人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(HERV)序列在人星形膠質(zhì)細胞系及運動神經(jīng)元病患者血清中的檢測與分析
本文關(guān)鍵詞:人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(HERV)序列在人星形膠質(zhì)細胞系及運動神經(jīng)元病患者血清中的檢測與分析 出處:《吉林大學》2010年碩士論文 論文類型:學位論文
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【摘要】: 內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(human endogenous retrovirus,HERV)是大約幾百萬年前整合到人類祖先生殖細胞中的逆轉(zhuǎn)錄病毒,有30-50個家族,占人類基因組DNA含量的8%。在人類進化過程中,由于突變、缺失、插入等作用,大多數(shù)HERV已經(jīng)不具備編碼能力,但是仍有一部分HERV依然有完整的開放閱讀框,甚至能形成逆轉(zhuǎn)錄病毒樣顆粒。近年來研究發(fā)現(xiàn),HERV可能與自身免疫性疾病,如類風濕性關(guān)節(jié)炎;一些腫瘤,如人黑色素瘤、睪丸生殖細胞瘤、絨毛膜癌、畸胎瘤等;神經(jīng)退行性疾病,如多發(fā)性硬化癥、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化等很多種疾病相關(guān)。 本實驗首先以人星形膠質(zhì)細胞系為研究對象,檢測HERV的拷貝數(shù),又利用運動神經(jīng)元病(motor neuron disease,MND)患者血清及非MND患者血清,探討HERV與MND的相關(guān)性。分別提取細胞及患者血清中DNA,進行實時定量PCR檢測HERV-K pol在人星形膠質(zhì)細胞及患者血清中的拷貝數(shù);利用常規(guī)PCR產(chǎn)物進行TA-cloning,最終進行序列分析、比對,以檢測HERV-K pol序列在人星形膠質(zhì)細胞系及MND患者血清中存在的基序突變,從而判斷HERV-K pol基因突變與MND發(fā)病機制的相關(guān)性。為進一步研究HERV與腦腫瘤及MND的關(guān)系提供線索。
[Abstract]:Endogenous retrovirus (human endogenous, retrovirus, HERV) is about millions of years ago to integrate human ancestors in germ cells of the retrovirus, 30-50 family, accounting for the human genome content of DNA 8%. in human evolution, due to mutation, deletion, insertion and so on, most of the HERV does not have the encoding ability, but there are still a part of the HERV still has a complete open reading frame, even the formation of retrovirus like particles. In recent years, the study found that HERV may be related to autoimmune diseases, such as rheumatoid arthritis; some tumors, such as melanoma, germ cell tumor, testicular choriocarcinoma, teratoma; neurodegenerative diseases, such as multiple sclerosis, amyotrophic lateral sclerosis and other diseases.
The first experiment in human astrocyte cell line as the research object, the copy number detection of HERV, and the use of motor neuron disease (motor neuron, disease, MND) in serum of patients with serum and non MND, to investigate the correlation between HERV and MND. Were extracted from the cells and serum in patients with DNA, the copy number for detection of HERV-K by real-time pol PCR in astrocytes and in the serum of the patients; the use of TA-cloning product of conventional PCR, the final sequence analysis, alignment, motif for detection of HERV-K pol sequences present in the serum of patients with human astrocyte cell line and MND mutation in HERV-K, in order to determine the relationship between pol gene mutation and the pathogenesis of MND provide clues. Further study the relationship between HERV and brain tumors and MND.
【學位授予單位】:吉林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2010
【分類號】:R346
【共引文獻】
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1 胡r,
本文編號:1369050
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