本文關鍵詞：人呼吸道合胞病毒截短F1重組蛋白包涵體的制備、純化和復性　出處：《微生物學免疫學進展》2015年03期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的將前期在大腸埃希桿菌中獲得表達的A型人呼吸道合胞病毒蘭州分離株截短的F1重組蛋白進行純化和復性,為后期動物免疫制備抗原。方法 37℃誘導重組菌體p ET-42b-F1J/Rossata,誘導完畢后離心收集菌體,高壓破碎菌體并收集包涵體后用不同濃度的Triton X-100(細胞裂解液)洗滌包涵體3次。洗滌的包涵體用8 mol/L尿素進行溶解并用鎳離子親和層析方法進行初步純化,用陽離子交換層析方法對初步純化蛋白進行最終的純化。親和層析純化蛋白用3種不同的復性液進行了稀釋復性。結果 37℃誘導5 000 m L重組菌p ET-42b-F1J/Rossata共收獲37 g濕菌體,經(jīng)過不同濃度Triton X-100洗滌包涵體后純度可達75%。包涵體用8 mol/L尿素溶解后經(jīng)鎳離子親和層析純化純度約為40%,再用陽離子交換層析介質SP HP進一步純化樣品后純度可達90%。純化蛋白以3種不同的復性液都能得到復性,其中復性液3的復性效果相對較好。結論實驗中探索了人呼吸道合胞病毒截短F1重組蛋白包涵體的純化方法及步驟,為后期的蛋白制備及動物免疫奠定了基礎。
[Abstract]:Objective to purify and renaturate the truncated F1 recombinant protein of human respiratory syncytial virus type A isolated from Lanzhou strain of Escherichia coli. Methods the recombinant strain pET-42b-F1J / Rossata was induced at 37 鈩，

本文編號：1383239