人呼吸道合胞病毒M蛋白非復(fù)制型重組腺病毒的構(gòu)建和鑒定
本文關(guān)鍵詞: 人呼吸道合胞病毒 M蛋白 非復(fù)制型重組腺病毒 出處:《中國生物工程雜志》2008年05期 論文類型:期刊論文
【摘要】:人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)基質(zhì)蛋白(matrix protein,M)在RSV形態(tài)發(fā)生上具有重要作用,因含有CTL及CD4+T細(xì)胞抗原表位,在疫苗研究上具有一定意義。為此,應(yīng)用RT-PCR方法從感染RSV的HEp-2細(xì)胞中擴(kuò)增獲得M蛋白基因,構(gòu)建了含M基因的非復(fù)制型重組腺病毒并進(jìn)行表達(dá)和鑒定。基因序列分析顯示RSV M基因僅有一處堿基發(fā)生錯義突變。獲得的非復(fù)制型重組腺病毒FGAd/RSVM感染293細(xì)胞,觀察到細(xì)胞出現(xiàn)CPE,RT-PCR發(fā)現(xiàn)M基因有轉(zhuǎn)錄,Western blotting及間接免疫熒光分析檢測到M蛋白。成功克隆A亞型RSV Long株M基因,并獲得一株可表達(dá)A亞型RSV M蛋白的非復(fù)制型重組腺病毒FGAd/RSVM,可用于體內(nèi)研究觀察其免疫效果及免疫保護(hù)作用。
[Abstract]:Human respiratory syncytial virus (RSVV) matrix protein. M) plays an important role in RSV morphogenesis, because of the presence of CTL and CD4 T cell epitopes, it has a certain significance in vaccine research. M protein gene was amplified by RT-PCR from HEp-2 cells infected with RSV. A non-replicating recombinant adenovirus containing M gene was constructed and expressed and identified. Gene sequence analysis showed that RSV. There was only one missense mutation in the M gene. The obtained non-replicating recombinant adenovirus FGAd/RSVM was infected with 293 cells. The expression of M gene was detected by RT-PCR. M protein was detected by Western blotting and indirect immunofluorescence analysis. M gene of RSV Long strain A was cloned successfully. A non-replicating recombinant adenovirus FGAd-RSVM expressing subtype A RSVM protein was obtained, which can be used to study its immune effect and protective effect in vivo.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室 安徽醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室 安徽醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室 安徽醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室 安徽醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室 安徽醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室 安徽醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室 安徽醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室
【基金】:教育部留學(xué)回國人員科研啟動基金資助項(xiàng)目(20071108)
【分類號】:Q789
【正文快照】: 人類呼吸道合胞病毒(human resp iratorysyncytialvirus,RSV)廣泛分布于世界各地,是引起嬰幼兒呼吸道感染最主要的病毒性病原,老年人和免疫抑制個體也是RSV易感人群[1]。除了引起上呼吸道感染外,還是引起毛細(xì)支氣管肺炎等下呼吸道感染的重要原因。一般首次感染多發(fā)生在一歲以
【共引文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號:1444799
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