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豬帶絳蟲重組BCG-TSOL18疫苗構(gòu)建及其表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2018-01-09 11:25

  本文關(guān)鍵詞:豬帶絳蟲重組BCG-TSOL18疫苗構(gòu)建及其表達(dá) 出處:《中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào)》2015年10期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:目的構(gòu)建豬帶絳蟲重組BCG-TSOL18疫苗,研究TSOL18基因在BCG中的表達(dá)情況。方法通過(guò)酶切的方法從重組質(zhì)粒pGEX-TSOL18獲取豬帶絳蟲TSOL18基因,將其定向克隆到大腸桿菌-分枝桿菌穿梭表達(dá)質(zhì)粒pMV261中,構(gòu)建豬帶絳蟲重組質(zhì)粒pMV261-TSOL18,進(jìn)行酶切、PCR和測(cè)序鑒定;再將其電穿孔轉(zhuǎn)化入BCG,構(gòu)建豬帶絳蟲重組BCGTSOL18疫苗,進(jìn)行PCR鑒定;SDS-PAGE和Western blot分析TSOL18基因在BCG中的表達(dá)情況。結(jié)果通過(guò)酶切成功獲得了393bp的TSOL18基因片段;酶切、PCR和測(cè)序鑒定證明成功構(gòu)建了豬帶絳蟲重組質(zhì)粒pMV261-TSOL18;PCR鑒定證實(shí)豬帶絳蟲重組質(zhì)粒pMV261-TSOL18成功轉(zhuǎn)入BCG中,提示豬帶絳蟲重組BCG-TSOL18疫苗構(gòu)建成功;SDS-PAGE分析發(fā)現(xiàn)在相對(duì)分子質(zhì)量(Mr)約為14.7kD處有明顯的TSOL18目的蛋白條帶,Western blot證實(shí)表達(dá)的TSOL18目的蛋白能被兔抗血清和囊蟲病豬血清所識(shí)別。結(jié)論成功構(gòu)建了豬帶絳蟲重組BCG-TSOL18疫苗,TSOL18基因能夠在BCG中成功表達(dá),表達(dá)的TSOL18重組蛋白具有特異的抗原性,為該疫苗的進(jìn)一步研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The recombinant plasmid pMV261 - TSOL18 of Taenia solium was cloned into BCG to construct recombinant plasmid pMV261 - TSOL18 of Taenia solium .

【作者單位】: 遵義醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室;
【基金】:貴州省科技廳社會(huì)發(fā)展攻關(guān)項(xiàng)目(黔科合SY字[2011]3038號(hào))~~
【分類號(hào)】:R383.33
【正文快照】: 貴州省科技廳社會(huì)發(fā)展攻關(guān)項(xiàng)目(黔科合SY字[2011]3038號(hào))豬囊尾蚴病(cysticercosis cellulosae)是由豬帶絳蟲(Taenia solium)的續(xù)絳期幼蟲豬囊尾蚴寄生于人或豬引起的一種嚴(yán)重危害人類健康和畜牧業(yè)生產(chǎn)的人獸共患寄生蟲病,該病呈世界性分布,在我國(guó)主要流行于東北、華北、西北

【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1401215

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