發(fā)布時間：2018-01-20 00:54

  本文關鍵詞： 成體干細胞 月經(jīng) 細胞系 組織工程 干細胞 培養(yǎng) 經(jīng)血源性基質(zhì)干細胞 表型鑒定 細胞建系 細胞治療　出處：《中國組織工程研究》2015年50期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：背景:經(jīng)血源性基質(zhì)干細胞被證實是一種新型的成體干細胞,目前國內(nèi)關于其系統(tǒng)的建系方法報道極少。目的:建立經(jīng)血源性基質(zhì)干細胞系,并鑒定其表型和多能性。方法:收集健康成年女性的月經(jīng)血,通過密度梯度離心法分離出經(jīng)血源性基質(zhì)干細胞進行培養(yǎng),觀察細胞的形態(tài)及增殖特性;采用CCK-8法檢測各株細胞的增殖能力,定期收集細胞進行核型分析,采用流式細胞術檢測細胞表面抗原CD34,CD38,CD44,CD45,CD73,CD90,CD105,Oct-4的表達,對細胞進行體外成脂和成骨誘導分化并鑒定。結果與結論:成功從6名健康志愿者的經(jīng)血中分離獲得4株經(jīng)血源性基質(zhì)干細胞系。細胞呈現(xiàn)典型的梭狀結構,具有46,XX核型,能在體外穩(wěn)定迅速增殖,傳代后大約48 h進入對數(shù)生長期,表達CD44,CD73,CD90,CD105及Oct-4,不表達CD38,CD34,CD45;成脂誘導22 d后油紅O染色陽性,成骨誘導2周后茜素紅染色陽性。實驗表明經(jīng)血源性基質(zhì)干細胞具備擴增迅速、核型穩(wěn)定、多潛能性等優(yōu)點,通過建立經(jīng)血源性基質(zhì)干細胞系,為進一步的臨床治療應用以及科學研究奠定了基礎。
[Abstract]:Background: menstrual blood derived stromal stem cells have been proved to be a new type of adult stem cells. Methods: the menstrual blood of healthy adult women was collected and cultured by density gradient centrifugation. The morphology and proliferation of the cells were observed. The proliferative ability of each cell line was detected by CCK-8 assay, and the cell karyotype was collected regularly. Flow cytometry was used to detect the cell surface antigen CD34, CD38, CD44 and CD45. Expression of CD73, CD90, CD105, Oct-4. Results and conclusion: four blood derived stromal cell lines were successfully isolated from the blood of 6 healthy volunteers. The cells showed a typical fusiform structure. It can proliferate stably and rapidly in vitro, enter logarithmic growth phase about 48 hours after passage, and express CD44T CD73, CD90, CD105 and Oct-4. CD38, CD34, CD45; Oil red O staining was positive after adipogenic induction 22 days later, and alizarin red staining was positive 2 weeks after osteogenesis induction. The results showed that hematogenous stromal stem cells had the advantages of rapid expansion, stable karyotype and multipotential. The establishment of meridian blood derived stromal stem cell lines lays a foundation for further clinical application and scientific research.
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院;
【基金】：遼寧省科學技術計劃項目(2012225014)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction干細胞是增殖發(fā)育形成人體各種組織細胞的最初來源。1961年,Till等[1]首次提出了干細胞的基本特性,即具有自我更新,無限增殖以及多向分化的潛能。干細胞根據(jù)發(fā)育階段可以分為胚胎干細胞和成體干細胞兩類。胚胎干細胞是一種能夠向所有特定器官細胞類型分化的

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