發(fā)布時(shí)間：2018-01-11 01:17

  本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子Nkx2.5、ISL-1的表達(dá)與小鼠胚胎心臟的早期發(fā)育　出處：《山西醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： Nkx2.5 ISL-1 第二生心區(qū) 胚胎心臟 臟壁中胚層

【摘要】： 研究背景：胚胎心臟的形態(tài)發(fā)生受不同信號(hào)系統(tǒng)和轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)節(jié),在獨(dú)特的信號(hào)系統(tǒng)和轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)下,構(gòu)成第一生心區(qū)的胚盤(pán)頭端兩側(cè)生心中胚層隨胚盤(pán)卷折,在腹側(cè)中央融合為原始心管,分化為成體心臟左心室的原基,而胚胎心臟的流出道、右心室、部分心房則由前腸腹側(cè),稱(chēng)之為第二生心區(qū)的間充質(zhì)分化為心肌前體細(xì)胞,進(jìn)而分化為心肌細(xì)胞,不斷添加到心管的動(dòng)脈端和靜脈端而形成。應(yīng)用轉(zhuǎn)基因和基因敲除等技術(shù)發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)錄因子Nkx2.5和ISL-1是調(diào)控第一和第二生心區(qū)心肌前體細(xì)胞分化發(fā)育的重要蛋白,Nkx2.5和ISL-1基因突變或基因敲除引發(fā)先天性心臟畸形或胚胎死亡,但Nkx2.5和ISL-1蛋白在正常胚胎心臟早期發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)差異、時(shí)空表達(dá)規(guī)律以及在第二生心區(qū)的時(shí)空分布特點(diǎn)尚未見(jiàn)系統(tǒng)報(bào)道。探討心臟形態(tài)發(fā)生過(guò)程中轉(zhuǎn)錄因子Nkx2.5,ISL-1蛋白在第一、第二生心區(qū)以及心臟發(fā)育早期的時(shí)空表達(dá)特點(diǎn),可以為進(jìn)一步研究心臟發(fā)育機(jī)制提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究目的：探討轉(zhuǎn)錄因子Nkx2.5、ISL-1的表達(dá)和小鼠胚胎早期心臟發(fā)育的關(guān)系。 研究方法：胚齡7.5-13d小鼠胚胎心臟連續(xù)石蠟切片,用抗α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(a-SMA)抗體,抗心肌肌球蛋白重鏈(MHC)抗體,抗轉(zhuǎn)錄因子ISL-1抗體,抗Nkx2.5抗體,進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。 研究結(jié)果：小鼠胚胎發(fā)育第7.5d,轉(zhuǎn)錄因子Nkx2.5在生心板顯較強(qiáng)表達(dá),而心肌特異性蛋白MHC及SMA的表達(dá)明顯滯后。胚齡8-12d小鼠胚胎,隨心臟外形建立,Nkx2.5與MHC的表達(dá)模式趨于相同,在心臟各部表達(dá)逐漸增強(qiáng)。IS1-1開(kāi)始表達(dá)于胚齡8d時(shí)原始心管的心背系膜及前腸腹側(cè)、心包腔背側(cè)壁臟壁中胚層間充質(zhì)。胚齡9d,Nkx2.5陽(yáng)性表達(dá)從原始心管動(dòng)脈端延伸至咽周?chē)陌槐硞?cè)壁臟壁中胚層及軸旁中胚層,參與流出道心肌的發(fā)育。胚胎發(fā)育10d后,大部分心背系膜消失,ISL-1陽(yáng)性間充質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量隨發(fā)育明顯增加,在前腸腹側(cè)形成連續(xù)的ISL-1陽(yáng)性細(xì)胞帶,將流出道遠(yuǎn)端和心房心背系膜相連。胚齡11-12d,心管經(jīng)右側(cè)成襻等形態(tài)發(fā)生過(guò)程,心臟外形基本建立,流出道遠(yuǎn)端出現(xiàn)Nkx2.5和MHC表達(dá)陰性,SMA和ISL-1表達(dá)陽(yáng)性區(qū)域。ISL-1陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量在胚胎11-12d達(dá)頂峰,尤以動(dòng)脈端數(shù)量增加明顯。胚胎發(fā)育13d后,Nkx2.5和ISL-1在心臟和前腸腹側(cè)間充質(zhì)的表達(dá)強(qiáng)度下降。 研究結(jié)論：Nkx2.5是原始生心區(qū)生心板心肌前體細(xì)胞表達(dá)較早的特異性標(biāo)記蛋白。Nkx2.5在第二生心區(qū)的表達(dá)有時(shí)空特異性,主要限于胚胎發(fā)育第9d,心管頭端咽周臟壁中胚層和軸旁中胚層,是第二生心區(qū)心肌前體細(xì)胞亞群,參與流出道心肌發(fā)育。第二生心區(qū)ISL-1陽(yáng)性心肌前體細(xì)胞出現(xiàn)于胚胎發(fā)育第8d的心背系膜和前腸腹側(cè)臟壁中胚層,其數(shù)量在胚胎11-12d達(dá)頂峰,提示小鼠胚胎發(fā)育8-12d是第二生心區(qū)心肌前體細(xì)胞向心肌分化并向發(fā)育中的心臟添加心肌細(xì)胞,驅(qū)動(dòng)心管完成心臟成襻以及形態(tài)發(fā)生過(guò)程的關(guān)鍵時(shí)期。胚胎發(fā)育11-12d,第二生心區(qū)間充質(zhì)細(xì)胞開(kāi)始分化為升主動(dòng)脈和肺動(dòng)脈干的平滑肌。
[Abstract]:Background: the morphology of cardiac embryogenesis regulated by different transcription factors and signaling system, with the regulation of signal system and unique transcription factor, a life of heart area blastoderm head end on both sides of cardiogenic mesoderm with the blastoderm folded, primitive heart tube in the ventral central fusion, differentiate into the left ventricle of the heart. Fetal heart primordia, and right ventricular outflow tract, atria part from ventral to the foregut, called the second heart field mesenchymal differentiation into myocardial precursor cells, and then differentiated into myocardial cells, continue to add to the arterial and venous end to end heart tube formation. Application of transgenic and knockout technology found that the transcription factor Nkx2.5 and ISL-1 protein is an important regulation of the first and second heart myocardial precursor cells differentiation, Nkx2.5 and ISL-1 gene mutation or gene knockout lead to congenital heart malformations or embryo death, but Nkx2.5 Differential expression of ISL-1 protein in normal and early embryonic development in the process of the heart, and the temporal and spatial expression of the heart in second spatial distribution characteristics have not been reported. The transcription factor Nkx2.5 on heart morphogenesis, ISL-1 protein in the first and second heart field and early heart development the spatiotemporal expression characteristics, can provide reliable experimental basis for further study on the mechanism of heart development.
Objective: To investigate the relationship between the expression of transcription factor Nkx2.5, ISL-1 and the early embryonic development of mouse embryos.
Research methods: embryonic heart 7.5-13d mice embryo continuous paraffin section, using anti alpha smooth muscle actin (a-SMA) antibody, anti cardiac myosin heavy chain (MHC) antibody, anti transcription factor ISL-1 antibody, anti Nkx2.5 antibody, immunohistochemical staining.
Results: the 7.5d mouse embryo development, transcription factor Nkx2.5 in heart plate significantly strong expression and expression of cardiac specific protein MHC and SMA was significantly delayed. 8-12d embryonic mouse embryos, with heart shape, the expression pattern of Nkx2.5 and MHC tend to be the same, in the heart of the expression of.IS1-1 increased gradually began to express in dorsal mesocardium and ventral foregut detected 8D primitive heart tube, dorsal pericardial cavity splanchnic mesoderm derived mesenchymal 9D. The embryo age, the positive expression of Nkx2.5 in arteries from primitive heart tube end is extended to peripharyngeal pericardial cavity dorsal ectoderm splanchnic mesoderm and paraxial, participate in the cardiac outflow tract the development of embryo development. After 10d, most dorsal mesocardium disappeared, the number of ISL-1 positive mesenchymal cells increased significantly with the development, the formation of ISL-1 positive cells in a continuous band ventral to the foregut, the distal part of the outflow tract and atrial dorsal mesocardium embryonic heart connected. 11-12d Tube loop morphogenesis via right heart shape, basically established, the distal part of the outflow tract of Nkx2.5 and negative expression of MHC, SMA and ISL-1 expression of the number of positive area of.ISL-1 positive cells peaked in embryonic 11-12d, especially in the artery end increased obviously. The embryonic development of 13D, decreased expression levels of Nkx2.5 and ISL-1 in the heart and ventral to the foregut mesenchyme.
Conclusion: Nkx2.5 is the primary heart field cardiac precursor cells in the early marker of.Nkx2.5 has spatio-temporal expression in the second heart field, mainly confined to the embryonic development of the 9D, the heart tube end peripharyngeal Zangbi mesoderm and paraxial mesoderm, second heart myocardial precursor cells in the subgroup of outflow tract myocardial development. Second heart ISL-1 positive cardiac progenitor cells appeared dorsal mesocardium and ventral foregut visceral mesoderm in embryonic development in 8D, the number reached a peak in the embryo development of mouse embryo 8-12d 11-12d, that is second heart myocardium before heart somatic cell differentiation into cardiomyocytes in addition to the development of myocardial cells, driving the heart tube to complete heart into a critical period and loop morphogenesis of embryonic development. 11-12d, second heart field mesenchymal cells begin to differentiate into ascending aorta and pulmonary artery smooth Smooth muscle.

【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R329.1

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本文編號(hào)：1407560