本文關(guān)鍵詞： 白念珠菌 HOG基因 超微結(jié)構(gòu) 藥敏實(shí)驗(yàn) 小鼠模型 毒力　出處：《福建醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 目的: 比較白念珠菌HOG21(hog/hog雙等位基因缺失株)、CHK21(chk/chk雙等位基因缺失株)和標(biāo)準(zhǔn)株CAF-2菌株細(xì)胞壁超微結(jié)構(gòu)、對(duì)氟康唑MIC值及在系統(tǒng)性感染小鼠模型中致病力的差異,探討HOG基因在白念珠菌致病機(jī)制中的作用及其與CHK基因的關(guān)系,旨在尋找系統(tǒng)性白念珠菌感染致病相關(guān)基因,篩選新的抗真菌藥物作用靶點(diǎn),為今后研發(fā)出更高效、低毒、廣譜的新型抗真菌藥物提供理論依據(jù)。 方法: 1.建立系統(tǒng)性白念珠菌感染小鼠模型,比較死亡率并描繪生存曲線;平皿稀釋法檢測(cè)各組脾腎組織菌落形成單位(CFU)數(shù)目;制作腎組織病理學(xué)標(biāo)本,評(píng)估真菌感染程度。 2.利用掃描和透射電鏡觀察三株菌株細(xì)胞壁超微結(jié)構(gòu)的差異。 3.微量稀釋法檢測(cè)三株菌株對(duì)氟康唑MIC值的差異。 結(jié)果: 1.體內(nèi)實(shí)驗(yàn): (1)成功建立系統(tǒng)性白念珠菌感染小鼠模型。 (2)CAF-2組、CHK21組和HOG21組感染小鼠觀察期間死亡率分別為100%、0、0,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (3)脾腎組織菌落形成單位(CFU)結(jié)果:各觀察時(shí)間點(diǎn)CAF-2組脾腎組織帶菌量(CFU)比HOG21組和CHK21組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;HOG21組與CHK21組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (4)組織病理學(xué)觀察結(jié)果:CAF-2組腎髓質(zhì)區(qū)見(jiàn)彌漫性菌絲和孢子,伴人多形核粒細(xì)胞(PMN)為主的炎性細(xì)胞浸潤(rùn),腎組織結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重;HOG21組腎乳頭見(jiàn)少量菌絲和孢子被PMN包裹形成局限性膿腫;CHK21組則表現(xiàn)為以腎臟髓腔內(nèi)PMN浸潤(rùn)為主。電鏡結(jié)果:CAF-2組腎小管上皮細(xì)胞微絨毛破壞嚴(yán)重;HOG21組腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)見(jiàn)被吞噬的孢子;而CHK21組腎組織病變較輕。 2.體外實(shí)驗(yàn): (1)掃描電鏡下,CAF-2表面光滑;CHK21表面見(jiàn)小斑塊樣突起;HOG21表面見(jiàn)細(xì)小點(diǎn)狀突起。透射電鏡下,CAF-2胞壁結(jié)構(gòu)完整,電子致密層、電子透明層及細(xì)胞膜各層結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn);CHK21細(xì)胞壁可見(jiàn)電子致密層變薄甚至局灶性缺失;HOG21細(xì)胞壁電子透明層厚薄不一,部分見(jiàn)電子致密層局灶性缺失、細(xì)胞膜外突、不連續(xù)以及胞膜周圍囊泡聚集的現(xiàn)象。 (2)微量稀釋法檢測(cè)各組酵母細(xì)胞對(duì)氟康唑MIC值:CAF-2:1ug/ml;CHK21:0.125~0.25ug/ml;HOG21:0.25ug/ml。 結(jié)論: 1. HOG基因參與白念珠菌致病性的調(diào)控過(guò)程。 2. HOG基因參與調(diào)控白念珠菌細(xì)胞壁的生物合成。 3. HOG基因影響白念珠菌對(duì)氟康唑的敏感性,這可能為新型藥靶的篩選和或新型藥靶抑制劑與氟康唑聯(lián)合運(yùn)用進(jìn)行高效、低毒抗真菌治療提供理論依據(jù)。 4.CHK基因也參與對(duì)白念珠菌毒力、細(xì)胞壁的生物合成以及對(duì)氟康唑敏感性的調(diào)控過(guò)程,但其作用機(jī)制可能有別于HOG基因。
[Abstract]:Objective: To compare the two allelic deletion strains of Candida albicans HOG21(hog/hog). The ultrastructure of cell wall, MIC value of fluconazole and pathogenicity of CAF-2 strain in systemic infection mice. To explore the role of HOG gene in the pathogenesis of Candida albicans and its relationship with CHK gene, the aim of this study was to search for the pathogenic genes associated with systemic Candida albicans infection and to screen new antifungal drug targets. It provides theoretical basis for developing new antifungal drugs with high efficiency, low toxicity and broad spectrum. Methods: 1. Establish systemic Candida albicans infected mice model, compare mortality and depict survival curve; The number of colony forming units (CFU) of spleen and kidney tissue in each group was detected by plate dilution method. Renal histopathological specimens were made to evaluate the degree of fungal infection. 2. The ultrastructure of cell wall of three strains were observed by scanning and transmission electron microscopy. 3.The difference of fluconazole MIC between three strains was detected by microdilution method. Results: 1. In vivo experiments: 1) the model of systemic Candida albicans infection in mice was established successfully. The mortality of infected mice in CAF-2 group and CHK21 group and HOG21 group were 100 and 0, respectively, and the difference was statistically significant. (3) CFU (colony forming unit of spleen and kidney): the amount of CFU in spleen and kidney tissue of CAF-2 group was higher than that of HOG21 group and CHK21 group at different observation time points. The difference was statistically significant. There was no significant difference between HOG21 group and CHK21 group. The histopathological results showed that diffuse hyphae and spores were found in medulla of the kidney in group 1: CAF-2, accompanied by infiltration of inflammatory cells dominated by human polymorphonuclear granulocyte (PMN), and serious damage of renal tissue structure. In HOG21 group, a small number of hyphae and spores were encapsulated by PMN to form localized abscess. In CHK21 group, intramedullary PMN infiltration was dominant. The microvilli of renal tubular epithelial cells were severely damaged in the CHK21 group. In HOG21 group, phagocytic spores were found in renal tubular epithelial cells. In CHK21 group, renal tissue lesion was mild. 2. In vitro experiments: 1) the surface of CAF-2 was smooth under scanning electron microscope. Small plaques were seen on the surface of CHK21. The surface of HOG21 showed small punctate protrusions. The wall structure of CAF-2 was intact, the electron dense layer, the electron transparent layer and each layer of cell membrane were clearly visible under transmission electron microscope. In the CHK21 cell wall, the electron dense layer was thinned and even the focal absence was observed. The thickness of the electron transparent layer of HOG21 cell wall was different, and some of the electron dense layers were found to have focal absence, extracellular protrusion, discontinuity and the accumulation of vesicles around the cell membrane. (2) Microdilution method was used to detect the MIC value of fluconazole cells in each group: CAF-2: 1ug-mml. CHK 21: 0.125 U / ml; HOG21:0.25ug/ml. Conclusion: 1. HOG gene is involved in the regulation of the pathogenicity of Candida albicans. 2. HOG gene is involved in the regulation of cell wall biosynthesis of Candida albicans. 3. HOG gene affects the sensitivity of Candida albicans to fluconazole, which may be a high efficiency for the screening of new drug targets and the combination of new target inhibitors and fluconazole. Low toxicity antifungal therapy provides theoretical basis. 4. CHK gene is also involved in the virulence of Candida albicans, biosynthesis of cell wall and regulation of fluconazole sensitivity, but its mechanism may be different from that of HOG gene.
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R379.4

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王魯,張雪,刁慶春,劉榮卿,鐘白玉;三株抗白念珠菌單克隆抗體的制備與鑒定[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年01期

2 廉翠紅,劉維達(dá);與白念珠菌黏附和侵入相關(guān)的毒力因子研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊(cè);2004年05期

3 李安生;;核苷和核苷酸對(duì)白念珠菌芽管形成的影響及細(xì)胞 cAMP 與芽管形成的關(guān)系[J];國(guó)際皮膚性病學(xué)雜志;1993年04期

4 呂桂霞;玉米粉液基培養(yǎng)促進(jìn)白念珠菌厚壁孢子的形成[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊(cè);1999年03期

5 唐寧楓!210042南京,吳紹熙!210042南京,郭寧如!210042南京,焦端清,秦浚川;白念珠菌烯醇化酶的分離與純化[J];中華皮膚科雜志;2000年05期

6 張寶軍,葉慶俏,周村建,李彥,唐書(shū)謙,李芹階;白念珠菌ATCC-90028菌絲相的誘導(dǎo)[J];實(shí)用藥物與臨床;2005年02期

7 苑天紅,王明永,吳升偉,吳承龍;小鼠腹腔吞噬細(xì)胞對(duì)二相性白念珠菌的吞噬研究[J];貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2004年04期

8 秦曉峰;吳建華;賈鑫明;顧軍;姜遠(yuǎn)英;;白念珠菌臨床株FLU1基因表達(dá)與氟康唑耐藥的關(guān)系[J];中華皮膚科雜志;2006年08期

9 秦振宇,譚升順,陳康,黨少農(nóng);菌株數(shù)值分類程序設(shè)計(jì)及其在白念珠菌菌株相似性分析中的初步應(yīng)用[J];中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志;1997年05期

10 劉維達(dá),吳紹熙,朱一元;白念珠菌厚膜孢子形態(tài)發(fā)生過(guò)程的掃描電鏡觀察[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1998年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 閻瀾;李妙海;曹永兵;高平揮;王彥;姜遠(yuǎn)英;;白念珠菌耐藥新蛋白——交替氧化酶[A];藥學(xué)發(fā)展前沿論壇及藥理學(xué)博士論壇論文集[C];2008年

2 徐永豪;李春陽(yáng);;耐氟康唑白念珠菌所致外陰陰道念珠菌病1例[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第14次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

3 陳興;侯天文;白云;李瑋;陳晶;郭曉麗;劉艷麗;;住院患者念珠菌菌尿的調(diào)查[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)成立30周年慶典大會(huì)資料匯編[C];2009年

4 張欣;蘇雯靜;李巍;安金剛;劉玉峰;;單克隆天然抗體3B4抑制白念珠菌芽管形成的機(jī)制初探[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

5 郭仁勇;;白念珠菌聚苯乙烯黏附增強(qiáng)基因1的研究進(jìn)展[A];2008年浙江省檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

6 劉澤虎;呂雪蓮;呂桂霞;沈永年;徐宏彬;陳偉;胡素泉;劉維達(dá);;煙曲霉選擇性培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)研究[A];2008全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

7 賈鑫明;曹永兵;王彥;姜遠(yuǎn)英;;白念珠菌RTA2是鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶通路介導(dǎo)的耐藥性產(chǎn)生的靶基因[A];藥學(xué)發(fā)展前沿論壇及藥理學(xué)博士論壇論文集[C];2008年

8 陳官芝;馬海麗;;念珠菌黏附特性對(duì)比研究[A];2007中華醫(yī)學(xué)會(huì)第二次醫(yī)學(xué)真菌學(xué)術(shù)會(huì)議暨醫(yī)學(xué)真菌實(shí)驗(yàn)室研究技術(shù)新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2007年

9 秦曉峰;吳建華;黃懿;張麗娟;姜遠(yuǎn)英;顧軍;;微量稀釋法測(cè)定白念珠菌對(duì)氟康唑的MIC值及兩種藥敏試驗(yàn)的比較[A];2008全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

10 楊繼君;陳興平;;白念珠菌生物膜形成不同時(shí)期對(duì)氟康唑敏感性的初步研究[A];“環(huán)境與健康”學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 鄒先彪;白念珠菌感染的預(yù)警[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2005年

2 中國(guó)醫(yī)科院皮膚病研究所教授 吳紹熙;從誤診病例談臨床思維[N];健康報(bào);2007年

3 健康時(shí)報(bào)實(shí)習(xí)記者　 梁璐;瘙癢部位不同用藥有別[N];健康時(shí)報(bào);2006年

4 范高明;艾格生蛋黃免疫球蛋白 筑起國(guó)民免疫新長(zhǎng)城[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2003年

5 丁潔 傳寶;太鋼成功研發(fā)新型抗菌不銹鋼[N];太原日?qǐng)?bào);2006年

6 記者 陳強(qiáng) 通訊員 蔣淑芬 賈寧;太鋼成功研發(fā)出新型抗菌不銹鋼[N];中國(guó)冶金報(bào);2006年

7 記者　齊作權(quán) 通訊員　黃傳寶;永恒抗菌不銹鋼在太鋼問(wèn)世[N];山西日?qǐng)?bào);2006年

8 記者衣曉峰 靳萬(wàn)慶 通訊員莊磊;臨床研究證實(shí)甲真菌病病原菌種發(fā)生變遷[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

9 本報(bào)記者 包斯文;經(jīng)濟(jì)新穎和抗菌型不銹鋼市場(chǎng)前景廣闊[N];中國(guó)冶金報(bào);2004年

10 ;抗菌不銹鋼在沈陽(yáng)研制成功[N];今日信息報(bào);2004年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 許懿;小檗堿與氟康唑協(xié)同抗耐藥白念珠菌的作用機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

2 王琳;白念珠菌耐藥相關(guān)蛋白R(shí)ta2p與脂筏關(guān)系研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

3 曹永兵;轉(zhuǎn)錄因子Caplp促進(jìn)白念珠菌抗藥性形成的分子機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

4 焦?jié)升?重組Sap2蛋白接種對(duì)免疫抑制小鼠系統(tǒng)感染白念珠菌的保護(hù)作用[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年

5 劉偉;白念珠菌CaSCH9基因功能研究[D];天津大學(xué);2010年

6 吳建華;白念珠菌細(xì)胞周期及抗真菌中藥單體對(duì)其影響的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2003年

7 賀志彬;白念珠菌耐藥基因CDR1基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2003年

8 陳臘梅;攜帶G487T和T916C突變的白念珠菌耐藥基因表達(dá)與氟康唑耐藥關(guān)系的研究[D];山東大學(xué);2010年

9 陳孫孝;白念珠菌鈣調(diào)蛋白基因(CMD1)缺陷菌株的構(gòu)建及CMD1功能性基因的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2001年

10 王惠平;應(yīng)用滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)對(duì)白念珠菌耐氟康唑相關(guān)基因點(diǎn)突變的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 黃悅;白念珠菌HOG基因致病相關(guān)性研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

2 劉朝紅;漢防己甲素對(duì)氟康唑抗白念珠菌生物膜增效活性的初步研究[D];暨南大學(xué);2010年

3 鐘毅;白念珠菌蘋(píng)果酸脫氫酶的結(jié)構(gòu)及功能初步研究[D];中山大學(xué);2012年

4 張蕾;紫外線對(duì)白念珠菌生長(zhǎng)的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2012年

5 陳文峰;雙組份信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)抑制劑體外抗白念珠菌活性的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

6 商慶華;魚(yú)腥草素鈉抗白念珠菌的作用及機(jī)制研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2012年

7 郭雅莉;白念珠菌多位點(diǎn)序列分型研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

8 董玲玲;生物被膜型白念珠菌代謝物分析及代謝變化的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

9 仇萌;白念珠菌Sap2快速檢測(cè)方法的建立[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2012年

10 張玉倩;BDSF抑制白念珠菌生物膜的形成[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

，

本文編號(hào)：1481260