本文關(guān)鍵詞：細粒棘球蚴鐵蛋白基因的重組表達、免疫學(xué)特性鑒定及免疫保護力研究　出處：《寧夏醫(yī)科大學(xué)》2009年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 目的構(gòu)建中國大陸株細粒棘球蚴(Echinococcus granulosus Eg)鐵蛋白(ferritin)基因的重組表達質(zhì)粒,表達純化重組鐵蛋白,并對重組鐵蛋白進行免疫學(xué)特性鑒定及免疫保護力研究,為包蟲病分子疫苗的研制提供新的候選分子。 方法(1)重組Eg.ferritin/pET-28a表達質(zhì)粒的構(gòu)建、表達、免疫學(xué)特性鑒定;①將目的基因亞克隆于pET-28a表達載體,轉(zhuǎn)化入BL21(DE3)plysS,誘導(dǎo)表達重組鐵蛋白(rEg.ferritin),經(jīng)含Ni2+的His-bind樹脂柱純化rEg.ferritin;②用rEg.ferritin免疫小鼠制備抗血清,通過Western-blot及ELISA等方法對rEg.ferritin的免疫學(xué)特性進行鑒定;(2) rEg.ferritin誘導(dǎo)小鼠免疫保護力研究:用細粒棘球蚴的原頭蚴腹腔攻擊感染被rEg.ferritin免疫后的小鼠,經(jīng)5個月后剖殺小鼠進行免疫保護力研究。 結(jié)果(1)成功構(gòu)建了rEg.ferritin/pET-28a /BL21(DE3)plysS基因工程菌株,表達并純化出rEg.ferritin。Western-blot檢測:rEg.ferritin免疫小鼠的抗血清可識別rEg.ferritiney及天然抗原(原頭蚴)中的Eg.ferritin,其位置大致相同約19kD。ELISA結(jié)果表明:免疫組血清中的IgG值明顯高于對照組血清IgG值(P0.01)。(2) rEg.ferritin能誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生98.2%的免疫保護力; 結(jié)論(1)成功的構(gòu)建了rEg.ferritin/pET-28a /BL21(DE3)plysS基因工程菌株并純化制備了重組的ferritin,免疫學(xué)鑒定初步說明rEg.ferritin有較好的抗原性及免疫原性;(2) rEg.ferritin能誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生98.2%免疫保護力,表明rEg.ferritin具有作為包蟲疫苗候選分子的潛能。
[Abstract]:Objective To construct recombinant expression plasmid of Echinococcus granulosus Eg ferritin gene in mainland China , to express purified recombinant ferritin , and to study the immunological characteristics and immune protection of recombinant ferritin . Methods ( 1 ) The construction , expression and immunological characteristics of the expression plasmid were identified by recombinant Eg . recombinant / pET - 28a expression vector . 鈶，

本文編號：1435092