本文關鍵詞：銅綠假單胞菌中III型分泌系統(tǒng)受Rh1和PQS群體感應系統(tǒng)調(diào)節(jié)　出處：《西北大學》2009年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】： 銅綠假單胞菌是一種主要的機會致病菌,在宿主機體免疫低下的情況下可引起多種軟組織的感染。由于它對許多抗生素具有很高的內(nèi)在抗藥性,這給目前臨床上的治療帶來很大困難。 在銅綠假單胞菌中,群體感應系統(tǒng)(Quorum sensing,QS)和Ⅲ型分泌系統(tǒng)(TypeⅢsecretion system,T3SS)與該菌的感染和致病均有很大關系,因此很有必要研究這兩個系統(tǒng)間的調(diào)控關系。本文中我們通過基因敲除的方法破壞銅綠假單胞菌QS系統(tǒng)相關基因,并將T3SS相關基因exoS、exoY、exoT、exsD-pscA-L啟動子-報道子luxCDABE融合體整合到野生型菌株及QS系統(tǒng)突變菌株的染色體組上,通過檢測啟動子活性,比較這些基因在不同菌株中的表達情況。研究結(jié)果表明,T3SS中的exoS與exoT在pqsR基因突變體中的表達有明顯的增強,Rhl系統(tǒng)對這四種基因的表達具有抑制作用,而Las系統(tǒng)存在與否對T3SS基本沒有影響。以上結(jié)果說明,銅綠假單胞菌中的Rhl系統(tǒng)和喹諾酮信號(Pseudomonas Quinolone Signal,PQS)系統(tǒng)對T3SS相關基因的表達具有重要的調(diào)節(jié)作用。 另外,在實驗室以前的研究中,構(gòu)建了一個轉(zhuǎn)座突變體庫。在低于抑制濃度四環(huán)素存在的條件下,phzAl基因在很多突變體中的表達較野生型菌株而言均有一定程度的增加,這其中包括一個PA0011基因突變體,該基因可能編碼一種2-羥基-十二烷酰轉(zhuǎn)移酶(2-OH-lauroytransferase),這種酶與細菌細胞外膜的合成有關。在本文的研究中,我們構(gòu)建了PA0011基因的敲除突變體,通過實驗發(fā)現(xiàn),PA0011突變株較野生型菌株對包括四環(huán)素在內(nèi)的很多抗生素變得更加敏感。同時,低于抑制濃度的四環(huán)素和紅霉素對PA0011基因的表達有明顯的增強作用。除此之外,在低于抑制濃度四環(huán)素存在的條件下,lasI、lasR、rhlI、rhlR、pqsH、pqsR、rhlA、lasB等基因在PA0011突變株中的表達較野生型均有明顯的增加。這一研究結(jié)果表明,PA0011基因與銅綠假單胞菌的QS系統(tǒng)及抗生素的易感性有很大關系,PA0011基因可能作為一種潛在的藥物作用靶點來控制銅綠假單胞菌的感染過程。
[Abstract]:Pseudomonas aeruginosa is a major opportunistic pathogen that can cause multiple soft tissue infections when the host organism is immunocompromised . As it has a high intrinsic resistance to many antibiotics , it poses a great difficulty in the current clinical treatment . In this paper , the expression of exoS , exoY , exoT , exsD - pscA - L promoter in pqsR gene was significantly enhanced by gene knockout . In this paper , we constructed a mutant of PA11 gene , which may encode a 2 - hydroxy - dodecanyltransferase ( 2 - OH - dodecytransferase ) , which may encode a 2 - hydroxy - dodecanyltransferase ( 2 - OH - dodecytransferase ) .

【學位授予單位】：西北大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R378

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本文編號：1396781