漢坦病毒GM04-38株包膜糖蛋白上融合肽的初步確定
本文關(guān)鍵詞: 漢坦病毒 包膜糖蛋白 細(xì)胞融合 融合肽 出處:《山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2009年05期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的初步確定漢坦病毒GM04-38株包膜糖蛋白上潛在的融合肽區(qū)域。方法采用基因定點(diǎn)突變技術(shù)將潛在融合肽區(qū)域的十個(gè)關(guān)鍵氨基酸突變成性質(zhì)相左的氨基酸,轉(zhuǎn)染Vero E6細(xì)胞后,間接免疫熒光(IFA)檢測(cè)糖蛋白表達(dá),采用Giemsa染色法觀察細(xì)胞融合現(xiàn)象。結(jié)果在Vero E6細(xì)胞中成功表達(dá)出糖蛋白,IFA顯示關(guān)鍵氨基酸突變前后細(xì)胞中均有熒光信號(hào),呈胞漿分布,但細(xì)胞融合現(xiàn)象在突變后消失。結(jié)論潛在融合肽區(qū)域的十個(gè)氨基酸突變均對(duì)細(xì)胞融合產(chǎn)生明顯的影響,提示該段區(qū)域很可能是病毒的融合肽。
[Abstract]:Objective to identify the potential fusion peptide region on the envelope glycoprotein of Hantavirus GM04-38 strain. Methods Ten key amino acids in the potential fusion peptide region were mutated into ammonia with different properties by site-directed mutagenesis. Base acid. After transfection of Vero E6 cells, the expression of glycoprotein was detected by indirect immunofluorescence assay (IFA). Giemsa staining was used to observe the cell fusion. Results the expression of glycoprotein in Vero E6 cells showed that there were fluorescence signals in the cells before and after the mutation of key amino acids. Conclusion the ten amino acid mutations in the potential fusion peptide region have a significant effect on the cell fusion, suggesting that this region may be the fusion peptide of the virus.
【作者單位】: 山東大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院病毒學(xué)研究室;山東省疾病預(yù)防控制中心免疫預(yù)防管理所;實(shí)驗(yàn)畸形學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:教育部博士點(diǎn)基金項(xiàng)目資助課題(20060422015) 山東大學(xué)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目資助
【分類號(hào)】:R373.32
【正文快照】: 漢坦病毒(Hantavirus,HV)屬于布尼亞病毒科漢坦病毒屬,是人類重要的致病病毒。細(xì)胞融合是包括HV在內(nèi)的許多包膜病毒侵入細(xì)胞、復(fù)制、釋放、傳播和致病的重要生物過(guò)程,也是細(xì)胞間信息傳遞的重要步驟和決定病毒毒力的重要因素。因此,探討HV的細(xì)胞融合機(jī)理,尤其是精確的細(xì)胞融合
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1476095
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