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大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離鑒定及免疫調(diào)節(jié)性能初探

發(fā)布時(shí)間:2018-01-05 02:33

  本文關(guān)鍵詞:大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離鑒定及免疫調(diào)節(jié)性能初探 出處:《天津醫(yī)藥》2015年06期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:目的分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs),鑒定其向脂肪細(xì)胞和軟骨細(xì)胞的分化潛能,并探討其免疫調(diào)節(jié)性能。方法無菌條件下摘取Sprague-Dawley(SD)大鼠股骨和脛骨,全骨髓貼壁法培養(yǎng)BMSCs,胰酶消化傳代培養(yǎng)。待培養(yǎng)至第3代時(shí)進(jìn)行流式鑒定,檢測分離的BMSCs分化為脂肪細(xì)胞的潛能。與Wistar大鼠脾臟來源T細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng),分為直接接觸組和Transwell共培養(yǎng)組,探討其對(duì)T細(xì)胞亞群的影響,并研究其相關(guān)機(jī)制。結(jié)果BMSCs呈梭形生長,生長至第3代的細(xì)胞經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)幾乎不表達(dá)CD34和CD45,高表達(dá)CD29、CD44和CD90,且經(jīng)誘導(dǎo)后細(xì)胞可分化為脂肪細(xì)胞和軟骨細(xì)胞。與脾臟來源T細(xì)胞共培養(yǎng)可有效降低CD8+的效應(yīng)T細(xì)胞(Teffs)的比例,并且增加CD4+CD25+雙陽性的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs)數(shù)量,具有一定的免疫調(diào)節(jié)性能。與T細(xì)胞共培養(yǎng)后BMSCs的IL-10和TGF-β1基因表達(dá)顯著增強(qiáng),其中與T細(xì)胞直接接觸組效果更為明顯。結(jié)論 BMSCs可能通過直接接觸以及分泌細(xì)胞因子來發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。
[Abstract]:Isolation and cultivation of rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs), to identify the adipogenic and chondrogenic differentiation potential, and to investigate its immunomodulatory properties. Methods under sterile conditions the removal of Sprague-Dawley (SD) of rat femur and tibia, whole bone marrow adherent culture BMSCs, trypsin digestion and flow passage. Type identification to be cultured to the third generation, detection and separation of BMSCs differentiation into adipocytes. Potential co cultured with Wistar rat spleen derived T cells, divided into direct contact co culture group and Transwell group, to investigate its effect on T cell subsets, and study its related mechanism. Results BMSCs was spindle growth, growth of the third generation cells were detected almost no expression of CD34 and CD45, the high expression of CD29, CD44 and CD90, and the induced cells can differentiate into adipocytes and chondrocytes. Co cultured with spleen derived T cells can effectively reduce CD8+. T cell (Teffs) ratio, and increased regulatory T cells CD4+CD25+ double positive (Tregs) number, regulate the performance of certain immune. T cells were co cultured with BMSCs IL-10 and TGF- beta 1 gene expression was significantly increased, and the T cell direct contact group effect is more obvious. Conclusion BMSCs may through direct contact and secretion of cytokines play a role in regulating immune function.

【作者單位】: 天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物學(xué)教研室;
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)資助項(xiàng)目(2012AA021003) 國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(21177091) 天津市科技支撐計(jì)劃資助項(xiàng)目(12ZCZDSY03400)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: [17]Oliva AA,Kang Y,Truettner JS,et al.Fluid-percussion brain inju-ry induces changes in aquaporin channel expression[J].Neurosci-ence,2011,180:272-279.doi:10.1016/j.neuroscience.2011.02.020.[18]Bitoun M,Tappaz M.Taurine down-regulates basal and osmolari

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本文編號(hào):1381215

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