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利用月經(jīng)血建立的經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞系

發(fā)布時(shí)間:2018-01-20 00:54

  本文關(guān)鍵詞: 成體干細(xì)胞 月經(jīng) 細(xì)胞系 組織工程 干細(xì)胞 培養(yǎng) 經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞 表型鑒定 細(xì)胞建系 細(xì)胞治療 出處:《中國(guó)組織工程研究》2015年50期  論文類型:期刊論文


【摘要】:背景:經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞被證實(shí)是一種新型的成體干細(xì)胞,目前國(guó)內(nèi)關(guān)于其系統(tǒng)的建系方法報(bào)道極少。目的:建立經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞系,并鑒定其表型和多能性。方法:收集健康成年女性的月經(jīng)血,通過(guò)密度梯度離心法分離出經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),觀察細(xì)胞的形態(tài)及增殖特性;采用CCK-8法檢測(cè)各株細(xì)胞的增殖能力,定期收集細(xì)胞進(jìn)行核型分析,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面抗原CD34,CD38,CD44,CD45,CD73,CD90,CD105,Oct-4的表達(dá),對(duì)細(xì)胞進(jìn)行體外成脂和成骨誘導(dǎo)分化并鑒定。結(jié)果與結(jié)論:成功從6名健康志愿者的經(jīng)血中分離獲得4株經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞系。細(xì)胞呈現(xiàn)典型的梭狀結(jié)構(gòu),具有46,XX核型,能在體外穩(wěn)定迅速增殖,傳代后大約48 h進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,表達(dá)CD44,CD73,CD90,CD105及Oct-4,不表達(dá)CD38,CD34,CD45;成脂誘導(dǎo)22 d后油紅O染色陽(yáng)性,成骨誘導(dǎo)2周后茜素紅染色陽(yáng)性。實(shí)驗(yàn)表明經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞具備擴(kuò)增迅速、核型穩(wěn)定、多潛能性等優(yōu)點(diǎn),通過(guò)建立經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞系,為進(jìn)一步的臨床治療應(yīng)用以及科學(xué)研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Background: menstrual blood derived stromal stem cells have been proved to be a new type of adult stem cells. Methods: the menstrual blood of healthy adult women was collected and cultured by density gradient centrifugation. The morphology and proliferation of the cells were observed. The proliferative ability of each cell line was detected by CCK-8 assay, and the cell karyotype was collected regularly. Flow cytometry was used to detect the cell surface antigen CD34, CD38, CD44 and CD45. Expression of CD73, CD90, CD105, Oct-4. Results and conclusion: four blood derived stromal cell lines were successfully isolated from the blood of 6 healthy volunteers. The cells showed a typical fusiform structure. It can proliferate stably and rapidly in vitro, enter logarithmic growth phase about 48 hours after passage, and express CD44T CD73, CD90, CD105 and Oct-4. CD38, CD34, CD45; Oil red O staining was positive after adipogenic induction 22 days later, and alizarin red staining was positive 2 weeks after osteogenesis induction. The results showed that hematogenous stromal stem cells had the advantages of rapid expansion, stable karyotype and multipotential. The establishment of meridian blood derived stromal stem cell lines lays a foundation for further clinical application and scientific research.
【作者單位】: 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院;
【基金】:遼寧省科學(xué)技術(shù)計(jì)劃項(xiàng)目(2012225014)~~
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introduction干細(xì)胞是增殖發(fā)育形成人體各種組織細(xì)胞的最初來(lái)源。1961年,Till等[1]首次提出了干細(xì)胞的基本特性,即具有自我更新,無(wú)限增殖以及多向分化的潛能。干細(xì)胞根據(jù)發(fā)育階段可以分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞兩類。胚胎干細(xì)胞是一種能夠向所有特定器官細(xì)胞類型分化的

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