐘池;骨髓基質(zhì)細(xì)胞靜脈注射治療大鼠短暫性局灶性腦缺血的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2003年

5 單立冬;骨髓基質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化及對(duì)帕金森病的治療[D];蘇州大學(xué);2004年

6 丁鵬;骨髓基質(zhì)細(xì)胞遷移機(jī)制的初步探討及其移植治療脊髓全橫斷損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2005年

7 胡軍;沖擊波促進(jìn)出生后人骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨分化的研究[D];中南大學(xué);2003年

8 陳鎮(zhèn)洲;體外擴(kuò)增骨髓基質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮祖細(xì)胞自體移植治療腦缺血的實(shí)驗(yàn)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2007年

9 黃濤;蛋白酪氨酸激酶受體B基因修飾骨髓基質(zhì)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

10 羅蔚鋒;聯(lián)合應(yīng)用骨髓基質(zhì)細(xì)胞和還原型谷胱苷肽治療帕金森大鼠實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 楊紅霞;骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞凋亡的影響[D];石河子大學(xué);2015年

2 李興澤;骨髓基質(zhì)細(xì)胞遷移機(jī)制的體外實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2009年

3 李麗娥;人骨髓基質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)特性及其分化的研究[D];蘇州大學(xué);2001年

4 韋瑛;移植的人骨髓基質(zhì)細(xì)胞在體內(nèi)分布與安全性評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2007年

5 林放;三種血小板生成關(guān)鍵因子共轉(zhuǎn)染人骨髓基質(zhì)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

6 李婷;內(nèi)嗎啡肽-1對(duì)正常骨髓基質(zhì)細(xì)胞造血調(diào)控的影響[D];蘭州大學(xué);2009年

7 樊智敏;人臍血源基質(zhì)細(xì)胞及骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)造血功能損傷修復(fù)作用的比較[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 仲維廣;兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)成骨及與珊瑚聯(lián)合培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2004年

9 王倩;人可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2005年

10 王振斌;成人骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)和鑒定[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2005年

，

本文編號(hào)：1497621