本文關(guān)鍵詞：放線菌1356抗真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物分離鑒定及活性研究　出處：《沈陽(yáng)藥科大學(xué)》2008年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 放線菌1356菌株是本實(shí)驗(yàn)室從土壤放線菌中分離得到的一株具有抗真菌活性的菌株,系griseochromogenes的一個(gè)變種。其抗真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物KZJ-1,在實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)多種農(nóng)業(yè)致病真菌有很好的抑菌殺菌活性,具有很好的應(yīng)用前景。 本論文利用有機(jī)溶媒萃取、大孔吸附樹脂洗脫和制備型高效液相等分離提純方法,成功地從菌株1356發(fā)酵液中分離純化了其抗真菌成分—KZJ-1。同時(shí)考察了KZJ-1的理化性質(zhì)：進(jìn)行了穩(wěn)定性試驗(yàn)及紙色譜、pH色譜實(shí)驗(yàn)。采用核磁共振波譜(NMR)、質(zhì)譜(MS)、紫外(UV)、紅外(IR)吸收光譜技術(shù)確證菌種1356抗真菌代謝產(chǎn)物——KZJ-1為魯斯霉素；解釋該結(jié)構(gòu)在NMT、MS、UV、IR等譜圖中的特征吸收峰、共振峰及特征離子的一一對(duì)應(yīng)歸屬；首次利用二維核磁共振技術(shù)確定了魯斯霉素分子中各個(gè)C原子的歸屬。摸索出KZJ-1液相檢測(cè)條件為：流速為0.8 mL·min-1,進(jìn)樣量20μL,檢測(cè)波長(zhǎng)303nm,流動(dòng)相為甲醇：水=75：25,為后續(xù)工作奠定了基礎(chǔ)。 通過胞內(nèi)外含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)得知,KZJ-1主要存在于菌絲體當(dāng)中。胞內(nèi)與胞外活性成分比為7：1,這為發(fā)酵液預(yù)處理時(shí)棄去上清液提供了依據(jù)。 光熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表明,KZJ-1對(duì)光熱不穩(wěn)定,特別是光照條件下,KZJ-1極不穩(wěn)定。KZJ-1甲醇溶液,室溫避光條件下放置兩個(gè)月,活性約降低為原來一半(47.7%)；但自然日光下,一個(gè)星期活性降低為原來9.4%,兩個(gè)星期基本失活。 采用制備型高效液相等手段,成功的從菌株1356發(fā)酵液中分離提純出抗真菌活性物質(zhì)KZJ-1純度達(dá)98.3%。 本文利用核磁共振波譜(NMR)、質(zhì)譜(MS)、紫外(UV)、紅外(IR)吸收光譜技術(shù)確證KZJ-1為魯斯霉素,并用二維核磁共振技術(shù)重新對(duì)共軛烯烴部分C進(jìn)行歸屬。
[Abstract]:1356 Actinomyces Strains with antifungal activity strains from the soil actinomycetes isolated a strain, a variant of griseochromogenes. Its anti fungal secondary metabolite KZJ-1, has a good antifungal activity to many agricultural pathogenic fungi under laboratory conditions, has good application prospects..
In this paper, using organic solvent extraction, macroporous resin elution and preparative HPLC separation and purification method, successfully from 1356 strains in fermentation liquid separation and purification of its antifungal component KZJ-1. also investigated the physicochemical properties of KZJ-1: the stability test and paper color spectrum, pH chromatography by NMR experiments. Resonance spectroscopy (NMR), mass spectrometry (MS), ultraviolet (UV), infrared (IR) absorption spectroscopy confirmed 1356 strains of antifungal metabolites - KZJ-1 lucimycin; interpretation of the structure in the NMT, MS, UV, IR and other spectral features in absorption peaks, corresponding to the resonance peak and belonging the characteristics of ion; for the first time by using 2D NMR techniques to determine the Ruth by each C atoms in molecules belonging. Find out KZJ-1 detection in liquid phase conditions: the flow rate was 0.8 mL / min-1, sample volume 20 L, the detection wavelength of 303nm, the mobile phase was methanol: water =75:25, for The continuation of the work laid the foundation.
Through intracellular and extracellular content determination experiments, KZJ-1 was mainly found in mycelia. The ratio between intracellular and extracellular active components was 7:1, which provided a basis for abandoning the supernatant during pretreatment of fermentation broth.
The experiment shows that KZJ-1 is unstable to light and heat stability, heat, especially light conditions, KZJ-1 is extremely unstable.KZJ-1 methanol solution at room temperature for two months to avoid light conditions, the activity was reduced to about half (47.7%); but in natural daylight, a week reduced activity for the original 9.4%, two weeks basic deactivation.
The purity of the anti fungal active substance KZJ-1 was purified to 98.3%. by the preparation of the equal method of preparation of high performance liquid, and the isolation and purification of the antifungal active substance KZJ-1 from the fermentation broth of the strain.
In this paper, using nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR), mass spectrometry (MS), ultraviolet (UV), infrared (IR) absorption spectroscopy confirmed KZJ-1 as lucensomycin, and 2D NMR techniques to C conjugated alkenes were assigned.

【學(xué)位授予單位】：沈陽(yáng)藥科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R379

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本文編號(hào)：1399705