本文關(guān)鍵詞：急性移植排斥反應(yīng)過程中HLA-G表達(dá)動(dòng)態(tài)變化的實(shí)驗(yàn)及臨床研究　出處：《山東大學(xué)》2009年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 背景: 器官和組織移植是20世紀(jì)的醫(yī)學(xué)壯舉,為挽救人類生命做出了超乎尋常的貢獻(xiàn)。隨著組織配型、器官保存、移植手術(shù)、術(shù)后抗感染等一系列臨床技術(shù)的不斷進(jìn)步,移植器官的存活率以及患者的生活質(zhì)量和生存率都得到了很大的提高,使得器官移植成為治療終末期器官功能衰竭最有效的治療手段。 然而,移植術(shù)后的排斥反應(yīng),尤其是急性排斥反應(yīng),仍然是導(dǎo)致移植器官功能喪失、甚至患者死亡最主要的原因。盡管移植物局部組織的病理活檢可以對(duì)排斥反應(yīng)做出明確診斷,而且一直被公認(rèn)為是診斷移植排斥反應(yīng)的金標(biāo)準(zhǔn),但由于其具有創(chuàng)傷性、容易誘發(fā)并發(fā)癥等缺點(diǎn),在臨床上難以成為常規(guī)的檢查手段;臨床常用的生化學(xué)等檢查只有在移植器官組織結(jié)構(gòu)明顯異常,影響到器官功能時(shí)才能做出診斷。而目前研究較多的細(xì)胞因子、抗體等檢查,則往往由于其準(zhǔn)確性、敏感性、特異性方面的不足而無法得到廣泛的應(yīng)用。到目前為止,仍沒有一種可以及時(shí)、準(zhǔn)確診斷排斥反應(yīng)的公認(rèn)的檢測(cè)方法。 在無法準(zhǔn)確了解患者免疫狀態(tài)的情況下,免疫抑制劑是預(yù)防排斥反應(yīng)發(fā)生的最有效的手段,但過量的免疫抑制劑往往導(dǎo)致嚴(yán)重感染和腫瘤等惡性疾病的發(fā)生。 因此如何通過一種無創(chuàng)性的檢測(cè)方法準(zhǔn)確地反映患者的免疫狀態(tài)并及時(shí)發(fā)現(xiàn)、預(yù)測(cè)排斥反應(yīng)的發(fā)生是移植研究領(lǐng)域一個(gè)亟待解決的重大課題。只有這樣,才能在預(yù)防排斥反應(yīng)和減少免疫抑制劑用量之間尋找到一個(gè)適宜的平衡點(diǎn),制定個(gè)性化的治療方案,達(dá)到最佳的治療效果。 以往相關(guān)研究主要從淋巴細(xì)胞活化的角度加以研究,但從另一方面看,移植術(shù)后穩(wěn)定的患者大多處于免疫抑制或免疫耐受狀態(tài),而發(fā)生排斥的患者則是打破了業(yè)已建立的免疫抑制狀態(tài)而使得免疫細(xì)胞重新激活并發(fā)揮同種異體殺傷作用。那么能否從免疫耐受的角度著手,借觀察宿主免疫耐受相關(guān)因素的變化來預(yù)測(cè)排斥反應(yīng)的發(fā)生呢? 胚胎植入是誘導(dǎo)免疫耐受最成功的典范,從本質(zhì)上看,胚胎植入的過程,其實(shí)就是母體對(duì)帶有父方異體抗原成分的胚胎的免疫耐受過程。器官移植和胚胎植入是兩個(gè)密切相關(guān)的研究領(lǐng)域,雖然同樣是同種異體之間的免疫應(yīng)答,胚胎植入和器官移植的結(jié)局卻截然相反,這其中涉及很多種蛋白和分子的參與。其中非經(jīng)典主要組織相容性復(fù)合體(MHC),尤其是HLA-G的差異性表達(dá),引起了越來越多胚胎學(xué)研究和病理妊娠研究領(lǐng)域?qū)＜业闹匾暋?HLA-G是一種非經(jīng)典MHC-Ⅰ類抗原,與經(jīng)典MHC-Ⅰ類抗原的基因高度同源,蛋白結(jié)構(gòu)也很相似。不同的是,HLA-G分子不具有豐富的多態(tài),也不像經(jīng)典MHC-Ⅰ抗原那樣分布廣泛。生理狀態(tài)下HLA-G僅表達(dá)于胚胎滋養(yǎng)層和一些免疫豁免部位。從功能上看,HLA-G分子可與NK細(xì)胞、T細(xì)胞和APC細(xì)胞等免疫細(xì)胞的抑制性受體結(jié)合,傳遞抑制性信號(hào),從而抑制母體免疫細(xì)胞的活性,誘導(dǎo)母體對(duì)胚胎抗原的免疫耐受。母胎界面HLA-G表達(dá)下降與流產(chǎn)、子癇等病理妊娠的發(fā)生密切相關(guān)。 胚胎學(xué)的研究成果為器官移植免疫的研究提供了新的思路。那么從器官移植的角度來看,移植術(shù)后HLA-G的表達(dá)是否呈現(xiàn)出規(guī)律性的變化?排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí),HLA-G的表達(dá)是否會(huì)有相應(yīng)的變化?是否有助于臨床上排斥反應(yīng)的診斷呢?免疫抑制劑對(duì)機(jī)體HLA-G的表達(dá)有怎樣的影響作用呢?這一系列問題尚未引起人們的重視。如果解決了上述問題,將有助于闡述HLA-G分子在器官移植中的作用機(jī)制,為臨床排斥反應(yīng)的診斷提供新的思路。 臨床上,移植受者術(shù)后常規(guī)接受免疫抑制劑治療以誘導(dǎo)耐受,因此難以區(qū)分移植排斥反應(yīng)和免疫抑制劑對(duì)HLA-G的不同作用,因而有必要利用動(dòng)物模型來系統(tǒng)研究移植排斥反應(yīng)發(fā)生過程中HLA-G分子表達(dá)的變化規(guī)律,并獨(dú)立探討免疫抑制劑對(duì)其的影響作用。 小鼠的Qa-2分子與人類HLA-G分子在結(jié)構(gòu)和功能上均具有高度的同源性,而且純系小鼠之間的皮膚移植模型是最經(jīng)典的排斥反應(yīng)動(dòng)物模型,手術(shù)簡(jiǎn)便,易于觀察。因此小鼠皮膚移植模型成為本次研究的理想動(dòng)物模型。 為了系統(tǒng)的研究移植排斥反應(yīng)發(fā)生過程中HLA-G分子表達(dá)的變化規(guī)律以及免疫抑制劑的影響作用,我們首先以近交系小鼠皮膚移植模型研究了移植術(shù)后不同時(shí)間移植物、浸潤淋巴細(xì)胞、外周血淋巴細(xì)胞(PBLs)以及血漿中Qa-2的表達(dá),分析了其與移植排斥反應(yīng)分級(jí)之間的相關(guān)性和不同劑量免疫抑制劑的影響作用。并在動(dòng)物研究的基礎(chǔ)上,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)了臨床腎移植術(shù)后穩(wěn)定患者和排斥患者術(shù)后不同時(shí)間外周血單個(gè)核細(xì)胞以及血漿HLA-G的不同表達(dá),探討了HLA-G對(duì)移植物排斥反應(yīng)的診斷價(jià)值,并分析了其與患者免疫耐受狀態(tài)之間的關(guān)系,以期為臨床制定個(gè)性化免疫抑制方案提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 目的: 1、利用成功建立的小鼠皮膚移植模型,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)用藥和不用藥狀態(tài)下移植受者術(shù)后不同時(shí)間小鼠Qa-2分子在移植物、浸潤淋巴細(xì)胞、外周血淋巴細(xì)胞、血漿中的表達(dá)變化,揭示移植受者Qa-2分子在移植排斥反應(yīng)發(fā)生過程中的變化規(guī)律,探討其與同種異體急性移植排斥反應(yīng)發(fā)生進(jìn)程之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系。 2、通過檢測(cè)不同種類、不同劑量免疫抑制劑單一或聯(lián)合作用下小鼠Qa-2表達(dá)的變化,分析免疫抑制劑種類和劑量對(duì)Qa-2表達(dá)的不同作用,探討Qa-2表達(dá)對(duì)機(jī)體免疫抑制狀態(tài)的監(jiān)測(cè)價(jià)值,以期為指導(dǎo)臨床制定個(gè)性化治療方案提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 3、動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)腎移植患者術(shù)前和術(shù)后不同時(shí)間外周血單個(gè)核細(xì)胞HLA-G轉(zhuǎn)錄和蛋白水平以及血漿可溶性HLA-G表達(dá)的變化規(guī)律,對(duì)比穩(wěn)定組和排斥組的差異,探討HLA-G對(duì)于移植排斥反應(yīng)的診斷價(jià)值、最佳檢測(cè)方法以及對(duì)患者免疫狀態(tài)的監(jiān)測(cè)作用。 方法: 1.建立小鼠皮膚移植動(dòng)物模型:為研究不同鼠系之間的差別,分別以SPF級(jí)近交系C57BL/6(簡(jiǎn)稱C57)和BALB/C(簡(jiǎn)稱BA)兩種鼠系作為研究對(duì)象,分別隨機(jī)分為正常對(duì)照組和手術(shù)組,其中手術(shù)組又分為自身移植組、同系移植組和異系移植組。為了觀察免疫抑制劑的影響,同系和異系移植組又分別分為不用藥組和用藥組。用藥組模擬臨床環(huán)孢素A(CsA)、皮質(zhì)激素(Horm)及霉酚酸酯(MMF)中等劑量三聯(lián)用藥。手術(shù)組采用經(jīng)典的小鼠背—背皮膚移植手術(shù)方法,建立動(dòng)物模型,術(shù)后每天觀察皮膚移植物大體改變,記錄肉眼排斥時(shí)間。每天取移植皮片進(jìn)行HE染色,根據(jù)移植物病理組織學(xué)改變將其分為排斥反應(yīng)Ⅰ-Ⅳ級(jí),記錄移植物病理排斥進(jìn)展情況。觀察用藥和不用藥對(duì)移植物存活時(shí)間和病理組織學(xué)改變的影響 2.動(dòng)態(tài)檢測(cè)移植術(shù)后Qa-2的表達(dá):利用成功建立的小鼠皮膚移植模型,術(shù)后每天每組處死5只小鼠,采集移植皮片、外周血淋巴細(xì)胞和血漿,采用免疫組化、Real-Time熒光定量PCR、流式細(xì)胞術(shù)和ELISA等方法動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)不同組別小鼠移植受者術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)小鼠Qa-2分子在移植物、浸潤淋巴細(xì)胞、外周血淋巴細(xì)胞、血漿中的表達(dá)變化,分析上述指標(biāo)與排斥反應(yīng)發(fā)生和免疫抑制劑應(yīng)用之間的關(guān)系。 3.免疫抑制劑對(duì)Qa-2表達(dá)的影響:將SPF級(jí)C57BL/6小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、環(huán)孢素組、激素組、霉酚酸酯組和聯(lián)合用藥組,其中三種單一用藥組又分為低、中低、中等、中高、高共5個(gè)劑量組,收集外周血淋巴細(xì)胞、血漿以及移植物,采用Real-Time熒光定量PCR、流式細(xì)胞術(shù)、ELISA及免疫組化等方法檢測(cè)不同種類、不同劑量免疫抑制劑單一作用或聯(lián)合作用下小鼠Qa-2表達(dá)的變化,分析了免疫抑制劑種類和劑量對(duì)Qa-2表達(dá)的不同作用,探討了Qa-2表達(dá)對(duì)機(jī)體免疫抑制狀態(tài)的監(jiān)測(cè)價(jià)值,以期為指導(dǎo)臨床制定個(gè)性化治療方案提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 4.腎移植患者HLA-G的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè):連續(xù)收集57例腎移植患者(其中術(shù)后32例腎功能穩(wěn)定、25例發(fā)生急性排斥反應(yīng))術(shù)前和術(shù)后不同時(shí)間(術(shù)后3天、7天、2周、3周、1月、2月、3月以上)外周血標(biāo)本。懷疑排斥的患者及時(shí)進(jìn)行腎活檢明確診斷,并于沖擊治療前、排斥反應(yīng)發(fā)生后3天、7天、2周、3周以上分別收集標(biāo)本。采用Real-Time熒光定量PCR、流式細(xì)胞術(shù)和ELISA等方法動(dòng)態(tài)檢測(cè)移植受者外周血淋巴細(xì)胞HLA-G轉(zhuǎn)錄和蛋白水平以及血漿可溶性HLA-G表達(dá)的變化規(guī)律,對(duì)比分析穩(wěn)定組和排斥組的差異,探討HLA-G對(duì)于移植排斥反應(yīng)的診斷價(jià)值、最佳檢測(cè)方法。 結(jié)果: 1、小鼠皮膚移植模型術(shù)后移植物的大體改變級(jí)組織病理學(xué)變化 自身移植和同系移植組小鼠移植皮片呈現(xiàn)免疫耐受狀態(tài),移植物縫合部位逐漸愈合,皮片紅潤柔軟,毛發(fā)重新生長。 兩種鼠系交叉移植后,受體小鼠移植物呈現(xiàn)明顯的排斥反應(yīng)。C57和BA小鼠皮膚移植物肉眼完全排斥的時(shí)間分別為9±0.38天和10±0.24天。用藥情況下,C57和BA兩種鼠系移植物的存活時(shí)間均明顯延長,分別為17±0.54天和18±0.36天。兩種鼠系移植皮片存活時(shí)間沒有明顯差異。 取移植小鼠皮膚移植物進(jìn)行組織學(xué)觀察并進(jìn)行病理分級(jí),結(jié)果顯示:同系移植皮片與正常皮膚組織差別不明顯,異系移植皮片淋巴細(xì)胞浸潤隨術(shù)后時(shí)間的延長呈現(xiàn)不斷增強(qiáng)的趨勢(shì),最終導(dǎo)致移植物壞死脫落。按照淋巴細(xì)胞浸潤和皮膚組織壞死程度將排斥反應(yīng)分為輕度(Ⅰ級(jí))、中度(Ⅱ級(jí))、重度(Ⅲ級(jí))和嚴(yán)重排斥(Ⅳ級(jí))四個(gè)等級(jí)。不用藥情況下,病理Ⅰ-Ⅳ級(jí)排斥反應(yīng)分別發(fā)生于術(shù)后2-4天、5-7天、8-10天和11-觀察結(jié)束。用藥情況下,淋巴細(xì)胞浸潤出現(xiàn)明顯延緩趨勢(shì),病理排斥Ⅰ-Ⅳ級(jí)分別發(fā)生于2-8天、9-12天、13-18天、19天-觀察結(jié)束。而且移植皮片的病理改變沒有鼠系特異性。 2、不用藥情況下,急性排斥反應(yīng)發(fā)生過程中小鼠Qa-2表達(dá)的變化規(guī)律 同系移植術(shù)后,皮膚移植物、外周血Qa-2的表達(dá)均基本穩(wěn)定,與術(shù)前保持一致,而異系移植組Qa-2的表達(dá)則隨著術(shù)后時(shí)間的不同而呈現(xiàn)不同的變化。 皮膚移植物免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示:正常和同系移植皮片呈Qa-2陰性表達(dá),僅在皮脂腺細(xì)胞呈弱陽性表達(dá)。排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí),移植物表達(dá)變化不大。浸潤淋巴細(xì)胞呈陰性表達(dá)。 Real-Time熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果顯示:異系移植組術(shù)后5天至術(shù)后9天左右Qa-2轉(zhuǎn)錄水平有所下調(diào),但與同系移植同一時(shí)間點(diǎn)相比沒有明顯差異。與皮膚排斥反應(yīng)病理分級(jí)結(jié)合分析發(fā)現(xiàn),Ⅱ、Ⅲ級(jí)排斥反應(yīng)發(fā)生階段,Qa-2轉(zhuǎn)錄總體水平低于同系移植組。 流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示:異系移植術(shù)后4-5天開始,CD4~+T淋巴細(xì)胞Qa-2的平均熒光強(qiáng)度(MFI)以及CD8~+T淋巴細(xì)胞Qa-2的陽性表達(dá)率均明顯下降,直到術(shù)后第10天才恢復(fù)到術(shù)前或正常水平,之后甚至高于正常水平或同一時(shí)間點(diǎn)的同系移植組。與病理排斥反應(yīng)分級(jí)結(jié)合分析,差異更加明顯。 ELISA檢測(cè)血漿sQa-2水平與外周血淋巴細(xì)胞Qa-2變化趨勢(shì)不同。同系移植組術(shù)后第2天,sQa-2水平高于正常水平,差異顯著,之后恢復(fù)正常;異系移植術(shù)后2-3天迅速上升并達(dá)到峰值,之后下降,術(shù)后7天之后基本恢復(fù)到術(shù)前水平。 BA小鼠PBLs Qa-2的表達(dá)明顯低于C57小鼠,但變化趨勢(shì)相似。 3、用藥情況下,急性排斥反應(yīng)發(fā)生過程中小鼠Qa-2表達(dá)的變化規(guī)律 皮膚移植物免疫組化檢測(cè)結(jié)果:同系移植小鼠移植皮片呈明顯陽性表達(dá)。異系移植術(shù)后早期,與不用藥組相比,Qa-2表達(dá)明顯增強(qiáng),皮膚組織細(xì)胞和少量浸潤淋巴細(xì)胞均呈強(qiáng)陽性表達(dá)。隨著排斥反應(yīng)的加重,皮膚移植物的陽性表達(dá)沒有明顯改變,但浸潤淋巴細(xì)胞陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度均明顯下降。當(dāng)皮膚發(fā)生重度排斥反應(yīng)時(shí),浸潤淋巴細(xì)胞Qa-2表達(dá)為陰性。排斥反應(yīng)為Ⅳ級(jí)時(shí),由于組織和大量淋巴細(xì)胞壞死,無法檢測(cè)其Qa-2的表達(dá)情況,但深層皮膚結(jié)締組織和浸潤淋巴細(xì)胞均呈陽性表達(dá)。 Real-Time熒光定量PCR結(jié)果顯示:同系移植組術(shù)后Qa-2的轉(zhuǎn)錄水平雖仍保持基本穩(wěn)定,但明顯高于未用藥組。而異系移植組術(shù)后早期和末期與同系移植組相同時(shí)間沒有明顯差異,但當(dāng)排斥反應(yīng)進(jìn)展為Ⅱ、Ⅲ級(jí),Qa-2的轉(zhuǎn)錄明顯下降,甚至達(dá)到正常未用藥水平。 流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示:CD4~+T淋巴細(xì)胞Qa-2表達(dá)的MFI以及CD8~+T淋巴細(xì)胞Qa-2的陽性表達(dá)率的變化趨勢(shì)與PBLs Qa-2轉(zhuǎn)錄水平的變化基本一致。 ELISA檢測(cè)血漿sQa-2水平結(jié)果顯示:用藥組術(shù)前水平明顯低于未用藥組。同系移植術(shù)后變化不明顯。異系移植術(shù)后2-6天,sQa-2水平持續(xù)上升,但仍明顯低于未用藥組。術(shù)后第7天開始逐漸下降,到術(shù)后14天之后,恢復(fù)到術(shù)前水平。 4、免疫抑制劑種類和劑量對(duì)小鼠Qa-2表達(dá)的影響 連續(xù)用藥7天以后,小鼠CsA血藥濃度達(dá)到穩(wěn)態(tài),并與用藥劑量呈明顯正相關(guān)。 免疫移植劑對(duì)PBLs Qa-2轉(zhuǎn)錄水平的影響:小劑量CsA、Horm和MMF組Qa-2轉(zhuǎn)錄水平與正常組沒有明顯差異。隨著劑量的加大,Qa-2轉(zhuǎn)錄水平明顯升高,CsA在中高劑量效果最為明顯;隨著劑量的增加,糖皮質(zhì)激素對(duì)Qa-2的上調(diào)作用逐漸顯著,有明顯的劑量相關(guān)性,而且明顯強(qiáng)于環(huán)孢素:與其他兩種藥物相比,MMF的作用相對(duì)較弱。值得注意的是,在所有用藥組中,中等劑量混合用藥對(duì)Qa-2轉(zhuǎn)錄水平的上調(diào)作用最為顯著。 免疫移植劑對(duì)PBLs亞群Qa-2膜蛋白表達(dá)的影響:對(duì)于CD4~*T淋巴細(xì)胞Qa-2MFI的影響,小劑量CsA即有明顯的上調(diào)作用,中等劑量作用最為顯著。小劑量激素和MMF組與正常組沒有明顯差異,但較高劑量激素和MMF對(duì)CD4~+T淋巴細(xì)胞Qa-2 MFI有明顯的上調(diào)作用,并分別于中等劑量和中高劑量達(dá)到最大作用。與轉(zhuǎn)錄水平類似,中等劑量混合用藥對(duì)Qa-2轉(zhuǎn)錄水平的上調(diào)作用較其他單一用藥組更為顯著。免疫抑制劑對(duì)于CD8~+T淋巴細(xì)胞Qa-2的陽性表達(dá)率的影響明顯較弱。小劑量激素和中等以下劑量CsA和MMF均沒有明顯調(diào)節(jié)作用。隨著劑量增大,MMF和CsA的上調(diào)作用逐漸增強(qiáng)。聯(lián)合用藥作用比較明顯。 5、臨床腎移植患者術(shù)前、術(shù)后不同時(shí)間HLA-G表達(dá)的變化規(guī)律穩(wěn)定組: 外周血單個(gè)核細(xì)胞HLA-G轉(zhuǎn)錄水平于術(shù)后3天明顯低于術(shù)前水平。術(shù)后1周后上升到術(shù)前水平,并于術(shù)后1月左右達(dá)到高峰。之后下降,但術(shù)后2月和3個(gè)月以上的檢測(cè)結(jié)果顯示HLA-G轉(zhuǎn)錄水平仍明顯高于術(shù)前。 外周血淋巴細(xì)胞HLA-G膜蛋白表達(dá)總體較低。正常情況CD4~+T淋巴細(xì)胞HLA-G陽性表達(dá)率只有2.269±0.71896。術(shù)后一周內(nèi)淋巴細(xì)胞基本檢測(cè)不到HLA-G膜蛋白的表達(dá)。術(shù)后2周后,CD~4T淋巴細(xì)胞HLA-G表達(dá)明顯增強(qiáng),并逐漸達(dá)到高峰(＞14%),術(shù)后2月仍然明顯高于正常水平。與FK506血藥濃度和臨床藥物劑量結(jié)合分析發(fā)現(xiàn)CD4~+T細(xì)胞HLA-G表達(dá)與免疫抑制劑的用量明顯相關(guān)。 不論是術(shù)前還是術(shù)后不同時(shí)期,CD8~+T淋巴細(xì)胞HLA-G膜蛋白表達(dá)均處于極低水平,基本建成不到陽性表達(dá)細(xì)胞。 血漿可溶性HLA-G的表達(dá)術(shù)后一周內(nèi)也明顯低于正常水平,但術(shù)后2周之后,明顯升高并保持較高水平。 排斥組:排斥發(fā)生當(dāng)天和隨后3天,HLA-G表達(dá)明顯低于排斥前最后一次隨訪檢測(cè)的水平(膜結(jié)合型和可溶性)。但一周之后,升高明顯。直到術(shù)后三周到2月后,HLA-G表達(dá)保持較高水平,明顯高于術(shù)前。與轉(zhuǎn)錄水平和可溶性HLA-G檢測(cè)結(jié)果相比,CD4~+T細(xì)胞HLA-G表達(dá)的變化趨勢(shì)更為明顯,而且操作簡(jiǎn)單、誤差較小。 反復(fù)發(fā)生排斥反應(yīng)的患者CD4~+T細(xì)胞HLA-G表達(dá)始終處于較低的表達(dá)水平,加大免疫抑制劑藥物劑量對(duì)HLA-G的表達(dá)影響較小。 結(jié)論: 1、通過動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)移植術(shù)后不同時(shí)間小鼠Qa-2的表達(dá)變化規(guī)律,首次發(fā)現(xiàn):移植術(shù)后早期,尤其是在用藥狀態(tài)下,移植物浸潤淋巴細(xì)胞、外周血淋巴細(xì)胞Qa-2表達(dá)水平明顯下調(diào),發(fā)生于淋巴細(xì)胞活化的階段。這一階段尚未造成嚴(yán)重的移植物損傷,遠(yuǎn)遠(yuǎn)早于肉眼排斥的發(fā)生。 2、免疫抑制劑可明顯提高移植物、浸潤淋巴細(xì)胞、外周血淋巴細(xì)胞HLA-G的表達(dá),同時(shí)延長移植物存活時(shí)間,但過高劑量作用反而有所下降。免疫抑制劑中等劑量聯(lián)合應(yīng)用不但可以達(dá)到最大限度上調(diào)HLA-G表達(dá)的作用,而且對(duì)動(dòng)物的毒性較小,是最佳選擇。 3、臨床檢測(cè)結(jié)果顯示:腎移植術(shù)后外周血HLA-G的表達(dá),尤其是CD4~+T細(xì)胞HLA-G的動(dòng)態(tài)改變,與免疫抑制劑用藥時(shí)間和劑量密切相關(guān),并在排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)明顯下調(diào),有可能成為一種反映移植患者免疫耐受狀態(tài)和診斷排斥反應(yīng)發(fā)生的無創(chuàng)性檢測(cè)指標(biāo)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R617;R392.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 王冬平,李善如,張敏,李升團(tuán),鄭亞萍,耿志賢,李潤芳;三種小鼠血液生理生化正常值的測(cè)定[J];實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理;2000年02期

2 黃繼漢,黃曉暉,陳志揚(yáng),鄭青山,孫瑞元;藥理試驗(yàn)中動(dòng)物間和動(dòng)物與人體間的等效劑量換算[J];中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2004年09期

3 王冬平,隨麗華,吳娜,尚世臣,孔德強(qiáng),李桂軍,凡秀;清潔級(jí)BALB/c近交系小鼠常規(guī)生物學(xué)特性研究[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2005年05期

4 陳忠華;在體移植免疫實(shí)驗(yàn)研究應(yīng)注意的幾個(gè)問題[J];中華器官移植雜志;2002年01期

5 王艷芳,王紅勤,元新華;免疫抑制劑研究進(jìn)展[J];中國藥師;2005年05期

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本文編號(hào)：1404991